caldo súper óptimo

El caldo superóptimo ( medio SOB ) es un medio de cultivo bacteriano rico en nutrientes utilizado para el cultivo microbiológico , generalmente de Escherichia coli . Este caldo microbiano rico en nutrientes contiene péptidos , aminoácidos , vitaminas hidrosolubles y glucosa en una formulación baja en sal. Fue desarrollado por Douglas Hanahan en 1983 y es una versión ajustada del medio LB ( caldo de lisogenia ) de uso común. El crecimiento de E. coli en medio SOB o SOC resulta en mayores eficiencias de transformación de plásmidos . ^{[ 1 ] [ 2 ]} El medio SOC también puede utilizarse para regenerar cepas de Klebsiella oxytoca para mejorar la eficiencia de transformación.

El caldo superóptimo con represión catabólica ( SOC ) es un SOB con glucosa añadida al medio de cultivo como fuente preferida de carbono y energía ( es decir , rápidamente metabolizable). ^{[ 3 ]}

Las cifras entre paréntesis corresponden a las masas de reactivos necesarias para preparar 1 litro de medio.

Para una máxima eficacia, el pH de los medios SOB/SOC debe ajustarse a 7,0 mediante la adición de hidróxido de sodio concentrado . ^{[ 3 ]} La literatura original indica que el pH del medio final debe estar entre 6,8 y 7,0.

Finalmente, el medio SOB debe esterilizarse en autoclave a 121  °C para garantizar su esterilidad . Los componentes del medio SOC no deben esterilizarse juntos, ya que a temperaturas elevadas la glucosa puede reaccionar con los péptidos trípticos (véase la reacción de Maillard ), comprometiendo la calidad de la preparación. Las soluciones de SOB, magnesio y glucosa pueden esterilizarse por separado y mezclarse posteriormente hasta alcanzar las concentraciones finales. El medio SOC completo puede esterilizarse por filtración a través de un  filtro de 0,22 μm.