El show de las buenas noches

El programa nocturno presentaba diversos segmentos. El bloque solía comenzar con Nina presentándose a sí misma y a Star, así como el tema de la noche.

• "Sprout-o-Scope": este segmento trataba sobre constelaciones . Nina y Star observaban el cielo nocturno con su telescopio, llamado "Sprout-o-Scope". Ocasionalmente, este segmento incluía cumpleaños enviados por los espectadores que habían quedado del programa The Sunny Side Up Show .
• "Lucy, ilumina el camino": este segmento presentaba un juego animado. Lucy, una marioneta de luciérnaga que presentaba los programas que se emitían entre los bloques, iluminaba diferentes áreas mientras los espectadores adivinaban dónde se encontraba.
• "Manualidades": Este segmento consistía en una manualidad o proyecto artístico diferente basado en el tema de la noche. Las manualidades se eliminaron en 2012 y se reemplazaron por un nuevo segmento llamado "Inventa una historia en la arena", donde Nina contaba una historia y dibujaba imágenes en la arena. ^{[ 8 ]}
• "La rueda del rayo de luna": en este segmento, Nina y Star hicieron girar su rueda del rayo de luna y tradujeron una palabra al español.
• "Limpieza" - Este segmento consistía en limpiar antes de acostarse. Nina y Star cantaron un número musical llamado "Limpieza" mientras limpiaban. ^{[ 8 ]}
• "Listos para dormir" (Brusha Brusha): Este segmento consistía en cepillarse los dientes y lavarse la cara. Durante este segmento, Star se iba a dormir. Antes del segmento, se emitía un anuncio de la pasta de dientes Aquafresh . El anuncio se reproducía hasta las 6:00 a. m.
• "Silencio, silencio, pececito": el segmento final mostraba a Nina animando a los espectadores a pedirle deseos a Hush, un pez dorado. Tras este segmento, se reproducía uno de dos clips: los personajes de Sprout durmiendo con la canción "La-La-Lullaby" de Pajanimals , o un anuncio repetido de Aquafresh. La canción de Pajanimals se eliminó en 2016, y el anuncio de Aquafresh en noviembre de 2013. En la versión más reciente (2014-2017), antes del segmento de Hush el pez, Star no quiere irse a la cama y dice: "Todavía no estoy listo para dormir". Nina lo convence de "soñar con las maravillosas aventuras que uno puede tener mañana". Al final, Star (obediente en cuanto a "descansar") logra decir buenas noches y se duerme. El segmento "Silencio el pez" se reproduce después de que Nina acuesta a Star, y Nina canta la Canción de Buenas Noches antes de quedarse dormida.

Entre 2007 y 2015, se transmitió anualmente un evento llamado "Sprout's Snooze-A-Thon" (anteriormente "Good Night of Sweet Dreams") desde las 6:00 p. m. de la víspera de Navidad hasta las 6:00 a. m. de la mañana de Navidad. Tras una introducción de Nina, el evento mostraba a muchos personajes de los programas y bloques de Sprout quedándose dormidos. El evento se asemejaba al tronco de Navidad y tenía como objetivo ayudar a los niños en edad preescolar a conciliar el sueño en Nochebuena.

• El Árbol Tú y Yo fue el escenario del bloque desde 2011 hasta 2017. Era una casa en el árbol hecha con objetos reciclados y materiales de artesanía. ^{[ 8 ]}
• El Jardín de las Buenas Noches fue el escenario anterior del bloque desde 2005 hasta 2011. Era un jardín con árboles de hojas en forma de estrella y tenía mantas estampadas en el suelo.

Durante la mayor parte de la emisión del programa, Nina lo presentó junto a Star, Lucy y Hush. El tío de Nina, Tío Javier, se incorporó en la última temporada como copresentador recurrente.

• Nina (interpretada por Michele Lepe) ^{[ 9 ] [ 10 ]} fue la presentadora que más tiempo estuvo en el bloque. Era conocida como "La Guía de Buenas Noches" y era dueña del Árbol Tú y Yo. Era de ascendencia hispana y a menudo enseñaba frases en español a Star y a los espectadores. Le gustaba contar cuentos y fábulas, que a veces se mostraban en pantalla mediante animaciones y dibujos de arena. Nina fue presentadora invitada de otro de los bloques de Sprout, The Sunny Side Up Show , en 2009 y 2011. Aparece como personaje animado en el spin-off Nina's World . ^{[ 9 ]}
• Star (con la voz de Stacia Newcomb) ^{[ 11 ]} era una marioneta amarilla con forma de estrella que hacía las veces de copresentadora y personaje infantil. A menudo hacía preguntas sobre el tema de la noche, comentaba con Nina sobre los segmentos y animaba a los espectadores a seguirlo mientras representaba rutinas para ir a dormir, como cepillarse los dientes o leer un cuento. En algunas ocasiones, Star no quería irse a dormir y Nina tenía que convencerlo.
• Lucy era una luciérnaga azul y morada . En los episodios de Leo y Nina, Lucy presentaba los programas que se emitían entre los bloques. También aparecía en juegos, como "Lucy Light the Way"; en este juego, se mostraban partes de una imagen y los espectadores debían adivinar qué representaba. Originalmente, se la representaba como una marioneta de dedo brillante, pero más tarde se convirtió en un personaje generado por computadora.
• Hush era la mascota de Melanie, un pez dorado de carne y hueso que vivía en una pecera decorada con adornos en forma de estrella. En los episodios de Melanie, era un personaje principal y soplaba burbujas para anunciar los programas que se emitían entre los bloques. En los episodios de Leo y Nina, el papel de Hush se redujo y solo aparecía al final de cada programa.
• Tío Javier ^{[ 12 ]} (interpretado por Esai Morales ) ^{[ 13 ]} era el tío de Nina. Era músico, le gustaba tocar la guitarra y componer sus propias canciones. Debutó como personaje recurrente en 2015 y copresentó varios episodios de la última temporada. ^{[ 13 ]} Regresó en Nina's World como personaje animado, con la voz de Edwin Pérez.

• Melanie (interpretada por Melanie Martinez, sin parentesco con la artista musical ) era una niñera enérgica y artística ^{[ 14 ]} que vivía con su pez dorado, Hush. Le gustaba hablar con Hush y dibujarlo. Era muy extrovertida y a menudo cantaba canciones bailables y alegres, como "The Craft Song". Presentó las dos primeras temporadas, de 2005 a 2006. También apareció en un bloque temático de invierno llamado The Let's Snow Show en diciembre de 2005 junto con el presentador de The Birthday Show, Kevin Yamada. ^{[ 15 ]}
• Leo (interpretado por Noel MacNeal ) ^{[ 16 ]} era un jardinero tranquilo y sensato que cuidaba el Jardín de las Buenas Noches. A menudo enseñaba a los espectadores sobre diferentes flores y cómo plantar semillas o huesos de frutas. También cuidaba de una luciérnaga llamada Lucy, a la que le gustaba dormir en un bolsillo del chaleco de Leo. Cuando Lucy comenzaba a brillar, Leo la sacaba de su bolsillo y la dejaba volar por el jardín. Leo presentó 24 episodios en 2006 ^{[ 17 ]} y continuó apareciendo como personaje recurrente en la tercera temporada junto a Nina. ^{[ 18 ]} El actor de Leo, Noel MacNeal, fue seleccionado por sus papeles de titiritero en Bear in the Big Blue House como el personaje principal del mismo nombre y como Kako en Oobi . ^{[ 5 ]}
• La Mano Amiga era una mano humana silenciosa que aparecía durante los segmentos de "Cuento de buenas noches", sosteniendo títeres de dedo y recortes de papel.