
La resistencia a los ácidos es una propiedad física de ciertas células bacterianas y eucariotas , así como de algunas estructuras subcelulares , específicamente su resistencia a la decoloración por ácidos durante los procedimientos de tinción de laboratorio . [1] [2] Una vez teñidos como parte de una muestra, estos organismos pueden resistir los procedimientos de decoloración basados en ácidos y/o etanol comunes en muchos protocolos de tinción, de ahí el nombre de resistencia a los ácidos . [2]
Los mecanismos de resistencia a los ácidos varían según la especie, aunque el ejemplo más conocido se encuentra en el género Mycobacterium , que incluye las especies responsables de la tuberculosis y la lepra . La resistencia a los ácidos de las micobacterias se debe al alto contenido de ácido micólico de sus paredes celulares , que es responsable del patrón de tinción de mala absorción seguida de alta retención. Algunas bacterias también pueden ser parcialmente resistentes a los ácidos, como Nocardia .
Los organismos acidorresistentes son difíciles de caracterizar con técnicas microbiológicas estándar, aunque se pueden teñir con colorantes concentrados, en particular cuando el proceso de tinción se combina con calor. Algunos, como las micobacterias , se pueden teñir con la tinción de Gram , pero no reaccionan bien al violeta cristal y, por lo tanto, aparecen de color violeta claro, lo que aún puede dar como resultado una identificación incorrecta de bacterias gramnegativas. [3]
La técnica de tinción más común utilizada para identificar bacterias acidorresistentes es la tinción de Ziehl-Neelsen , en la que las especies acidorresistentes se tiñen de rojo brillante y se destacan claramente contra un fondo azul. Otro método es el método de Kinyoun , en el que las bacterias se tiñen de rojo brillante y se destacan claramente contra un fondo verde. Las micobacterias acidorresistentes también se pueden visualizar mediante microscopía de fluorescencia utilizando colorantes fluorescentes específicos ( tinción de auramina-rodamina , por ejemplo). [4]
Algunas técnicas de tinción acidorresistente
- Tinción de Ziehl-Neelsen (tipos de blanqueador clásico y modificado) [5]
- Tinción de Kinyoun
- Para las personas daltónicas (o en entornos donde es difícil detectar bacterias rojas), el azul Victoria se puede sustituir por fucsina carbol y se puede utilizar ácido pícrico como contratinción en lugar de azul de metileno , y se puede utilizar el resto de la técnica de Kinyoun. [6]
- Varias técnicas de tinción de esporas bacterianas utilizando Kenyon, por ejemplo
- El método de Moeller
- Método de Dorner [7] (decolorante de alcohol ácido) sin la modificación de Schaeffer–Fulton [8] (decoloración con agua) [9]
- Método de detergente, utilizando Tergitol 7, surfactante no iónico de éter poliglicólico tipo NP-7 [10]
- Varias técnicas de tinción de esporas bacterianas utilizando Kenyon, por ejemplo
- Tinción de Fite [11]
- Tinción de Fite-Faraco [12] [13]
- Tinción de Wade Fite [14]
- Tinción de Ellis y Zabrowarny [15] [16] (sin fenol/ácido carbólico)
- Tinción de auramina-rodamina
- Tinción de fenol auramina
Estructuras acidorresistentes notables
Muy pocas estructuras son acidorresistentes, por lo que la tinción para determinar la resistencia a los ácidos es particularmente útil en el diagnóstico. Los siguientes son ejemplos notables de estructuras que son acidorresistentes o acidorresistentes modificadas:
- Todas las micobacterias : M. tuberculosis , M. leprae , M. smegmatis y micobacterias atípicas
- Actinomicetos (especialmente algunos aeróbicos) con ácido micólico en su pared celular (nótese que los Streptomyces NO tienen); no debe confundirse con Actinomyces , que es un género de actinomiceto no ácido-alcohol resistente.
- Nocardia (débilmente resistente a los ácidos; resiste la decoloración con concentraciones de ácido más débiles)
- Rodococo
- Gordonia (un actinomiceto)
- Tsukamurella
- Dieta
- Cabeza de espermatozoide
- Esporas bacterianas, véase endospora
- Legionella micdadei
- Ciertas inclusiones celulares, por ejemplo
- Cuerpos de inclusión citoplasmáticos observados en
- Neuronas en la capa 5 de la corteza cerebral lipofuscinosis ceroidea neuronal ( enfermedad de Batten ).
- Cuerpos de inclusión nucleares observados en
- Saturnismo
- Envenenamiento por bismuto.
- Cuerpos de inclusión citoplasmáticos observados en
- Ooquistes de algunos parásitos coccidios en materia fecal, como:
- Cryptosporidium parvum , [17]
- Isospora belli [18]
- Cyclospora cayetanensis . [19]
- Algunos otros parásitos:
- Sarcocystis
- Los huevos de Taenia saginata se tiñen bien, pero los de Taenia solium no (se puede utilizar para distinguirlos)
- Los quistes hidatídicos , especialmente sus " ganchitos ", se tiñen irregularmente con la tinción ZN pero emanan fluorescencia roja brillante bajo luz verde y pueden ayudar a la detección en fondos moderadamente densos o con escasos "ganchitos". [20]
- Las formas de levadura fúngica se tiñen de manera inconsistente con la tinción ácido-resistente, que se considera una tinción de espectro estrecho para hongos. [21] En un estudio sobre la resistencia a los ácidos de los hongos, [22] el 60% de los blastomyces y el 47% de los histoplasmas mostraron una tinción citoplasmática positiva de las células similares a las levaduras, y Cryptococcus o candida no se tiñeron, y se observó una tinción muy rara en las endosporas de Coccidioides.
Referencias
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- ^ Abe C (2003). "[Estandarización de las pruebas de laboratorio para la tuberculosis y sus pruebas de aptitud]". Kekkaku . 78 (8): 541–51. PMID 14509226.
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- ^ Teoría y práctica de las técnicas histológicas, John D Bancroft, 6.ª ed., pág. 314
- ^ Dorner, W. 1926. Un procedimiento simple para la coloración de las esporas. Le Lait 6:8–12.
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- ^ "Protocolo de tinción de endosporas". 1 de junio de 2012. Archivado desde el original el 1 de junio de 2012 . Consultado el 7 de marzo de 2022 .
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- ^ Wages ds, Wear dJ. Resistencia a los ácidos de los hongos en la blastomicosis y la histoplasmosis. Arch Pathol Lab Med 1982; 106:440-41.
Ejemplos de protocolos en línea
- Protocolo Ziehl–Neelsen ( formato PDF ).
- Método alternativo de Ellis y Zabrowarny Archivado el 4 de enero de 2006 en Wayback Machine para la tinción de AFB.