quinasa de citrón

La quinasa interactuante con Rho de Citron es una enzima que en humanos está codificada por el gen CIT . ^{[ 5 ] [ 6 ]}

Citron es una proteína de 183 kDa que contiene un dedo de zinc C6H2 , un dominio PH y una larga región formadora de hélice enrollada que incluye 4 cremalleras de leucina y un sitio de unión rho / rac . Fue descubierta como un efector rho/rac en 1995, interactuando solo con las formas unidas a GTP de rho y rac 1. Al mostrar una organización proteica distintiva, esta proteína define una clase separada de socios de rho. ^{[ 7 ]} Usando un enfoque de clonación basado en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), se ha identificado una variante de empalme de citron, citron quinasa (citron-K) con un extremo amino alternativo . Esta extensión N-terminal contiene un dominio de proteína quinasa que tiene aproximadamente un 50% de identidad de secuencia con las secuencias de ROCK , ROK, proteína quinasa de distrofia miotónica ( MDPK ) y el efector CDC42 conocido como MRCK o GEK. ^{[ 8 ]} La quinasa Citron, que se asemeja a la familia de quinasas ROCK y, en comparación con ella, es por lo tanto una proteína de dominios múltiples que contiene un dominio quinasa N-terminal, un dominio de hélice enrollada interna (CC) con un sitio de interacción con Rho/Rac y una región C-terminal que consta de un dedo de zinc, un dominio de homología de pleckstrina (PH), un dominio de homología de Citron (CNH), un dominio de unión SH3 putativo y un motivo de direccionamiento PDZ . Su ortólogo en la mosca ( Drosophila ) se llama Sticky. ^{[ 9 ] [ 10 ]} La importancia de los diferentes dominios de citron-K en su localización en diferentes etapas se discute más adelante.

Al investigar la distribución tisular de las isoformas de citron con y sin el dominio quinasa, se ha demostrado que la forma no quinasa está restringida a la región cerebral mientras que la forma quinasa se expresa ampliamente. ^{[ 8 ]} Los análisis de inmunofluorescencia determinaron la localización de citron-K y su comportamiento durante la citocinesis . Citron-K apareció por primera vez en la corteza ecuatorial en anafase , se concentró en el surco de segmentación en telofase temprana , se acumuló en el medio del puente intercelular con la ingresión completa del surco de segmentación en telofase media, y formó una estructura en forma de anillo en el cuerpo medio en telofase tardía, con una tasa de recambio insignificante en el cuerpo medio. En otras palabras, la proteína es mucho menos dinámica en el cuerpo medio. ^{[ 11 ]} Usando una serie de deleciones, se observó que distintas regiones del dominio CC (bobina enrollada) de Citron-K regulan diferencialmente las localizaciones de Citron-K durante la citocinesis. La parte C-terminal del dominio CC se localiza en el surco de segmentación y el cuerpo medio, mientras que la parte N-terminal del dominio CC se localiza en el huso central en la telofase temprana y en la región externa del cuerpo medio en la telofase tardía. ^{[ 11 ]}

Como se mencionó anteriormente, se creía que la citrina-K actuaba en la citocinesis . Su agotamiento afecta el mantenimiento del cuerpo medio y su sobreexpresión en células HeLa hizo que las células huésped se volvieran multinucleadas. El fallo de la citocinesis en las células con agotamiento de citrina-K ocurrió después de la invaginación completa del surco de segmentación, ^{[ 12 ]} en la etapa de abscisión . No se observó desensamblaje de microtúbulos en ninguna de las células con agotamiento de citrina-K que presentaban fallo de la citocinesis. El modo dominante de fallo fue la incapacidad de las células hijas, que están conectadas por un puente intercelular más corto, para separarse correctamente. A medida que los microtúbulos del cuerpo medio se desplazaban desde el centro hacia cualquiera de las dos células hijas, las dos células se fusionaban de nuevo con los microtúbulos absorbidos por esa célula hija. En resumen, la citrina-K es importante para mantener la estructura adecuada del cuerpo medio que sostiene los microtúbulos del puente intercelular entre las dos células hijas y, por lo tanto, es necesaria para una transición exitosa de la constricción a la abscisión. En términos moleculares, el agotamiento de citron-K afectó la acumulación de 3 proteínas clave: Rho, Anillin y septinas (específicamente septina 6 y 7) en el puente intercelular durante la telofase media-tardía, las cuales, en etapas anteriores (telofase temprana a media), se encontraban colocalizadas con ellas.

Se ha demostrado que CIT (gen) interactúa con RHOB ^{[ 7 ]} y RHOA . ^{[ 7 ] [ 13 ]}

Se ha sugerido que Citron-K o su ortólogo en la mosca, Sticky, interactúan con varias moléculas en la citocinesis, como la kinesina-3 ( KIF14 ), ^{[ 14 ]} la actina , la cadena ligera de miosina , ^{[ 15 ]} y la anilina . ^{[ 16 ]}

Citron-K se expresa durante la neurogénesis y desempeña funciones importantes en la división de las células progenitoras neuronales. Las mutaciones recesivas en Citron-K causan microcefalia grave tanto en ratas como en ratones. En humanos y roedores, la pérdida de la expresión de Citron-K produce defectos en la citocinesis neurogénica. De manera similar, en Drosophila, la reducción de la expresión de Citron-K mediante ARN de interferencia produce un fallo en la abscisión celular. ^{[ 17 ]} CIT está asociado con la microlisencefalia .

Durante la liberación viral del VIH-1 en líneas celulares humanas, además de aumentar la producción y liberación viral, la citron quinasa (un efector de RhoA) potenció la liberación de vesículas que contenían HSC70, CD82 y LAMP1, lo que sugiere que la citron quinasa está involucrada en la exocitosis de los compartimentos endosomales tardíos. ^{[ 19 ]}

• Ubicación del genoma humano CIT y página de detalles del gen CIT en el navegador genómico de UCSC .