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Centrifugación

Centrífuga de laboratorio La centrifugación es un proceso mecánico que utiliza la fuerza centrífuga para separar partículas de una solución según su tamaño, forma, densidad, vis...

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Centrífuga de laboratorio

La centrifugación es un proceso mecánico que utiliza la fuerza centrífuga para separar partículas de una solución según su tamaño, forma, densidad, viscosidad del medio y velocidad del rotor. [ 1 ] Los componentes más densos de la mezcla se desplazan alejándose del eje de la centrífuga , mientras que los menos densos se desplazan hacia él. Los químicos y biólogos pueden aumentar la fuerza gravitacional efectiva del tubo de ensayo para que el precipitado (sedimento) se desplace rápida y completamente hasta el fondo. El líquido restante que se encuentra sobre el precipitado se denomina sobrenadante .

Existe una correlación entre el tamaño y la densidad de una partícula y la velocidad a la que se separa de una mezcla heterogénea, cuando la única fuerza aplicada es la gravedad. Cuanto mayor sea el tamaño y la densidad de las partículas, más rápido se separarán de la mezcla. Al aplicar una mayor fuerza gravitatoria efectiva a la mezcla, como lo hace una centrífuga, se acelera la separación de las partículas. Esto resulta ideal en entornos industriales y de laboratorio, ya que las partículas que de forma natural tardarían mucho tiempo en separarse pueden separarse en mucho menos tiempo. [ 2 ]

La velocidad de centrifugación se especifica mediante la velocidad angular, generalmente expresada en revoluciones por minuto (RPM), o la aceleración, expresada como g . El factor de conversión entre RPM y g depende del radio del rotor de la centrífuga . La velocidad de sedimentación de las partículas en la centrifugación es función de su tamaño y forma, la aceleración centrífuga, la fracción volumétrica de sólidos presentes, la diferencia de densidad entre la partícula y el líquido, y la viscosidad . La aplicación más común es la separación de sólidos de suspensiones altamente concentradas, que se utiliza en el tratamiento de lodos de depuradora para la deshidratación, donde se produce un sedimento menos consistente. [ 3 ]

El método de centrifugación tiene una amplia variedad de aplicaciones industriales y de laboratorio; este proceso no solo se utiliza para separar dos sustancias miscibles, sino también para analizar las propiedades hidrodinámicas de las macromoléculas. [ 4 ] Es uno de los métodos de investigación más importantes y comúnmente utilizados en bioquímica , biología celular y molecular . En las industrias química y alimentaria, las centrífugas especiales pueden procesar un flujo continuo de partículas que se convierten en un líquido separado, como el plasma. La centrifugación es también el método más común utilizado para el enriquecimiento de uranio , basándose en la ligera diferencia de masa entre los átomos de U-238 y U-235 en el gas hexafluoruro de uranio . [ 5 ]

Fórmula matemática

En una suspensión líquida, muchas partículas o células se depositan gradualmente en el fondo del recipiente debido a la gravedad ; sin embargo, esto puede tardar un tiempo excesivamente largo. Otras partículas, muy pequeñas, no pueden aislarse en la solución a menos que se expongan a una alta fuerza centrífuga . Al girar la suspensión a una determinada velocidad ( revoluciones por minuto , RPM), la fuerza centrífuga permite que las partículas se desplacen radialmente alejándose del eje de rotación. La fórmula general para calcular las revoluciones por minuto (RPM) de una centrífuga es:

RPAGMETRO=gramor{\displaystyle RPM={\sqrt {g \over r}}},

donde g representa la aceleración centrífuga relativa (FCR) y r el radio desde el centro del rotor hasta un punto en la muestra (y el resultado se multiplica por 60 para convertir de segundos a minutos). [ 6 ]

Sin embargo, dependiendo del modelo de centrífuga utilizado, tanto el ángulo del rotor como el radio pueden variar, por lo que la fórmula se modifica. Por ejemplo, el rotor Sorvall #SS-34 tiene un radio máximo de 10,8  cm, por lo que la fórmula se convierte enRPAGMETRO=299gramor{\textstyle RPM=299{\sqrt {g \over r}}}, lo que puede simplificarse aún más aRPAGMETRO=91gramo{\textstyle RPM=91{\sqrt {g}}}. [ 6 ]

En comparación con la gravedad, la fuerza de las partículas se denomina «Fuerza Centrífuga Relativa» (FCR). Es la fuerza perpendicular ejercida sobre el contenido del rotor como resultado de la rotación, siempre en relación con la gravedad terrestre, y mide la fuerza de rotores de diferentes tipos y tamaños. Por ejemplo, una FCR de 1000 xg significa que la fuerza centrífuga es 1000 veces mayor que la fuerza gravitatoria terrestre. La FCR depende de la velocidad de rotación en rpm y de la distancia de las partículas al centro de rotación. La fórmula más común para calcular la FCR es: [ 7 ]

RdoF=1.118×10−5×r×(rpagmetro)2{\displaystyle RCF=1.118\times 10^{-5}\times r\times (rpm)^{2}},

dónde1.118×10−5{\textstyle 1.118\times 10^{-5}}es un factor empírico constante; r es el radio, expresado en centímetros , entre el eje de rotación y un punto de la muestra; y rpm es la velocidad en revoluciones por minuto. [ 7 ]

Históricamente, muchas separaciones se han llevado a cabo a una velocidad de 3000 rpm; una guía aproximada para la fuerza 'g' ejercida a esta velocidad es multiplicar el radio de centrifugación por un factor de 10, por lo que un radio de 160  mm da aproximadamente 1600 x g. [ 8 ] Este es un enfoque bastante arbitrario, ya que la RCF aplicada depende linealmente del radio, por lo que un radio un 10 % mayor significa que se aplica una RCF un 10 % mayor a la misma velocidad. Aproximadamente, la fórmula anterior se puede simplificar aRdoF=10×r{\textstyle RCF=10\times r}, con un margen de error de tan solo el 0,62%.

Centrifugación en la investigación biológica

Microcentrífugas

Las microcentrífugas son modelos de sobremesa especialmente diseñados con rotores ligeros y de pequeño volumen capaces de una aceleración muy rápida de hasta aproximadamente 17 000 rpm. Son dispositivos ligeros que se utilizan principalmente para la centrifugación de corta duración de muestras de hasta aproximadamente 0,2–2,0 mL. Sin embargo, debido a su pequeño tamaño, son fácilmente transportables y, si es necesario, pueden operarse en una cámara frigorífica. [ 9 ] Pueden estar refrigeradas o no. La microcentrífuga se utiliza normalmente en laboratorios de investigación donde se requiere someter pequeñas muestras de moléculas biológicas, células o núcleos a una alta fuerza centrífuga relativa (FCR) durante intervalos de tiempo relativamente cortos. [ 9 ] Las microcentrífugas diseñadas para operar a alta velocidad pueden alcanzar hasta 35 000 rpm, proporcionando una FCR de hasta 30 000×g, y se denominan microcentrífugas de alta velocidad. [ 10 ]

Centrífugas de baja velocidad

Las centrífugas de baja velocidad se utilizan para recolectar precipitados químicos, células intactas (animales, vegetales y algunos microorganismos), núcleos, cloroplastos, mitocondrias grandes y fragmentos de membrana plasmática de mayor tamaño. También se realizan gradientes de densidad para la purificación de células en estas centrífugas. Los rotores de cubeta basculante suelen utilizarse ampliamente debido a la gran flexibilidad en el tamaño de la muestra mediante el uso de adaptadores. [ 9 ] Estas máquinas tienen velocidades máximas de rotor inferiores a 10 000 rpm y varían desde pequeñas centrífugas de sobremesa hasta grandes centrífugas de pie. [ 11 ]

Centrífugas de alta velocidad

Las centrífugas de alta velocidad se utilizan normalmente para recolectar microorganismos, virus , mitocondrias , lisosomas , peroxisomas y membranas tubulares de Golgi intactas. La mayoría de las tareas simples de sedimentación se llevan a cabo en rotores de ángulo fijo. Algunos trabajos de gradiente de densidad para purificar células y orgánulos se pueden llevar a cabo en rotores de cubeta basculante, o en el caso de gradientes de Percoll en rotores de ángulo fijo. [ 9 ] Las centrífugas de alta velocidad o supervelocidad pueden manejar volúmenes de muestra mayores, desde unas pocas decenas de mililitros hasta varios litros. Además, las centrífugas más grandes también pueden alcanzar velocidades angulares más altas (alrededor de 30 000 rpm). Los rotores pueden venir con diferentes adaptadores para sostener tubos de ensayo , botellas o placas de microtitulación de varios tamaños .

Ultracentrifugaciones

La ultracentrifugación utiliza una fuerza centrífuga elevada para estudiar las propiedades de las partículas biológicas a velocidades excepcionalmente altas. Las ultracentrífugas actuales pueden girar hasta 150 000 rpm (equivalente a 1 000 000 xg). [ 12 ] Se utilizan para extraer todas las vesículas de membrana derivadas de la membrana plasmática, el retículo endoplasmático (RE) y la membrana de Golgi , endosomas , ribosomas , subunidades ribosómicas, plásmidos , ADN , ARN y proteínas en rotores de ángulo fijo. [ 9 ] En comparación con las microcentrífugas o las centrífugas de alta velocidad, las ultracentrífugas pueden aislar partículas mucho más pequeñas y, además, mientras que las microcentrífugas y las supercentrífugas separan las partículas en lotes (los volúmenes limitados de muestras deben manipularse manualmente en tubos de ensayo o frascos), las ultracentrífugas pueden separar moléculas en sistemas de flujo continuo o por lotes.

La ultracentrifugación se emplea para la separación de macromoléculas/estudios cinéticos de unión de ligandos, la separación de diversas fracciones de lipoproteínas del plasma y la desprotonación de fluidos fisiológicos para el análisis de aminoácidos. [ 1 ]

Son las centrífugas más utilizadas para la purificación por gradiente de densidad de todas las partículas, excepto las células. Si bien tradicionalmente se han utilizado rotores de cubeta basculante para este fin, también se emplean rotores de ángulo fijo y rotores verticales, especialmente para gradientes autogenerados, lo que puede mejorar considerablemente la eficiencia de la separación. Existen dos tipos de ultracentrífugas: las analíticas y las preparativas.

Ultracentrifugación analítica

La ultracentrifugación analítica (AUC) se puede utilizar para determinar las propiedades de las macromoléculas, como su forma, masa, composición y conformación. Es una técnica de análisis biomolecular comúnmente empleada para evaluar la pureza de la muestra, caracterizar los mecanismos de ensamblaje y desensamblaje de complejos biomoleculares , determinar las estequiometrías de las subunidades , identificar y caracterizar los cambios conformacionales macromoleculares y calcular las constantes de equilibrio y los parámetros termodinámicos para sistemas autoasociativos y heteroasociativos. [ 13 ] Las ultracentrífugas analíticas incorporan un sistema de detección óptica basado en luz visible / ultravioleta para el monitoreo en tiempo real del progreso de la muestra durante la centrifugación. [ 14 ]

Las muestras se centrifugan con una solución de alta densidad, como sacarosa , cloruro de cesio o iodixanol . Esta solución puede tener una concentración uniforme en todo el tubo de ensayo ("cojín") o una concentración variable (" gradiente "). Las propiedades moleculares se pueden modelar mediante análisis de velocidad de sedimentación o análisis de equilibrio de sedimentación. Durante el proceso, las partículas o moléculas migrarán a través del tubo de ensayo a diferentes velocidades, dependiendo de sus propiedades físicas y las de la solución, y finalmente formarán un sedimento en el fondo del tubo o bandas a distintas alturas.

Ultracentrifugación preparativa

Las ultracentrífugas preparativas se utilizan a menudo para separar partículas según su densidad, aislar o recolectar partículas más densas para su inclusión en el sedimento y clarificar suspensiones que contienen partículas. En ocasiones, los investigadores también las utilizan cuando necesitan la flexibilidad de cambiar el tipo de rotor del instrumento. Estas ultracentrífugas pueden equiparse con una amplia gama de rotores, que permiten centrifugar muestras de diferente número, ángulo y velocidad. [ 14 ]

Proceso de fraccionamiento

En la investigación biológica, el fraccionamiento celular generalmente incluye el aislamiento de componentes celulares, conservando las funciones individuales de cada componente. Por lo general, la muestra celular se almacena en una suspensión que es:

  • Con pH neutro, lo que evita daños en la estructura de las proteínas, incluidas las enzimas (lo que podría afectar a los enlaces iónicos).
  • Isotónico (de igual potencial hídrico): esto evita la ganancia o pérdida de agua por parte de los orgánulos.
  • Genial: reduce la actividad general de la enzima liberada más adelante en el procedimiento.

La centrifugación es el primer paso en la mayoría de las fraccionaciones . Mediante centrifugación a baja velocidad, se pueden eliminar los restos celulares, dejando un sobrenadante que conserva el contenido celular. La centrifugación repetida a velocidades progresivamente mayores fraccionará los homogeneizados celulares en sus componentes. En general, cuanto menor sea el componente subcelular, mayor será la fuerza centrífuga necesaria para sedimentarlo. [ 15 ] La fracción soluble de cualquier lisado puede separarse posteriormente en sus constituyentes utilizando diversos métodos.

Centrifugación diferencial

La centrifugación diferencial es el método más sencillo de fraccionamiento por centrifugación, [ 9 ] comúnmente utilizado para separar orgánulos y membranas presentes en las células. Los orgánulos generalmente difieren entre sí en densidad y tamaño, lo que posibilita el uso de la centrifugación diferencial y la centrifugación en general. Los orgánulos pueden identificarse mediante pruebas con indicadores específicos de cada orgánulo. [ 6 ] La aplicación más extendida de esta técnica es la producción de fracciones subcelulares brutas a partir de un homogeneizado de tejido, como el del hígado de rata. [ 9 ] Las partículas de diferentes densidades o tamaños en una suspensión se sedimentan a diferentes velocidades, siendo las partículas más grandes y densas las que sedimentan más rápido. Estas velocidades de sedimentación pueden incrementarse mediante la aplicación de fuerza centrífuga. [ 16 ]

Una suspensión de células se somete a una serie de ciclos de fuerza centrífuga crecientes para producir una serie de sedimentos que contienen células con una tasa de sedimentación decreciente. El homogeneizado incluye núcleos, mitocondrias, lisosomas, peroxisomas, membranas plasmáticas y una amplia gama de vesículas derivadas de diversos compartimentos de membrana intracelulares y también de la membrana plasmática, generalmente en un medio tamponado. [ 9 ]

Centrifugación con gradiente de densidad

Se sabe que la centrifugación en gradiente de densidad es uno de los métodos más eficientes para separar partículas en suspensión, y se utiliza tanto como técnica de separación como método para medir la densidad de partículas o moléculas en una mezcla. [ 17 ]

Se utiliza para separar partículas en función de su tamaño, forma y densidad mediante un medio de densidades graduadas. Durante una centrifugación relativamente corta o lenta, las partículas se separan por tamaño, sedimentándose las más grandes a mayor profundidad que las más pequeñas. En una centrifugación larga o rápida, las partículas se desplazan hacia zonas del gradiente donde la densidad del medio es igual a la de la partícula; (ρp – ρm) → 0. Por lo tanto, una partícula pequeña y densa sedimenta inicialmente con menos facilidad que una partícula grande y de baja densidad. Las partículas grandes alcanzan su posición de densidad de equilibrio rápidamente, mientras que las pequeñas migran lentamente a través de la zona de partículas grandes y, finalmente, alcanzan una posición de equilibrio más profunda en el gradiente. [ 18 ]

Un tubo, tras ser centrifugado mediante este método, contiene partículas ordenadas por densidad según su altura. El objeto o partícula de interés se ubicará dentro del tubo en la posición que corresponda a su densidad. [ 19 ] Sin embargo, aún son posibles algunas sedimentaciones no ideales al utilizar este método. El primer problema potencial es la agregación no deseada de partículas, pero esto puede ocurrir en cualquier centrifugación. La segunda posibilidad se presenta cuando las gotas de solución que contienen partículas sedimentan. Esto es más probable que ocurra al trabajar con una solución que tiene una capa de suspensión flotando sobre un líquido denso, que de hecho tiene poco o ningún gradiente de densidad. [ 17 ]

Otras aplicaciones

Una centrífuga puede utilizarse para aislar pequeñas cantidades de sólidos retenidos en suspensión de líquidos, como en la separación de polvo de tiza del agua. En investigación biológica, puede utilizarse en la purificación de células de mamíferos, fraccionamiento de orgánulos subcelulares, fraccionamiento de vesículas de membrana, fraccionamiento de macromoléculas y complejos macromoleculares, etc. [ 9 ] La centrifugación se utiliza para obtener d-limoneno de cáscaras de cítricos. [ 20 ] La centrifugación se utiliza de muchas maneras diferentes en la industria alimentaria . Por ejemplo, en la industria láctea, se utiliza típicamente en la clarificación y desnatado de la leche , extracción de crema, producción y recuperación de caseína , producción de queso , eliminación de contaminantes bacterianos, etc. Esta técnica de procesamiento también se utiliza en la producción de bebidas, jugos, café, té, cerveza, vino , leche de soya , procesamiento/recuperación de aceite y grasa, manteca de cacao , producción de azúcar, etc. [ 21 ] También se utiliza en la clarificación y estabilización del vino .

En laboratorios forenses y de investigación, se puede utilizar en la separación de componentes de orina y sangre . También ayuda en la separación de proteínas mediante técnicas de purificación como la precipitación salina , por ejemplo, la precipitación con sulfato de amonio. [ 6 ] La centrifugación también es una técnica importante en el tratamiento de residuos , siendo uno de los procesos más comunes utilizados para la deshidratación de lodos . [ 22 ] Este proceso también desempeña un papel en la separación ciclónica , donde las partículas se separan de un flujo de aire sin el uso de filtros . En un colector ciclónico, el aire se mueve en una trayectoria helicoidal. Las partículas con alta inercia se separan por la fuerza centrífuga, mientras que las partículas más pequeñas continúan con el flujo de aire. [ 23 ]

Las centrífugas también se han utilizado en menor medida para aislar compuestos más ligeros que el agua, como el petróleo. En tales casos, la descarga acuosa se obtiene en la salida opuesta, de la cual los sólidos con una densidad mayor que uno son las sustancias objetivo para la separación. [ 24 ]

Historia

En 1923, Theodor Svedberg y su estudiante H. Rinde habían analizado con éxito soles de grano grueso en términos de su sedimentación gravitacional. [ 25 ] Los soles consisten en una sustancia distribuida uniformemente en otra sustancia, también conocida como coloide . [ 26 ] Sin embargo, los soles de grano más pequeño, como los que contienen oro, no podían analizarse. [ 25 ] Para investigar este problema, Svedberg desarrolló una centrífuga analítica, equipada con un sistema de absorción fotográfica, que ejercería un efecto centrífugo mucho mayor. [ 25 ] Además, desarrolló la teoría necesaria para medir el peso molecular. [ 26 ] Durante este tiempo, la atención de Svedberg se desvió del oro a las proteínas. [ 25 ]

Hacia 1900, se aceptaba generalmente que las proteínas estaban compuestas de aminoácidos; sin embargo, aún se debatía si las proteínas eran coloides o macromoléculas . [ 27 ] Una proteína que se investigaba en ese momento era la hemoglobina . Se determinó que tenía 712 átomos de carbono, 1130 de hidrógeno, 243 de oxígeno, dos átomos de azufre y al menos un átomo de hierro. Esto le daba a la hemoglobina un peso resultante de aproximadamente 16 000 daltons (Da), pero no estaba claro si este valor era un múltiplo de uno o de cuatro (dependiendo del número de átomos de hierro presentes). [ 28 ]

A través de una serie de experimentos que utilizaron la técnica de equilibrio de sedimentación , se hicieron dos observaciones importantes: la hemoglobina tiene un peso molecular de 68.000 Da, lo que sugiere que hay cuatro átomos de hierro presentes en lugar de uno, y que, independientemente de dónde se aislara la hemoglobina, tenía exactamente el mismo peso molecular. [ 25 ] [ 26 ] El hecho de que algo de una masa molecular tan grande pudiera encontrarse de forma consistente, independientemente de dónde se muestreara en el cuerpo, era algo sin precedentes y favorecía la idea de que las proteínas son macromoléculas en lugar de coloides. [ 27 ] Para investigar este fenómeno, se necesitaba una centrífuga con velocidades aún mayores, y así se creó la ultracentrífuga para aplicar la teoría de sedimentación-difusión. [ 25 ] Se determinó la misma masa molecular, y la presencia de un límite de dispersión sugirió que se trataba de una sola partícula compacta. [ 25 ] La aplicación posterior de la centrifugación mostró que, bajo diferentes condiciones, las grandes partículas homogéneas podían romperse en subunidades discretas. [ 25 ] El desarrollo de la centrifugación fue un gran avance en la ciencia experimental de las proteínas.

En 1937, Linderstorm-Lang descubrió que los tubos de gradiente de densidad podían utilizarse para medir la densidad. Hizo este descubrimiento mientras trabajaba con el virus del enanismo amarillo de la patata. [ 17 ] Este método también se utilizó en el famoso experimento de Meselson y Stahl, en el que demostraron que la replicación del ADN es semiconservativa mediante el uso de diferentes isótopos de nitrógeno . Utilizaron la centrifugación en gradiente de densidad para determinar qué isótopo o isótopos de nitrógeno estaban presentes en el ADN después de ciclos de replicación. [ 19 ]

Véase también

Referencias

  1. 1 2 "Teoría de la centrifugación" . Fischer Scientific . Thermo Fisher Scientific. Archivado del original el 20 de agosto de 2019. Recuperado el 9 de marzo de 2018 .
  2. ↑ Frei, Mark. "Conceptos básicos de centrifugación" . Sigma-Aldrich . Consultado el 10 de mayo de 2016 .
  3. ↑ "Centrifugación" . Lenntech . Consultado el 15 de octubre de 2021 .
  4. ↑ Garrett, Reginald H.; Grisham, Charles M. (2017). Bioquímica (5.ª ed.). Belmont, CA: Brooks/Cole, Cengage Learning. pág. 111. ISBN   9781133106296.
  5. ↑ Zielinski, Sarah. "¿Qué es el uranio enriquecido?" . Revista Smithsonian . Consultado el 22 de noviembre de 2020 .
  6. 1 2 3 4 Ballou, David P.; Benore, Marilee; Ninfa, Alexander J. (2008). Enfoques fundamentales de laboratorio para bioquímica y biotecnología (2.ª ed.). Hoboken, NJ: Wiley. p. 43. ISBN   9780470087664.
  7. 1 2 Burtis, Carl A.; Ashwood, Edward R.; Bruns, David E. (14 de octubre de 2012). Tietz Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics - E-Book . Elsevier Health Sciences. ISBN 978-1-4557-5942-2.
  8. ↑ "NÜVE | Consejos de centrifugación" . www.nuve.com.tr. Archivado del original el 11 de julio de 2021. Consultado el 24 de noviembre de 2020 .
  9. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Graham, JM; Rickwood, D. (2001). Centrifugación biológica . BIOS Scientific Publishers. ISBN 978-1-85996-037-0.
  10. ↑ Khandpur, Raghbir Singh (25 de febrero de 2020). Compendio de instrumentación biomédica, conjunto de 3 volúmenes . John Wiley & Sons. ISBN 978-1-119-28812-1.
  11. ↑ Ford, TC; Graham, John M. (1991). Introducción a la centrifugación . Bios. ISBN 978-1-872748-40-5.
  12. ↑ Mendes, Adélia (2 de marzo de 2020). "Fundamentos y aplicaciones de la ultracentrifugación" . Conduct Science .
  13. ↑ Cole, JL; Hansen, JC (diciembre de 1999). "Ultracentrifugación analítica como herramienta contemporánea de investigación biomolecular" . Journal of Biomolecular Techniques . 10 (4): 163– 76. ISSN 1524-0215 . PMC 2291609. PMID 19499023 .   
  14. 1 2 "Ultracentrífugas analíticas y preparativas" . www.labcompare.com .
  15. ↑ Alberts, Bruce; Johnson, Alexander; Lewis, Julian; Raff, Martin; Roberts, Keith; Walter, Peter (2002). «Fraccionamiento de células». Biología molecular de la célula (4.ª ed.). Nueva York: Garland Science. ISBN  0-8153-4072-9.
  16. ↑ Frei, Mark. "Separaciones por centrifugación" . Sigma-Aldrich . Consultado el 23 de noviembre de 2020 .
  17. 1 2 3 Brakke, Myron K. (abril de 1951). "Centrifugación con gradiente de densidad: una nueva técnica de separación". J. Am. Chem. Soc . 73 (4): 1847– 1848. Bibcode : 1951JAChS..73.1847B . doi : 10.1021/ja01148a508 .
  18. ↑ Price, CA (1982). "1 - Abstracción de partículas en biología: una introducción" . Centrifugación en gradientes de densidad . Academic Press. págs. 1–11 . doi : 10.1016/B978-0-12-564580-5.50006-4 . ISBN  978-0-12-564580-5.
  19. 1 2 Oster, Gerald; Yamamoto, Masahide (junio de 1963). "Técnicas de gradiente de densidad". Chem. Rev. 63 ( 3): 257– 268. doi : 10.1021/cr60223a003 .
  20. ↑ "Лимонен: химическое вещество, структура и свойства" . limonen.ru . Consultado el 22 de enero de 2026 .
  21. ↑ " Centrifugación/sedimentación - Safe Food Factory" . www.safefoodfactory.com
  22. ↑ Canziani, Roberto; Spinosa, Ludovico (1 de enero de 2019). "1 - Lodos de plantas de tratamiento de aguas residuales" . Lodos industriales y municipales . Butterworth-Heinemann. pp. 3–30 . doi : 10.1016/B978-0-12-815907-1.00001-5 . ISBN  9780128159071. S2CID 146203271 . 
  23. ↑ Zeng, Xian Ming; Martin, Gary Peter; Marriott, Christopher (26 de octubre de 2000). Interacciones de partículas en formulaciones de polvo seco para inhalación . CRC Press. ISBN 978-1-135-72976-9.
  24. ↑ Woodard & Curran, Inc. (1 de enero de 2006). "7 - Métodos para el tratamiento de aguas residuales industriales" . Manual de tratamiento de residuos industriales (segunda edición). Butterworth-Heinemann. págs. 149–334 . doi : 10.1016/B978-075067963-3/50009-6 . ISBN   9780750679633.{{cite book}}: |first1=tiene nombre genérico ( ayuda )
  25. 1 2 3 4 5 6 7 8 Van Holde, KE (1998). Ultracentrifugación analítica desde 1924 hasta la actualidad: Una historia notable. Chemtracts – Bioquímica y Biología Molecular. 11:933-943
  26. 1 2 3 Svedberg, T. (1927). La ultracentrífuga - Conferencia Nobel
  27. 1 2 Tanford, C., y Reynolds, J. 2001. Los robots de la naturaleza: Una historia de las proteínas. Oxford University Press. págs. 303-305
  28. ↑ Simoni, DS, Hill, RL y Vaughan, M. (2002). Estructura y función de la hemoglobina: Gilbery Smithson Adair y las ecuaciones de Adair. The Journal of Biological Chemistry. 277(31): e1-e2

Fuentes

  • Harrison, Roger G., Todd, Paul, Rudge, Scott R., Petrides DP Bioseparations Science and Engineering . Oxford University Press, 2003.
  • Dishon, M., Weiss, GH , Yphantis, DA Soluciones numéricas de la ecuación de Lamm. I. Procedimiento numérico . Biopolymers, Vol. 4, 1966. pp.  449–455.
  • Cao, W., Demeler B. Modelado de experimentos de ultracentrifugación analítica con una solución adaptativa de elementos finitos espacio-temporales para sistemas reactivos multicomponentes . Biophysical Journal, vol. 95, 2008, págs.  54-65.
  • Howlett, GJ, Minton, AP, Rivas, G. Ultracentrifugación analítica para el estudio de la asociación y el ensamblaje de proteínas . Current Opinion in Chemical Biology, vol. 10, 2006, págs.  430-436.
  • Dam, J., Velikovsky, CA, Mariuzza RA, et al. Análisis de la velocidad de sedimentación de interacciones heterogéneas proteína-proteína: modelado mediante la ecuación de Lamm y distribuciones del coeficiente de sedimentación c(s) . Biophysical Journal, vol. 89, 2005, pp.  619–634.
  • Berkowitz, SA, Philo, JS Monitoreo de la homogeneidad de preparaciones de adenovirus (un sistema de administración de terapia génica) mediante ultracentrifugación analítica . Analytical Biochemistry, Vol. 362, 2007. pp.  16–37.