Prueba electrónica

Etest (anteriormente conocido como prueba del Epsilómetro ) es un método para determinar la sensibilidad antimicrobiana mediante la colocación de una tira impregnada con antimicrobianos sobre una placa de agar . Una cepa de bacteria u hongo no crecerá cerca de una concentración de antibiótico o antifúngico si es sensible. Para algunas combinaciones de microorganismos y antimicrobianos, los resultados pueden utilizarse para determinar la concentración mínima inhibitoria (CMI). Etest es un sistema patentado fabricado por bioMérieux . Es una prueba de laboratorio utilizada en entornos sanitarios para orientar a los médicos, indicándoles qué concentración de antimicrobiano podría utilizarse con éxito para tratar las infecciones de los pacientes. ^{[ 1 ]}

Etest es una técnica cuantitativa para determinar la CMI de microorganismos. Se utiliza para una variedad de bacterias Gram negativas y Gram positivas, como Pseudomonas , ^{[ 2 ] [ 3 ]} Staphylococcus , ^{[ 4 ]} y especies de Enterococcus , ^{[ 5 ]} así como bacterias exigentes, como Neisseria y Streptococcus pneumoniae . ^{[ 1 ]} También se puede utilizar para determinar las CMI frente a ciertos hongos. ^{[ 6 ] [ 7 ]}

Etest es una tira reactiva de plástico no poroso prefabricada con un gradiente de antibiótico predefinido que cubre un rango de concentración continuo. ^{[ 8 ]} Se aplica a la superficie de una placa de agar inoculada con la cepa de prueba, donde se libera el gradiente antimicrobiano del soporte de plástico al agar para formar un gradiente estable y continuo debajo y cerca de la tira.

El tiempo necesario para preparar una placa depende del microorganismo que se esté analizando y de las condiciones de la placa de agar. El gradiente de Etest predefinido permanece estable durante al menos 18 a 24 horas; es decir, un período que abarca los tiempos críticos de muchas especies de microorganismos exigentes y no exigentes.

Tras la prueba, el crecimiento bacteriano se hace visible después de la incubación y se observa una elipse de inhibición simétrica centrada en la tira. El valor de la CMI se lee en la escala en μg/mL donde el borde de la elipse intersecta la tira. Después del período de incubación requerido, el valor de la concentración mínima inhibitoria se lee donde el borde de la elipse de inhibición intersecta el lateral de la tira. No se debe leer la placa si el cultivo parece mixto o si la capa de crecimiento es demasiado fina o demasiado densa.

Los puntos finales de la CMI de Etest suelen ser claros, aunque pueden observarse diferentes patrones de crecimiento/inhibición dependiendo del antifúngico o antibiótico utilizado. ^{[ 7 ]}

La familia de instrumentos Etest está diseñada para simplificar el uso diario de Etest. Los modelos Simplex C76, Nema C88 y Retro C80 son fáciles de usar, lo que reduce la fatiga del operador, ahorra tiempo y mejora la calidad de los resultados al aumentar la reproducibilidad. Etest y los instrumentos relacionados ofrecen uno de los métodos más eficientes para generar valores de CMI en escala en 15 diluciones dobles para pruebas de susceptibilidad de una amplia gama de combinaciones fármaco-microorganismo, incluidos los microorganismos exigentes.

• Simplex C76 automatiza la colocación de 1 a 6 tiras Etest diferentes para simplificar la configuración de los paneles de CMI. La aplicación de hasta 6 tiras en placas de agar grandes o hasta 2 tiras en placas pequeñas tarda menos de 12 segundos.
• Retro C80 es un rotaplato que simplifica y estandariza la inoculación de placas de agar pequeñas y grandes, lo que facilita la lectura de Etest® en comparación con la siembra manual por estrías.
• El Nema C88 es un aplicador de vacío que simplifica la aplicación de las tiras Etest®. El aplicador se sujeta como un bolígrafo y se cubre el orificio de aspiración con la yema del dedo para crear succión. La ventosa se coloca sobre la tira para levantarla y luego posicionarla sobre la superficie de agar. La tira se libera retirando la yema del dedo del orificio de aspiración.

La tira Etest se describió por primera vez en 1988 y fue introducida comercialmente en 1991 por AB BIODISK. ^{[ 5 ]} bioMérieux adquirió AB BIODISK en 2008 y continúa fabricando y comercializando esta gama de productos bajo la marca Etest.

Durante la década de 1950, Hans Ericsson (profesor de microbiología del Hospital Karolinska y del Instituto Karolinska de Estocolmo), fundador científico de AB BIODISK, desarrolló un método para estandarizar la prueba de difusión en disco y mejorar su reproducibilidad y fiabilidad para la predicción de la susceptibilidad clínica. Los tamaños de las zonas de inhibición obtenidos en la prueba de difusión en disco se compararon con los valores de CMI basados ​​en el procedimiento de dilución en agar de referencia . Posteriormente, se evaluó la correlación entre los tamaños de las zonas y los valores de CMI mediante análisis de regresión, y se utilizaron líneas de regresión para extrapolar los límites de interpretación de las zonas que correspondían a los valores de corte de CMI que definían los resultados categóricos de susceptibilidad, intermedios y resistentes.

Etest se presentó por primera vez en la Conferencia Intercientífica sobre Agentes Antimicrobianos y Quimioterapia (ICAAC) en Los Ángeles en 1988 como un novedoso concepto de gradiente para la determinación de la concentración mínima inhibitoria (CMI). En septiembre de 1991, Etest se lanzó a nivel mundial como producto para la determinación de la CMI tras recibir la aprobación de la Administración de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos (FDA).

• Pruebas de sensibilidad a los antibióticos