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Célula tumoral circulante

Ilustración que muestra el tumor primario (en forma de microambiente tumoral) y las células tumorales circulantes. Una célula tumoral circulante ( CTC ) es una célula cancerosa ...

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Ilustración que muestra el tumor primario (en forma de microambiente tumoral) y las células tumorales circulantes.

Una célula tumoral circulante ( CTC ) es una célula cancerosa de un tumor primario que se ha diseminado a la sangre del sistema circulatorio o a la linfa del sistema linfático . [ 1 ] El sistema circulatorio es un entorno altamente tóxico para las CTC, y estas deben realizar adaptaciones significativas para sobrevivir. [ 2 ] [ 3 ] Si las CTC se adaptan con éxito a las amenazas físicas y biológicas del sistema circulatorio, serán transportadas por el cuerpo a otros órganos donde pueden abandonar la circulación . Cuando las CTC salen de la circulación, se convierten en las semillas para el crecimiento posterior de tumores secundarios . [ 1 ] [ 4 ] Esto se conoce como metástasis , que es responsable de la mayoría de las muertes relacionadas con el cáncer. [ 5 ]

La detección y el análisis de CTC pueden ayudar a realizar pronósticos tempranos en pacientes y determinar tratamientos personalizados adecuados. [ 6 ] Actualmente, existe un método aprobado por la FDA para la detección de CTC, CellSearch , que se utiliza para diagnosticar cáncer de mama , colorrectal y de próstata . [ 7 ]

La detección de CTC, o biopsia líquida , presenta varias ventajas sobre las biopsias de tejido tradicionales. Son no invasivas, pueden usarse repetidamente y proporcionan información más útil sobre el riesgo de metástasis, la progresión de la enfermedad y la efectividad del tratamiento. [ 8 ] [ 9 ] Por ejemplo, el análisis de muestras de sangre de pacientes con cáncer ha encontrado una propensión a una mayor detección de CTC a medida que la enfermedad progresa. [ 10 ] Los análisis de sangre son fáciles y seguros de realizar y se pueden tomar múltiples muestras a lo largo del tiempo. Por el contrario, el análisis de tumores sólidos requiere procedimientos invasivos que podrían limitar el cumplimiento del paciente. La capacidad de monitorear la progresión de la enfermedad a lo largo del tiempo podría facilitar la modificación apropiada de la terapia de un paciente, lo que potencialmente mejoraría su pronóstico y calidad de vida. El aspecto importante de la capacidad de pronosticar la progresión futura de la enfermedad es la eliminación (al menos temporalmente) de la necesidad de una cirugía cuando los recuentos repetidos de CTC son bajos y no aumentan; los beneficios obvios de evitar la cirugía incluyen evitar el riesgo relacionado con la tumorogenicidad inherente de las cirugías de cáncer. Con este fin, recientemente se han desarrollado tecnologías con la sensibilidad y reproducibilidad necesarias para detectar CTC en pacientes con enfermedad metastásica. [ 11 ] [ 12 ] [ 13 ] [ 14 ] [ 15 ] [ 16 ] [ 17 ] [ 18 ] [ 19 ] Por otro lado, las CTC son muy raras, a menudo presentes como solo unas pocas células por mililitro de sangre, lo que hace que su detección sea desafiante. Además, a menudo expresan una variedad de marcadores que varían de un paciente a otro, lo que hace que sea difícil desarrollar técnicas con alta sensibilidad y especificidad .

Tipos

Las CTC que se originan en carcinomas (cánceres de origen epitelial, que son los más frecuentes) pueden clasificarse según la expresión de marcadores epiteliales, así como por su tamaño y si son apoptóticas. En general, las CTC son resistentes a la anoikis , lo que significa que pueden sobrevivir en el torrente sanguíneo sin adherirse a un sustrato. [ 20 ]

  1. Las CTC tradicionales se caracterizan por un núcleo intacto y viable; la expresión de EpCAM y citoqueratinas , que demuestran un origen epitelial; la ausencia de CD45, lo que indica que la célula no es de origen hematopoyético; y su mayor tamaño , forma irregular o morfología subcelular. [ 21 ]
  2. Las CTC negativas para citoqueratina se caracterizan por la ausencia de EpCAM o citoqueratinas, lo que puede indicar un fenotipo indiferenciado ( células madre cancerosas circulantes ) o la adquisición de un fenotipo mesenquimal (conocido como transición epitelio-mesenquimal o EMT). Estas poblaciones de CTC pueden ser las más resistentes y las más propensas a la metástasis. También son más difíciles de aislar porque no expresan ni citoqueratinas ni CD45. Por lo demás, su morfología, expresión génica y genómica son similares a las de otras células cancerosas. [ 22 ]
  3. Las CTC apoptóticas son CTC tradicionales que están experimentando apoptosis (muerte celular programada). Estas pueden utilizarse para monitorizar la respuesta al tratamiento, como se hace experimentalmente con el método de Epic Sciences, que identifica la fragmentación nuclear o la formación de vesículas citoplasmáticas asociadas a la apoptosis. La medición de la proporción de CTC tradicionales respecto a las CTC apoptóticas —desde el inicio hasta el final del tratamiento— proporciona indicios sobre la eficacia del tratamiento para atacar y eliminar las células cancerosas. [ 22 ]
  4. Las CTC pequeñas son positivas para citoqueratina y negativas para CD45, pero con tamaños y formas similares a los de los glóbulos blancos. Es importante destacar que las CTC pequeñas poseen biomarcadores específicos del cáncer que las identifican como tales. Se ha demostrado que las CTC pequeñas están implicadas en la progresión de la enfermedad y en la diferenciación hacia carcinomas de células pequeñas, que a menudo requieren un tratamiento diferente. [ 23 ]

grupos de CTC

Células tumorales circulantes y cúmulos de CTC

Las células tumorales circulantes suelen presentarse en cúmulos. [ 24 ] Los cúmulos de CTC son agregados de dos o más células tumorales circulantes (CTC) unidas entre sí. Estos cúmulos pueden estar formados por CTC tradicionales, pequeñas o negativas para citoqueratina y portan biomarcadores específicos del cáncer que las distinguen de otras células en circulación. Los estudios han demostrado que los cúmulos de CTC se asocian con un mayor potencial metastásico y un mal pronóstico. Por ejemplo, la investigación ha demostrado que los pacientes con cáncer de próstata que tienen solo CTC aisladas presentan una tasa de supervivencia media ocho veces mayor en comparación con aquellos con cúmulos de CTC. Se han reportado hallazgos similares para el cáncer colorrectal. [ 25 ] [ 26 ]

Existen dos tipos de cúmulos de células tumorales circulantes (CTC): uno compuesto únicamente por células cancerosas, denominado homotípico ; y otro que también incorpora otras células, como leucocitos, fibroblastos, células endoteliales (células que recubren la superficie interna de los vasos sanguíneos) y plaquetas, denominado heterotípico . [ 27 ] Los cúmulos heterotípicos también se conocen como microémbolos . Se sugiere que estos microémbolos podrían aumentar el potencial metastásico. [ 24 ]

La hipótesis del éxodo canceroso sugiere que los cúmulos de CTC permanecen intactos durante todo el proceso metastásico, en lugar de disociarse en células individuales, como se suponía anteriormente. Según esta hipótesis, los cúmulos entran en el torrente sanguíneo, viajan como una unidad cohesiva y salen de la circulación en sitios metastásicos distantes sin fragmentarse. Esto permite que los cúmulos conserven su multicelularidad, lo que aumenta su eficiencia metastásica. La hipótesis postula que la ventaja de supervivencia que proporciona el soporte intercelular dentro de los cúmulos incrementa su potencial metastásico en comparación con las CTC individuales. [ 25 ] [ 27 ]

Los cúmulos de CTC exhiben perfiles de expresión génica distintivos, que les confieren resistencia a ciertas terapias contra el cáncer, lo que los hace más resistentes que las células tumorales individuales. Su capacidad para permanecer multicelulares durante la metástasis podría explicar su mayor supervivencia y potencial metastásico. [ 28 ]

La investigación sobre los cúmulos de CTC y su papel en la metástasis continúa evolucionando, y la hipótesis del éxodo del cáncer ofrece una nueva perspectiva sobre cómo estos cúmulos contribuyen a la progresión del cáncer. La detección y el análisis de los cúmulos de CTC proporcionan información pronóstica crucial y podrían ayudar a guiar las decisiones terapéuticas para los pacientes con cáncer. [ 29 ]

Sobrevivir a la circulación

Para la mayoría de los cánceres , las células tumorales deben ingresar al torrente sanguíneo y sobrevivir como células tumorales circulantes (CTC) antes de metastatizar . Sin embargo, el sistema circulatorio es un entorno altamente hostil, y menos del 0,01 % de las CTC sobrevivirán en circulación y metastatizarán. [ 30 ] Las células cancerosas en circulación enfrentan varias amenazas importantes, incluyendo el estrés de cizallamiento del fluido (la fuerza mecánica ejercida por el flujo sanguíneo), la deformación (distorsión física cuando las células se comprimen a través de vasos estrechos), la anoikis (apoptosis desencadenada por el desprendimiento de la matriz extracelular) y el ataque del sistema inmunitario por parte de las células T citotóxicas y las células asesinas naturales (NK) . Para establecer metástasis, las células tumorales circulantes deben adaptarse para resistir o evadir estas amenazas. [ 2 ] [ 3 ] Estos desafíos, junto con los mecanismos mejor comprendidos que las células cancerosas utilizan para superarlos, se describen con más detalle a continuación.

Esfuerzo cortante del fluido

La tensión de cizallamiento del fluido (FSS, por sus siglas en inglés) es la fuerza mecánica ejercida por un fluido en movimiento sobre un objeto sólido, que, en este caso, se refiere a la fuerza del fluido en el torrente sanguíneo sobre la célula tumoral . La exposición a tales tensiones puede dañar o matar rápidamente a muchas células tumorales desprendidas, por lo que las células tumorales circulantes (CTC, por sus siglas en inglés) deben adaptarse para sobrevivir a la FSS y así metastatizar . [ 3 ]

Una forma en que las CTC se adaptan a la FSS es creando una barrera física entre ellas y el fluido. Para formar esta barrera física, las células tumorales pueden circular en grupos, que distribuyen las fuerzas entre múltiples células, reduciendo el estrés en cada célula individual. Los grupos pueden estar compuestos únicamente por células tumorales (homotípicos) o incluir varios otros tipos de células (heterotípicos), como macrófagos , glóbulos rojos y fibroblastos . Además, las CTC suelen reclutar plaquetas para formar un escudo que absorbe las fuerzas de cizallamiento del fluido. [ 3 ]

Las CTC también presentan adaptaciones citoesqueléticas en respuesta al FSS. Los resultados de los estudios son inconsistentes: algunos sugieren que las CTC aumentan la rigidez del citoesqueleto para resistir la deformación, mientras que otros indican que se vuelven más fluidas para adaptarse al estrés mecánico. Sin embargo, es evidente que las respuestas citoesqueléticas de las CTC son vitales para su supervivencia bajo FSS. [ 3 ]

Deformación

Las células tumorales circulantes son más grandes que la mayoría de los capilares , por lo que se ven obligadas a adoptar una forma muy diferente al intentar pasar a través de estos vasos estrechos. Cuando la célula se ve obligada a adoptar una forma diferente, se denomina deformación . La deformación ejerce una tensión significativa sobre la membrana plasmática , el citoesqueleto y el núcleo , y esta tensión puede fácilmente provocar la ruptura de la célula. [ 31 ]

El núcleo es un orgánulo grande, rígido y vital , por lo que suele ser el factor limitante en la capacidad de deformación de la célula. La matriz nuclear es una capa de proteínas reticuladas que da estructura a la membrana del núcleo. Esta matriz está compuesta por láminas , ya sean de tipo A/C o de tipo B. La lámina A/C es más rígida que la lámina B. Cuando un núcleo celular tiene más lámina B que lámina A/C (lo que lo hace más fluido), puede resistir mejor las fuerzas de compresión de la deformación. Sin embargo, esto también hace que la célula sea más propensa a sufrir daños por el esfuerzo cortante del fluido (FSS). [ 31 ]

Cómo la vía RhoA-ROCK permite que las células tumorales se contraigan en respuesta a la deformación.

Además, la deformación conduce a la activación de numerosas vías de señalización dentro de la célula para ayudar al citoesqueleto a adaptarse a la compresión. La vía mejor comprendida de estas vías es la vía RhoA-ROCK. Cuando la membrana celular se estira, se abren canales mecanosensibles , inundando la célula con iones de calcio . Estos iones de calcio activan varias proteínas que, finalmente, activan RhoA, una GTPasa . RhoA activa ROCK, una proteína quinasa , que activa la cadena ligera de miosina y desactiva la fosfatasa de la cadena ligera de miosina . Esto permite que la miosina se una a la actina y contraiga el citoesqueleto, provocando la constricción de toda la célula. [ 3 ]

Anoikis

La anoikis es una forma de muerte celular programada ( apoptosis ) que ocurre cuando las células pierden contacto con la matriz extracelular (MEC) circundante. Para que las células tumorales sobrevivan en el torrente sanguíneo , deben resistir o eludir la anoikis, a menudo generando un entorno que imita el contacto con el tejido o la MEC y que favorece la señalización antiapoptótica. [ 2 ]

Una forma común en que las CTC evitan la anoikis es uniéndose a otras células o plaquetas. Este cúmulo, ya sea formado por CTC adicionales, otros tipos de células o plaquetas, puede proporcionar suficiente contacto célula a célula para prevenir la anoikis. [ 2 ] En cambio, algunas CTC secretan fibronectina u otros componentes de la MEC, formando una pseudomatriz extracelular que proporciona suficiente contacto célula-MEC para proteger contra la apoptosis inducida por desprendimiento. [ 3 ]

Ataque del sistema inmunitario

El sistema inmunitario emplea múltiples mecanismos para detectar y eliminar las células tumorales. En el torrente sanguíneo, las células asesinas naturales (NK) y los linfocitos T citotóxicos (CTL) pueden destruir las células cancerosas al reconocerlas. Estas células inmunitarias deben establecer contacto físico e identificar las células tumorales para iniciar la citotoxicidad. [ 2 ]

Las CTC pueden evadir la detección inmunitaria creando una barrera protectora. Un proceso es el recubrimiento plaquetario , en el que las plaquetas se adhieren a las células tumorales y forman un escudo físico que enmascara los antígenos asociados al tumor . Las células tumorales también pueden agregarse con leucocitos u otras células no malignas para ocultarse de la vigilancia inmunitaria. [ 32 ]

Más allá de las barreras físicas, muchas células tumorales expresan moléculas de puntos de control inmunitarios , como PD-L1 , que interactúa con receptores como PD-1 en las células NK y las células T para suprimir la actividad de las células inmunitarias. Al inhibir PD-1 en una célula inmunitaria, la célula tumoral puede suprimir la actividad citotóxica de esa célula y, por lo tanto, evitar ser eliminada. [ 2 ]

Frecuencia

Número de distintos tipos de células sanguíneas en sangre total frente a células tumorales circulantes (CTC).

La detección de CTC puede tener importantes implicaciones pronósticas y terapéuticas, pero debido a que su número puede ser muy pequeño, estas células no se detectan fácilmente. [ 33 ] Se estima que entre las células que se han desprendido del tumor primario, solo el 0,01 % puede formar metástasis. [ 34 ]

Las células tumorales circulantes se encuentran en frecuencias del orden de 1-10 CTC por mL de sangre total en pacientes con enfermedad metastásica. [ 35 ] En comparación, un mL de sangre contiene unos pocos cientos de CEC (es decir, células endoteliales circulantes), unos pocos millones de glóbulos blancos y mil millones de glóbulos rojos. Esta baja frecuencia, asociada a la dificultad de identificar células cancerosas, significa que un componente clave para comprender las propiedades biológicas de las CTC requiere tecnologías y enfoques capaces de aislar 1 CTC por mL de sangre, ya sea por enriquecimiento, o mejor aún con ensayos sin enriquecimiento que identifiquen todos los subtipos de CTC con una definición suficientemente alta para satisfacer los requisitos de cantidad de imágenes de patología diagnóstica en pacientes con una variedad de tipos de cáncer. [ 22 ] Hasta la fecha, se han detectado CTC en varios cánceres epiteliales (mama, próstata, pulmón y colon) [ 36 ] [ 37 ] [ 38 ] [ 39 ] y las evidencias clínicas indican que los pacientes con lesiones metastásicas tienen más probabilidades de tener CTC aisladas.

Las CTC se capturan habitualmente (en 2011) de la vasculatura mediante anticuerpos específicos capaces de reconocer un marcador tumoral específico (generalmente EpCAM ); sin embargo, este método se ve limitado por la necesidad de una expresión suficiente de la proteína seleccionada en la superficie celular, evento necesario para la etapa de enriquecimiento. Además, dado que EpCAM y otras proteínas (por ejemplo, las citoqueratinas ) no se expresan en algunos tumores y pueden estar reguladas a la baja durante la transición epitelio-mesenquimal ( EMT ), se requieren nuevas estrategias de enriquecimiento. [ 40 ]

Las primeras evidencias indican que los marcadores de CTC aplicados en medicina humana se conservan en otras especies. Cinco de los marcadores más comunes, incluido el CK19, también son útiles para detectar CTC en la sangre de perros con tumores mamarios malignos. [ 41 ] [ 42 ] Enfoques más recientes permiten identificar más células en 7,5 ml de sangre, como IsofFux o Maintrac. [ 43 ] [ 44 ] En casos muy raros, las CTC están presentes en cantidades lo suficientemente grandes como para ser visibles en un examen de frotis de sangre de rutina . Esto se conoce como carcinocitemia o leucemia de células carcinomatosas y se asocia con un mal pronóstico. [ 45 ]

Métodos de detección

Análisis de Kaplan-Meier de la supervivencia global antes de comenzar una nueva línea de terapia para pacientes con cáncer metastásico de mama, colorrectal y de próstata. Los pacientes se dividieron en aquellos con CTC favorable y desfavorable (desfavorable: >5 CTC/7,5 ml para mama y próstata, >3 CTC/7,5 ml para colon) [ 35 ]

Hasta la fecha, se han desarrollado diversos métodos de investigación para aislar y cuantificar las CTC. [ 46 ] La única metodología aprobada por la Administración de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos (FDA) para la cuantificación de CTC en sangre total es el sistema CellSearch. [ 47 ] Las extensas pruebas clínicas realizadas con este método demuestran que la presencia de CTC es un factor pronóstico importante para la supervivencia global en pacientes con cáncer de mama metastásico, colorrectal o de próstata. [ 10 ] [ 48 ] [ 49 ] [ 50 ] [ 51 ] [ 52 ] [ 53 ]

Las CTC son fundamentales para comprender la biología de la metástasis y prometen ser un biomarcador potencial para evaluar de forma no invasiva la progresión tumoral y la respuesta al tratamiento. Sin embargo, el aislamiento y la caracterización de las CTC representan un importante desafío tecnológico, ya que constituyen una cantidad mínima de las células totales en la sangre circulante: de 1 a 10 CTC por ml de sangre total, en comparación con unos pocos millones de glóbulos blancos y mil millones de glóbulos rojos. [ 54 ] Por lo tanto, el principal desafío para los investigadores de CTC es la dificultad inherente de purificar las CTC para permitir su caracterización molecular. Se han desarrollado varios métodos para aislar las CTC en la sangre periférica, que se dividen esencialmente en dos categorías: métodos biológicos y métodos físicos, así como métodos híbridos que combinan ambas estrategias. Las técnicas también pueden clasificarse según seleccionen las CTC para su aislamiento (selección positiva) o excluyan todas las células sanguíneas (selección negativa).

Métodos biológicos

Los métodos biológicos aíslan células basándose en la unión de antígenos altamente específicos, más comúnmente mediante anticuerpos monoclonales para la selección positiva. Se han utilizado anticuerpos contra biomarcadores específicos de tumores, incluidos EpCAM , HER2 y PSA . La técnica más común es la separación basada en nanopartículas magnéticas (ensayo inmunomagnético) como se utiliza en CellSearch o MACS . Otras técnicas en investigación incluyen la separación microfluídica [ 55 ] y la combinación de ensayo inmunomagnético y separación microfluídica. [ 56 ] [ 57 ] [ 58 ] [ 59 ] A medida que se desarrolla la tecnología de microfabricación, se implementan estructuras magnéticas a microescala para proporcionar un mejor control del campo magnético y ayudar a la detección de CTC. [ 60 ] [ 61 ] [ 62 ] Se desarrollan virus oncolíticos como los virus vaccinia [ 63 ] para detectar e identificar CTC. Existen métodos alternativos que utilizan proteínas modificadas en lugar de anticuerpos, como la proteína VAR2CSA de la malaria, que se une al sulfato de condroitina oncofetal en la superficie de las CTC. [ 64 ] Las CTC también pueden recuperarse directamente de la sangre mediante una técnica de Seldinger modificada , desarrollada por GILUPI GmbH. [ 65 ] [ 66 ] Se inserta un alambre metálico recubierto de anticuerpos en una vena periférica y permanece allí durante un período definido (30 min). Durante este tiempo, las CTC de la sangre pueden unirse a los anticuerpos (actualmente anti-EpCAM). Después del tiempo de incubación, se retira el alambre, se lava y las CTC nativas, aisladas de la sangre del paciente, pueden analizarse posteriormente. Son posibles la genética molecular , así como la tinción por inmunofluorescencia y varios otros métodos. [ 67 ] [ 68 ] La ventaja de este método es el mayor volumen de sangre que se puede analizar para detectar CTC (aproximadamente 750 ml en 30 min en comparación con 7,5 ml de una muestra de sangre extraída).

Método CellSearch

CellSearch es la única plataforma aprobada por la FDA para el aislamiento de CTC. Este método se basa en el uso de nanopartículas de hierro recubiertas con una capa de polímero que contiene análogos de biotina y conjugadas con anticuerpos contra EpCAM para la captura de CTC. El aislamiento se acopla a un analizador para obtener imágenes de las células aisladas tras su tinción con conjugados de anticuerpos fluorescentes específicos. La muestra de sangre se toma en un tubo con EDTA y un conservante añadido. Al llegar al laboratorio, se centrifugan 7,5 ml de sangre y se colocan en un sistema de preparación. Este sistema enriquece primero las células tumorales inmunomagnéticamente mediante nanopartículas de ferrofluido y un imán. Posteriormente, las células recuperadas se permeabilizan y se tiñen con un colorante nuclear, un conjugado de anticuerpo fluorescente contra CD45 (marcador de leucocitos) y citoqueratinas 8 , 18 y 19 (marcadores epiteliales). A continuación, la muestra se escanea en un analizador que obtiene imágenes de las tinciones nucleares, de citoqueratina y de CD45. [ 69 ] Para ser considerada una CTC, una célula debe contener un núcleo, ser positiva para la expresión citoplasmática de citoqueratina y negativa para la expresión del marcador CD45, y tener un diámetro mayor de 5  μm. Si el número total de células tumorales que cumplen los criterios mencionados es de 5 o más, una muestra de sangre es positiva. En estudios realizados en pacientes con cáncer de próstata, mama y colon, la supervivencia media de los pacientes metastásicos con muestras positivas es aproximadamente la mitad de la supervivencia media de los pacientes metastásicos con muestras negativas. Este sistema se caracteriza por una capacidad de recuperación del 93 % y un límite de detección de una CTC por cada 7,5 mL de sangre total. Para tipos específicos de cáncer, métodos alternativos como IsoFlux han demostrado mayor sensibilidad . [ 70 ]

Método Parsortix

Este método automatizado utiliza filtración por tamaño para enriquecer las células tumorales circulantes, más grandes y menos compresibles, separándolas de otros componentes sanguíneos. El sistema Parsortix puede procesar muestras de sangre de entre 1 ml y 40 ml. Un casete microfluídico desechable con una separación de 6,5 micras permite el paso de la gran mayoría de los glóbulos rojos y blancos, mientras que las células raras de mayor tamaño, incluidas las células tumorales circulantes y las células fetales, quedan retenidas. Las células atrapadas pueden teñirse automáticamente con anticuerpos para su identificación o liberarse del casete para su posterior análisis. Estas células liberadas/recolectadas están vivas y pueden analizarse mediante técnicas celulares y moleculares posteriores, además de cultivarse. El casete de filtración captura una gran variedad de tipos de células cancerosas. En mayo de 2022, el sistema Parsortix PC1 fue aprobado por la FDA como dispositivo médico para la captura y recolección de células tumorales circulantes (CTC) de la sangre de pacientes con cáncer de mama metastásico para su posterior análisis. Además de su aplicación en diagnóstico in vitro (IVD), el PC1 puede utilizarse con el kit MBC-01 para cáncer de mama metastásico en estudios de investigación o pruebas desarrolladas en laboratorio (LDT, por sus siglas en inglés) que hayan sido creadas y validadas en un laboratorio clínico.

Método de Epic Sciences

Este método emplea tecnología para separar las células nucleadas de los glóbulos rojos, que carecen de núcleo. Todas las células nucleadas, incluyendo los glóbulos blancos normales y las CTC, se exponen a anticuerpos marcados con fluorescencia específicos para biomarcadores de cáncer. Además, el sistema de imagen de Epic captura imágenes de todas las células en la lámina (aproximadamente 3 millones), registra las coordenadas precisas de cada célula y analiza cada una para 90 parámetros diferentes, incluyendo la intensidad de fluorescencia de los cuatro marcadores fluorescentes y 86 parámetros morfológicos diferentes. Epic también puede utilizar FISH y otras técnicas de tinción para detectar anomalías como duplicaciones, deleciones y reordenamientos. La tecnología de imagen y análisis también permite conocer las coordenadas de cada célula en una lámina, de modo que se puede recuperar una sola célula para su análisis mediante secuenciación de nueva generación. Un algoritmo entrenado en hematopatología incorpora numerosas mediciones morfológicas, así como la expresión de citoqueratina y CD45. El algoritmo propone entonces CTC candidatas que un lector capacitado confirma. Las células de interés se analizan para detectar marcadores fenotípicos y genotípicos relevantes, incluyendo leucocitos regionales como controles negativos. [ 71 ] Los ensayos moleculares de Epic miden la expresión de proteínas y también analizan anomalías genómicas en CTC para más de 20 tipos diferentes de cáncer.

Vía principal

Maintrac es una plataforma de análisis de sangre que aplica métodos de diagnóstico in vitro microscópicos para identificar células raras en fluidos corporales y sus características moleculares. Se basa en la selección positiva mediante anticuerpos específicos para EpCAM. [ 72 ] Maintrac utiliza un enfoque basado en la identificación microscópica de células tumorales circulantes. Para evitar daños y pérdidas celulares durante el proceso, Maintrac emplea solo dos pasos para la identificación. A diferencia de muchos otros métodos, Maintrac no purifica ni enriquece las células, sino que las identifica en el contexto de los demás componentes sanguíneos. Para obtener células viables y reducir el estrés celular, las células sanguíneas se preparan mediante una única centrifugación y lisis de eritrocitos. Al igual que CellSearch, Maintrac utiliza un anticuerpo EpCAM. Sin embargo, este no se utiliza para el enriquecimiento, sino como marcador fluorescente para identificar dichas células. Junto con la tinción nuclear con yoduro de propidio, el método Maintrac permite distinguir entre células vivas y muertas. Solo las células viables, EpCAM positivas y sin tinción de propidio, se consideran células tumorales potenciales. Solo las células vivas pueden convertirse en tumores; por lo tanto, las células EpCAM positivas que mueren no pueden causar daño. La suspensión se analiza mediante microscopía de fluorescencia, que cuenta automáticamente los eventos. Se registran galerías de eventos simultáneas para verificar si el software detectó una célula viva real y para diferenciar, por ejemplo, entre células epiteliales de la piel. Una validación exhaustiva del método demostró que la adición de anticuerpos contra citoqueratinas o CD45 no aportaba ninguna ventaja. [ 44 ] [ 73 ]

A diferencia de otros métodos, Maintrac no utiliza el recuento de células individuales como marcador pronóstico, sino que emplea la dinámica del recuento celular. El aumento del número de células tumorales es un factor importante que indica que la actividad tumoral continúa. [ 74 ] La disminución del recuento celular es un signo de una terapia exitosa. Por lo tanto, Maintrac puede utilizarse para verificar el éxito de la quimioterapia [ 44 ] [ 75 ] y para supervisar el tratamiento durante la terapia hormonal o de mantenimiento [ 76 ] [ 77 ] Maintrac se ha utilizado experimentalmente para monitorizar la recurrencia del cáncer. [ 78 ] [ 79 ] Estudios que utilizan Maintrac han demostrado que se pueden encontrar células EpCAM positivas en la sangre de pacientes sin cáncer. [ 80 ] Las afecciones inflamatorias como la enfermedad de Crohn también muestran niveles elevados de células EpCAM positivas. Los pacientes con quemaduras cutáneas graves también pueden presentar células EpCAM positivas en la sangre. Por lo tanto, el uso de células EpCAM positivas como herramienta para el diagnóstico precoz no es óptimo.

Métodos físicos

Los métodos físicos suelen basarse en filtros, lo que permite la captura de CTC por tamaño en lugar de por epítopos específicos . [ 18 ]

ScreenCell®

ScreenCell® es una tecnología de filtración francesa que permite el aislamiento simple y rápido (en menos de 10 minutos) [ 81 ] de células tumorales circulantes (CTC) a partir de sangre humana completa. Tras una simple extracción de sangre periférica, la muestra puede procesarse en un plazo de 4 horas a 3 días utilizando uno de los dispositivos ScreenCell®. Las células tumorales aisladas conservan su morfología e integridad, lo que permite su uso directo para una amplia gama de análisis directamente en el medio de aislamiento, en un portaobjetos o en suspensión.

Las células tumorales aisladas conservan su morfología e integridad, lo que permite utilizarlas directamente para una amplia gama de análisis citológicos, de biología molecular y de cultivo celular, directamente sobre el soporte de aislamiento, en un portaobjetos o en suspensión.

Método Parsortix

El método Parsortix separa los CTC en función de su tamaño y deformabilidad. [ 82 ]

métodos híbridos

Los métodos híbridos combinan la separación física (por gradientes, campos magnéticos, etc.) con la recuperación de células mediada por anticuerpos. Un ejemplo de esto es un método sensible de centrifugación de doble gradiente y clasificación magnética de células, detección y enumeración que se ha utilizado para detectar células cancerosas epiteliales circulantes en pacientes con cáncer de mama mediante selección negativa. [ 83 ] El principio de selección negativa se basa en la recuperación de todas las células sanguíneas utilizando un panel de anticuerpos, así como la centrifugación de gradiente tradicional con Ficoll . Un método similar conocido como ISET Test se ha empleado para detectar células de cáncer de próstata circulantes [ 84 ] [ 85 ] [ 86 ] y otra técnica conocida como RosetteStep se ha utilizado para aislar CTC de pacientes con cáncer de pulmón de células pequeñas . [ 87 ] De manera similar, investigadores del Massachusetts General Hospital han desarrollado un método de selección negativa que emplea enfoque inercial en un dispositivo microfluídico . La técnica, denominada CTC-iChip, primero elimina las células demasiado pequeñas para ser CTC, como los glóbulos rojos, y luego utiliza partículas magnéticas para eliminar los glóbulos blancos. [ 88 ]

Caracterización de CTC

Algunos fármacos son particularmente eficaces contra cánceres que cumplen ciertos requisitos. Por ejemplo, Herceptin es muy eficaz en pacientes Her2 positivos, pero mucho menos eficaz en pacientes Her2 negativos. Una vez que se extirpa el tumor primario, la biopsia del estado actual del cáncer a través de la tipificación tisular tradicional ya no es posible. [ 89 ] A menudo se utilizan secciones de tejido del tumor primario, extirpado años antes, para realizar la tipificación. Una caracterización adicional de las CTC puede ayudar a determinar el fenotipo tumoral actual. Se han realizado ensayos FISH en CTC, así como la determinación del estado de IGF-1R , Her2, Bcl-2 , ERG , PTEN , AR mediante inmunofluorescencia . [ 9 ] [ 90 ] [ 91 ] [ 92 ] [ 93 ] También se puede realizar qPCR a nivel de célula única con las CTC aisladas de la sangre.

Se ha investigado el tropismo orgánico de las CTC derivadas de pacientes en un modelo de ratón. [ 94 ] Las CTC aisladas de pacientes con cáncer de mama y expandidas in vitro demostraron que podían generar metástasis óseas, pulmonares, ováricas y cerebrales en ratones, reflejando parcialmente las lesiones secundarias encontradas en los pacientes correspondientes. Sorprendentemente, una línea de CTC —aislada mucho antes de la aparición de metástasis cerebrales en el paciente— fue altamente competente para generar metástasis cerebrales en ratones. Este fue el primer caso predictivo de metástasis cerebral y una prueba de concepto de que las características moleculares intrínsecas de los precursores metastásicos entre las CTC podrían proporcionar información novedosa sobre los mecanismos de la metástasis.

morfología celular

La apariencia morfológica es evaluada por operadores humanos y, por lo tanto, está sujeta a una gran variabilidad entre operadores. [ 95 ] Existen varios métodos de enumeración de CTC que utilizan la apariencia morfológica para identificarlas, los cuales también pueden aplicar diferentes criterios morfológicos. Un estudio reciente sobre cáncer de próstata mostró que muchas definiciones morfológicas diferentes de células tumorales circulantes tienen un valor pronóstico similar, aunque el número absoluto de células encontradas en pacientes y donantes sanos varió en más de una década entre las diferentes definiciones morfológicas. [ 96 ]

Historia

Las CTC fueron observadas por primera vez en 1869 en la sangre de un hombre con cáncer metastásico por Thomas Ashworth, quien postuló que "la presencia en la sangre de células idénticas a las del propio cáncer podría arrojar luz sobre el modo de origen de los múltiples tumores que coexisten en la misma persona". Una comparación exhaustiva de la morfología de las células circulantes con las células tumorales de diferentes lesiones llevó a Ashworth a concluir que "una cosa es segura: si [las CTC] provenían de una estructura cancerosa preexistente, debieron haber atravesado la mayor parte del sistema circulatorio para llegar a la vena safena interna de la pierna sana". [ 97 ]

La importancia de las CTC en la investigación moderna del cáncer comenzó a mediados de la década de 1990 con la demostración de que las CTC existen en las primeras etapas de la enfermedad. [ 21 ] Estos resultados fueron posibles gracias a una tecnología de separación magnética sumamente sensible que emplea ferrofluidos (nanopartículas magnéticas coloidales) y separadores magnéticos de alto gradiente inventados por Paul Liberti y motivados por cálculos teóricos de Liberti y Leon Terstappen que indicaban que tumores muy pequeños que liberan células a menos del 1,0 % por día deberían dar como resultado células detectables en la sangre. [ 98 ] Desde entonces, se han aplicado diversas tecnologías a la enumeración e identificación de las CTC.

La investigación oncológica moderna ha demostrado que las CTC derivan de clones en el tumor primario, lo que valida las observaciones de Ashworth. [ 99 ] Los importantes esfuerzos dedicados a comprender las propiedades biológicas de las CTC han demostrado el papel fundamental que desempeñan las células tumorales circulantes en la diseminación metastásica del carcinoma . [ 100 ] Además, el análisis unicelular de alta sensibilidad demostró un alto nivel de heterogeneidad observada a nivel unicelular tanto para la expresión de proteínas como para la localización de proteínas [ 101 ] y las CTC reflejaron tanto la biopsia primaria como los cambios observados en los sitios metastásicos. [ 102 ]

Referencias

  1. 1 2 Arvelo F, Sojo F, Cotte C (2016). " Cáncer y el sustrato metastásico" . Ecancer . 10 : 701. doi : 10.3332/ecancer.2016.701 . PMC 5221647. PMID 28105072 .  
  2. 1 2 3 4 5 6 Zhou S, Xu H, Duan Y, Tang Q, Huang H, Bi F (septiembre de 2024). "Mecanismos de supervivencia de las células tumorales circulantes y sus implicaciones para el tratamiento del cáncer" . Cancer and Metastasis Reviews . 43 (3): 941– 957. doi : 10.1007/s10555-024-10178-7 . ISSN 0167-7659 . PMID 38436892 .  
  3. 1 2 3 4 5 6 7 Kurma K, Alix-Panabières C (5 de mayo de 2023). "Mecanobiología y estrategias de supervivencia de las células tumorales circulantes: un proceso hacia el fenotipo invasivo y metastásico" . Frontiers in Cell and Developmental Biology . 11 1188499. doi : 10.3389/fcell.2023.1188499 . ISSN 2296-634X . PMC 10196185. PMID 37215087 .   
  4. ^ Riquet M, Rivera C, Gibault L, Pricopi C, Mordant P, Badia A, et al. (2014). "[Difusión linfática del cáncer de pulmón: cadenas anatómicas de ganglios linfáticos desencadenadas en zonas]". Revista de Pneumología Clínica . 70 ( 1– 2): 16– 25. doi : 10.1016/j.pneumo.2013.07.001 . PMID 24566031 .  
  5. ↑ Gupta GP, Massagué J (noviembre de 2006). " Metástasis del cáncer: construyendo un marco" . Cell . 127 (4): 679– 695. Bibcode : 2006Cell..127..679G . doi : 10.1016/j.cell.2006.11.001 . PMID 17110329. S2CID 7362869 .  
  6. ↑ Rack B, Schindlbeck C, Jückstock J, Andergassen U, Hepp P, Zwingers T, et al. (mayo de 2014). "Las células tumorales circulantes predicen la supervivencia en pacientes con cáncer de mama de riesgo medio a alto en estadio temprano" . Journal of the National Cancer Institute . 106 (5). doi : 10.1093/jnci/dju066 . PMC 4112925. PMID 24832787 .   
  7. ↑ Millner LM, Linder MW, Valdes R (Verano de 2013). "Células tumorales circulantes: una revisión de los métodos actuales y la necesidad de identificar fenotipos heterogéneos" . Annals of Clinical and Laboratory Science . 43 (3): 295– 304. PMC 5060940. PMID 23884225 .  
  8. ↑ Marrinucci D, Bethel K, Luttgen M, Bruce RH, Nieva J, Kuhn P (septiembre de 2009). "Las células tumorales circulantes del adenocarcinoma de pulmón bien diferenciado conservan características citomorfológicas del tipo de tumor primario" . Archives of Pathology & Laboratory Medicine . 133 (9): 1468– 1471. doi : 10.5858/133.9.1468 . PMC 4422331. PMID 19722757 .  
  9. 1 2 Attard G, Swennenhuis JF, Olmos D, Reid AH, Vickers E, A'Hern R, et al. (abril de 2009). "Caracterización del estado de los genes ERG, AR y PTEN en células tumorales circulantes de pacientes con cáncer de próstata resistente a la castración" . Cancer Research . 69 (7): 2912– 2918. doi : 10.1158/0008-5472.CAN-08-3667 . PMID 19339269 .  
  10. 1 2 Cohen SJ, Punt CJ, Iannotti N, Saidman BH, Sabbath KD, Gabrail NY, et al. (julio de 2008). "Relación de las células tumorales circulantes con la respuesta tumoral, la supervivencia libre de progresión y la supervivencia global en pacientes con cáncer colorrectal metastásico" . Journal of Clinical Oncology . 26 (19): 3213– 3221. doi : 10.1200/JCO.2007.15.8923 . PMID 18591556 .  
  11. ↑ Yu M, Ting DT, Stott SL, Wittner BS, Ozsolak F, Paul S, et al. (julio de 2012). " La secuenciación de ARN de células tumorales circulantes pancreáticas implica la señalización WNT en la metástasis" . Nature . 487 (7408): 510– 513. Bibcode : 2012Natur.487..510Y . doi : 10.1038/nature11217 . PMC 3408856. PMID 22763454 .   
  12. ↑ Sleijfer S, Gratama JW, Sieuwerts AM, Kraan J, Martens JW, Foekens JA (diciembre de 2007). "¿Detección de células tumorales circulantes en camino a la implementación diagnóstica rutinaria?". European Journal of Cancer . 43 (18): 2645– 2650. doi : 10.1016/j.ejca.2007.09.016 . PMID 17977713 . 
  13. ↑ Hayes DF, Smerage J (junio de 2008). "¿Existe un papel para las células tumorales circulantes en el manejo del cáncer de mama?" . Clinical Cancer Research . 14 (12): 3646– 3650. doi : 10.1158/1078-0432.CCR-07-4481 . PMID 18559576 . 
  14. ↑ Pantel K, Alix-Panabières C, Riethdorf S (junio de 2009). "Micrometástasis cancerosas". Nature Reviews. Oncología Clínica . 6 (6): 339– 351. doi : 10.1038/nrclinonc.2009.44 . PMID 19399023 . S2CID 890927 .  
  15. ↑ Pantel K, Riethdorf S (abril de 2009). "Patología: ¿son las células tumorales circulantes predictivas de la supervivencia global?". Nature Reviews. Oncología Clínica . 6 (4): 190– 191. doi : 10.1038/nrclinonc.2009.23 . PMID 19333222. S2CID 8904131 .  
  16. ↑ Panteleakou Z, Lembessis P, Sourla A, Pissimissis N, Polyzos A, Deliveliotis C, et al. (2009). " Detección de células tumorales circulantes en pacientes con cáncer de próstata: dificultades metodológicas y relevancia clínica" . Molecular Medicine . 15 ( 3–4 ): 101–114 . doi : 10.2119/molmed.2008.00116 . PMC 2600498. PMID 19081770 .   
  17. ↑ Esmaeilsabzali H, Beischlag TV, Cox ME, Parameswaran AM, Park EJ (noviembre de 2013). "Detección y aislamiento de células tumorales circulantes: principios y métodos". Biotechnology Advances . 31 (7): 1063– 1084. doi : 10.1016/j.biotechadv.2013.08.016 . PMID 23999357 . 
  18. 1 2 Nieva J, Wendel M, Luttgen MS, Marrinucci D, Bazhenova L, Kolatkar A, et al. (febrero de 2012). "Imágenes de alta definición de células tumorales circulantes y eventos celulares asociados en pacientes con cáncer de pulmón de células no pequeñas: un análisis longitudinal" . Biología Física . 9 (1) 016004. Bibcode : 2012PhBio...9a6004N . doi : 10.1088 / 1478-3975/9/1/016004 . PMC 3388002. PMID 22306961 .   
  19. ↑ Eibl RH, Schneemann M (2026). "Células tumorales circulantes en el glioblastoma" . Cancers . 18 (1) 10. doi : 10.3390/cancers18010010 .
  20. ↑ Hong Y, Fang F, Zhang Q (diciembre de 2016). "Agrupaciones de células tumorales circulantes: lo que sabemos y lo que esperamos (Revisión)" . International Journal of Oncology . 49 (6): 2206– 2216. doi : 10.3892/ijo.2016.3747 . PMC 5117994. PMID 27779656 .  
  21. 1 2 Racila E, Euhus D, Weiss AJ, Rao C, McConnell J, Terstappen LW, et al. (abril de 1998). "Detección y caracterización de células de carcinoma en la sangre" . Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América . 95 (8): 4589– 4594. Bibcode : 1998PNAS...95.4589R . doi : 10.1073/pnas.95.8.4589 . PMC 22534. PMID 9539782 .   
  22. 1 2 3 Marrinucci D, Bethel K, Kolatkar A, Luttgen MS, Malchiodi M, Baehring F, et al. (febrero de 2012). "Biopsia de líquido en pacientes con cánceres metastásicos de próstata, páncreas y mama" . Biología Física . 9 (1) 016003. Bibcode : 2012PhBio...9a6003M . doi : 10.1088 / 1478-3975/9/1/016003 . PMC 3387996. PMID 22306768 .   
  23. ↑ Ferraldeschi R, McDaniel A, Krupa R, Louw J, Tucker E, Bales N, et al. (febrero de 2014). "Fenotipos de células tumorales circulantes (CTC) con CK y tamaño nuclear pequeño en el cáncer de próstata metastásico resistente a la castración (mCRPC)". Journal of Clinical Oncology . 32 (4_suppl): 209. doi : 10.1200/jco.2014.32.4_suppl.209 . 
  24. 1 2 Rapanotti MC, Cenci T, Scioli MG, Cugini E, Anzillotti S, Savino L, et al. (septiembre de 2024). " Células tumorales circulantes: origen, función, aplicaciones actuales y perspectivas futuras para la medicina personalizada" . Biomedicines . 12 (9): 2137. doi : 10.3390/biomedicines12092137 . PMC 11429165. PMID 39335650 .   
  25. 1 2 Aceto N, Bardia A, Miyamoto DT, Donaldson MC, Wittner BS, Spencer JA, et al. (agosto de 2014). " Los cúmulos de células tumorales circulantes son precursores oligoclonales de la metástasis del cáncer de mama" . Cell . 158 (5): 1110– 1122. doi : 10.1016/j.cell.2014.07.013 . PMC 4149753. PMID 25171411 .   
  26. ↑ Divella R, Daniele A, Abbate I, Bellizzi A, Savino E, Simone G, et al. (noviembre de 2014). "La presencia de células tumorales circulantes (CTC) agrupadas y citocinas circulantes definen un fenotipo agresivo en el cáncer colorrectal metastásico". Cancer Causes & Control . 25 (11): 1531– 1541. doi : 10.1007/s10552-014-0457-4 . PMID 25135616. S2CID 16377917 .   
  27. 1 2 Schuster E, Taftaf R, Reduzzi C, Albert MK, Romero-Calvo I, Liu H (noviembre de 2021). "Mejor juntos: agrupamiento de células tumorales circulantes en el cáncer metastásico" . Trends in Cancer . 7 (11): 1020– 1032. doi : 10.1016/j.trecan.2021.07.001 . PMC 8541931. PMID 34481763 .  
  28. ↑ Au SH, Storey BD, Moore JC, Tang Q, Chen YL, Javaid S, et al. (mayo de 2016). "Grupos de células tumorales circulantes atraviesan vasos del tamaño de capilares" . Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América . 113 (18): 4947– 4952. Bibcode : 2016PNAS..113.4947A . doi : 10.1073/pnas.1524448113 . PMC 4983862. PMID 27091969 .   
  29. ↑ Allen TA, Cullen MM, Hawkey N, Mochizuki H, Nguyen L, Schechter E, et al. (2021). "Un modelo de pez cebra de colonización metastásica identifica los mecanismos celulares de la extravasación de células tumorales circulantes" . Frontiers in Oncology . 11 641187. doi : 10.3389/fonc.2021.641187 . PMC 8495265. PMID 34631514 .   
  30. ↑ Wang WC, Zhang XF, Peng J, Li XF, Wang AL, Bie YQ, et al. (2018). "Mecanismos de supervivencia y factores de influencia de las células tumorales circulantes" . BioMed Research International . 2018 (1) 6304701. doi : 10.1155/2018/6304701 . ISSN 2314-6141 . PMC 6236925. PMID 30515411 .    
  31. 1 2 Perea Paizal J, Au SH, Bakal C (1 de diciembre de 2021). "Atravesando la microcirculación: adaptaciones de supervivencia de las células tumorales circulantes para sembrar metástasis" . British Journal of Cancer . 124 (1): 58– 65. doi : 10.1038/s41416-020-01176-x . ISSN 1532-1827 . PMC 7782506. PMID 33257836 .   
  32. ↑ Bates M, Mohamed BM, Ward MP, Kelly TE, O'Connor R, Malone V, et al. (1 de marzo de 2023). "Células tumorales circulantes: lo bueno, lo malo y lo feo" . Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Reviews on Cancer . 1878 (2) 188863. doi : 10.1016/j.bbcan.2023.188863 . hdl : 11541.2/33469 . ISSN 0304-419X . PMID 36796527 .   
  33. ↑ Ghossein RA, Bhattacharya S, Rosai J (agosto de 1999). "Detección molecular de micrometástasis y células tumorales circulantes en tumores sólidos". Clinical Cancer Research . 5 (8): 1950– 1960. PMID 10473071 . 
  34. ↑ Zhe X, Cher ML, Bonfil RD (2011). "Células tumorales circulantes: encontrar la aguja en el pajar" . American Journal of Cancer Research . 1 (6): 740– 751. PMC 3195935. PMID 22016824 .  
  35. 1 2 Miller MC, Doyle GV, Terstappen LW (2010). "Importancia de las células tumorales circulantes detectadas por el sistema CellSearch en pacientes con cáncer de mama, colorrectal y de próstata metastásico" . Journal of Oncology . 2010 617421. doi : 10.1155/2010/617421 . PMC 2793426. PMID 20016752 .  
  36. ↑ Swaby RF, Cristofanilli M (abril de 2011). " Células tumorales circulantes en el cáncer de mama: una herramienta cuyo momento ha llegado a la madurez" . BMC Medicine . 9 43. doi : 10.1186/1741-7015-9-43 . PMC 3107794. PMID 21510857 .  
  37. ↑ Danila DC, Fleisher M, Scher HI (junio de 2011). " Células tumorales circulantes como biomarcadores en el cáncer de próstata" . Clinical Cancer Research . 17 (12): 3903– 3912. doi : 10.1158/1078-0432.CCR-10-2650 . PMC 3743247. PMID 21680546 .  
  38. ↑ Tanaka F, Yoneda K, Kondo N, Hashimoto M, Takuwa T, Matsumoto S, et al. (noviembre de 2009). "Células tumorales circulantes como marcador diagnóstico en el cáncer de pulmón primario" . Clinical Cancer Research . 15 (22): 6980– 6986. doi : 10.1158/1078-0432.CCR-09-1095 . PMID 19887487 .  
  39. ↑ Negin BP, Cohen SJ (junio de 2010). "Células tumorales circulantes en el cáncer colorrectal: desafíos pasados, presentes y futuros". Current Treatment Options in Oncology . 11 ( 1–2 ): 1–13 . doi : 10.1007/s11864-010-0115-3 . PMID 20143276. S2CID 11881681 .  
  40. ↑ Mikolajczyk SD, Millar LS, Tsinberg P, Coutts SM, Zomorrodi M, Pham T, et al. (2011). " Detección de células tumorales circulantes EpCAM-negativas y citoqueratina-negativas en sangre periférica" . Journal of Oncology . 2011 252361. doi : 10.1155/2011/252361 . PMC 3090615. PMID 21577258 .   
  41. ↑ da Costa A, Oliveira JT, Gärtner F, Kohn B, Gruber AD, Klopfleisch R (octubre de 2011). "Posibles marcadores para la detección de células tumorales mamarias caninas circulantes en la sangre periférica". Veterinary Journal . 190 (1): 165– 168. doi : 10.1016/j.tvjl.2010.09.027 . PMID 21051248 . 
  42. ↑ da Costa A, Kohn B, Gruber AD, Klopfleisch R (abril de 2013). "Múltiples marcadores RT-PCR para la detección de células tumorales circulantes de tumores mamarios caninos metastásicos". Veterinary Journal . 196 (1): 34– 39. doi : 10.1016/j.tvjl.2012.08.021 . PMID 23036177 . 
  43. ↑ Harb W, Fan A, Tran T, Danila DC, Keys D, Schwartz M, et al. (2013). "Análisis mutacional de células tumorales circulantes mediante un novedoso dispositivo de recolección microfluídica y ensayo de qPCR" . Oncología traslacional . 6 (5): 528– 538. doi : 10.1593/tlo.13367 . PMC 3799195. PMID 24151533 .   
  44. 1 2 3 Pachmann K, Camara O, Kavallaris A, Krauspe S, Malarski N, Gajda M, et al. (marzo de 2008). "Monitorización de la respuesta de las células tumorales epiteliales circulantes a la quimioterapia adyuvante en el cáncer de mama permite la detección de pacientes con riesgo de recaída temprana". Journal of Clinical Oncology . 26 (8): 1208– 1215. doi : 10.1200/JCO.2007.13.6523 . PMID 18323545. S2CID 20074388 .   
  45. ↑ Ronen S, Kroft SH, Olteanu H, Hosking PR, Harrington AM (febrero de 2019). "Carcinocitemia: ¿Una entidad rara que se está volviendo más común? Una serie de siete casos de una sola institución durante 3 años y revisión de la literatura" . International Journal of Laboratory Hematology . 41 (1): 69–79 . doi : 10.1111/ijlh.12924 . PMID 30216684 . 
  46. ↑ Paterlini-Brechot P, Benali NL (agosto de 2007). "Detección de células tumorales circulantes (CTC): impacto clínico y direcciones futuras". Cancer Letters . 253 (2): 180– 204. doi : 10.1016/j.canlet.2006.12.014 . PMID 17314005 . 
  47. ↑ "Sitio web de Veridex CellSearch" . Marzo de 2010. Archivado del original el 5 de junio de 2008. Consultado el 14 de marzo de 2010 .
  48. ↑ "Veridex LLC. Notificación previa a la comercialización del kit de células tumorales circulantes CellSearch: indicaciones de uso ampliadas: cáncer de próstata metastásico" (PDF) . Administración de Alimentos y Medicamentos . Marzo de 2010. Consultado el 14 de marzo de 2010 .
  49. ↑ Cristofanilli M, Budd GT, Ellis MJ, Stopeck A, Matera J, Miller MC, et al. (agosto de 2004). "Células tumorales circulantes, progresión de la enfermedad y supervivencia en el cáncer de mama metastásico" . The New England Journal of Medicine . 351 (8): 781– 791. doi : 10.1056/NEJMoa040766 . PMID 15317891. S2CID 7445998 .   
  50. ↑ Budd GT, Cristofanilli M, Ellis MJ, Stopeck A, Borden E, Miller MC, et al. (noviembre de 2006). "Células tumorales circulantes frente a imágenes: predicción de la supervivencia global en el cáncer de mama metastásico" . Clinical Cancer Research . 12 (21): 6403– 6409. doi : 10.1158/1078-0432.CCR-05-1769 . PMID 17085652 .  
  51. ↑ de Bono JS, Scher HI, Montgomery RB, Parker C, Miller MC, Tissing H, et al. (octubre de 2008). "Las células tumorales circulantes predicen el beneficio de supervivencia del tratamiento en el cáncer de próstata metastásico resistente a la castración" . Clinical Cancer Research . 14 (19): 6302– 6309. doi : 10.1158/1078-0432.CCR-08-0872 . PMID 18829513 .  
  52. ↑ Allard WJ, Matera J, Miller MC, Repollet M, Connelly MC, Rao C, et al. (octubre de 2004). "Las células tumorales circulan en la sangre periférica de todos los carcinomas principales, pero no en sujetos sanos ni en pacientes con enfermedades no malignas" . Clinical Cancer Research . 10 (20): 6897– 6904. doi : 10.1158/1078-0432.CCR-04-0378 . PMID 15501967 .  
  53. ↑ Riethdorf S, Fritsche H, Müller V, Rau T, Schindlbeck C, Rack B, et al. (febrero de 2007). "Detección de células tumorales circulantes en sangre periférica de pacientes con cáncer de mama metastásico: un estudio de validación del sistema CellSearch" . Clinical Cancer Research . 13 (3): 920– 928. doi : 10.1158/1078-0432.CCR-06-1695 . PMID 17289886 .  
  54. ↑ Yu M, Stott S, Toner M, Maheswaran S, Haber DA (febrero de 2011). "Células tumorales circulantes: enfoques para el aislamiento y la caracterización" . The Journal of Cell Biology . 192 (3): 373– 382. doi : 10.1083/jcb.201010021 . PMC 3101098. PMID 21300848 .  
  55. ↑ Nagrath S, Sequist LV, Maheswaran S, Bell DW, Irimia D, Ulkus L, et al. (diciembre de 2007). "Aislamiento de células tumorales circulantes raras en pacientes con cáncer mediante tecnología de microchips" . Nature . 450 ( 7173): 1235– 1239. Bibcode : 2007Natur.450.1235N . doi : 10.1038/nature06385 . PMC 3090667. PMID 18097410 .   
  56. ↑ Hoshino K, Huang YY, Lane N, Huebschman M, Uhr JW, Frenkel EP, et al. (octubre de 2011). " Detección inmunomagnética de células tumorales circulantes mediante microchips" . Lab on a Chip . 11 (20): 3449– 3457. doi : 10.1039/c1lc20270g . PMC 3379551. PMID 21863182 .   
  57. ↑ Chen P, Huang YY, Hoshino K, Zhang X (febrero de 2014). "Enriquecimiento inmunomagnético multiescala de células tumorales circulantes: de tubos a microchips". Lab on a Chip . 14 (3): 446– 458. doi : 10.1039/C3LC51107C . PMID 24292816. S2CID 205863853 .  
  58. ↑ Huang YY, Hoshino K, Chen P, Wu CH, Lane N, Huebschman M, et al. (agosto de 2013). "Nanocribado inmunomagnético de células tumorales circulantes con un sistema microfluídico controlado por movimiento" . Biomedical Microdevices . 15 (4): 673– 681. doi : 10.1007/s10544-012-9718-8 . PMC 3584207. PMID 23109037 .   
  59. ↑ Hoshino K, Chen P, Huang YY, Zhang X (mayo de 2012). "Análisis computacional de la separación inmunomagnética microfluídica de células raras de un flujo sanguíneo particulado" . Analytical Chemistry . 84 (10): 4292– 4299. Bibcode : 2012AnaCh..84.4292H . doi : 10.1021/ac2032386 . PMC 3359653. PMID 22510236 .  
  60. ↑ Chen P, Huang YY, Hoshino K, Zhang JX (marzo de 2015). "Modulación de campo magnético a microescala para una mejor captura y distribución de células tumorales circulantes raras" . Scientific Reports . 5 8745. Bibcode : 2015NatSR...5.8745C . doi : 10.1038/srep08745 . PMC 4348664. PMID 25735563 .  
  61. ↑ Huang YY, Chen P, Wu CH, Hoshino K, Sokolov K, Lane N, et al. (noviembre de 2015). " Detección y análisis molecular de células tumorales circulantes individuales mediante una matriz de micromagnetos" . Scientific Reports . 5 16047. Bibcode : 2015NatSR...516047H . doi : 10.1038/srep16047 . PMC 4633592. PMID 26538094 .   
  62. ↑ Chen P, Huang YY, Bhave G, Hoshino K, Zhang X (mayo de 2016). "Matriz de micromagnetos impresa con inyección de tinta en portaobjetos de vidrio para el enriquecimiento inmunomagnético de células tumorales circulantes" . Annals of Biomedical Engineering . 44 (5): 1710– 1720. doi : 10.1007/s10439-015-1427-z . PMC 4761332. PMID 26289942 .  
  63. ↑ Wang H, Chen NG, Minev BR, Zimmermann M, Aguilar RJ, Zhang Q, et al. (septiembre de 2013). "Detección óptica y viroterapia de células tumorales metastásicas vivas en fluidos corporales con cepas de vaccinia" . PLOS ONE . 8 (9) e71105. Bibcode : 2013PLoSO...871105W . doi : 10.1371/journal.pone.0071105 . PMC 3760980. PMID 24019862 .   
  64. ↑ Agerbæk MØ, Bang-Christensen SR, Yang MH, Clausen TM, Pereira MA, Sharma S, et al. (agosto de 2018). "La proteína de malaria VAR2CSA recupera eficientemente células tumorales circulantes de manera independiente de EpCAM" . Nature Communications . 9 (1) 3279. Bibcode : 2018NatCo...9.3279A . doi : 10.1038/s41467-018-05793-2 . PMC 6095877. PMID 30115931 .   
  65. ↑ «GILUPI - CellCollector aislamiento de CTC in vivo» . www.gilupi.de .
  66. ^ Saucedo-Zeni N, Mewes S, Niestroj R, Gasiorowski L, Murawa D, Nowaczyk P, et al. (octubre de 2012). "Un método novedoso para el aislamiento in vivo de células tumorales circulantes de sangre periférica de pacientes con cáncer utilizando un cable médico estructurado y funcionalizado" . Revista Internacional de Oncología . 41 (4): 1241– 1250. doi : 10.3892/ijo.2012.1557 . PMC 3583719 . PMID 22825490 .   
  67. ↑ Luecke K, Gasiorowski L, Herold S, Brychta N, Gallerani G, Krahn T, et al. (2015). "El GILUPI CellCollector como herramienta in vivo para la enumeración de células tumorales circulantes y la caracterización molecular en pacientes con cáncer de pulmón" . Actas de la Reunión Anual de la ASCO . 33 (15_suppl). Archivado del original el 10 de marzo de 2016. 
  68. ↑ Scheumann N, Gorges T, Penkalla N, Nowack B, Schalk T, Riethdorf S, et al. (2015). "50P * Enumeración y caracterización molecular de células tumorales circulantes en pacientes con cáncer de pulmón utilizando el colector celular Gilupi, un dispositivo eficaz in vivo para la captura de CTCS" . Annals of Oncology . 26 : i14. doi : 10.1093/annonc/mdv045.14 . 
  69. ↑ "Introducción a CellSearch" (PDF) . Archivado del original (PDF) el 23 de enero de 2014.
  70. ↑ Sánchez-Lorencio MI, Ramírez P, Saenz L, Martínez Sánchez MV, De La Orden V, Mediero-Valeros B, et al. (noviembre de 2015). "Comparación de dos tipos de biopsias líquidas en pacientes con carcinoma hepatocelular en espera de un trasplante ortotópico de hígado". Trámites de Trasplante . 47 (9): 2639– 2642. doi : 10.1016/j.transproceed.2015.10.003 . PMID 26680058 .  
  71. ↑ Bethel K, Luttgen MS, Damani S, Kolatkar A, Lamy R, Sabouri-Ghomi M, et al. (febrero de 2014). "Biopsia en fase fluida para la detección y caracterización de células endoteliales circulantes en el infarto de miocardio" . Biología Física . 11 (1) 016002. Bibcode : 2014PhBio..11a6002B . doi : 10.1088 / 1478-3975/11/1/016002 . PMC 4143170. PMID 24406475 .   
  72. ↑ Pachmann K (mayo de 2015). "Uso actual y potencial del método MAINTRAC para el diagnóstico del cáncer y la predicción de metástasis". Expert Review of Molecular Diagnostics . 15 (5): 597– 605. doi : 10.1586/14737159.2015.1032260 . PMID 25843106. S2CID 34030968 .  
  73. ↑ Pachmann K, Camara O, Kavallaris A, Schneider U, Schünemann S, Höffken K (2005). "Cuantificación de la respuesta de las células epiteliales circulantes al tratamiento neoadyuvante para el cáncer de mama: una nueva herramienta para el seguimiento de la terapia" . Breast Cancer Research . 7 (6) R975: R975– R979. doi : 10.1186/bcr1328 . PMC 1410761. PMID 16280045 .  
  74. ↑ Lobodasch K, Fröhlich F, Rengsberger M, Schubert R, Dengler R, Pachmann U, et al. (abril de 2007). "Cuantificación de células tumorales circulantes para el seguimiento de la terapia adyuvante en el cáncer de mama: un aumento en el número de células al finalizar la terapia es un predictor de recaída temprana". Breast . 16 (2): 211– 218. doi : 10.1016/j.breast.2006.12.005 . PMID 17291754 .  
  75. ↑ Camara O, Rengsberger M, Egbe A, Koch A, Gajda M, Hammer U, et al. (septiembre de 2007). "La relevancia de las células tumorales epiteliales circulantes (CETC) para el monitoreo de la terapia durante la quimioterapia neoadyuvante (sistémica primaria) en el cáncer de mama" . Annals of Oncology . 18 (9): 1484– 1492. doi : 10.1093/annonc/mdm206 . PMID 17761704 .  
  76. ↑ Pachmann K, Camara O, Kohlhase A, Rabenstein C, Kroll T, Runnebaum IB, et al. (mayo de 2011). "Evaluación de la eficacia de la terapia dirigida mediante células tumorales epiteliales circulantes (CETC): el ejemplo de la monitorización de la terapia SERM como una herramienta única para individualizar la terapia" . Journal of Cancer Research and Clinical Oncology . 137 (5): 821– 828. doi : 10.1007/s00432-010-0942-4 . PMC 3074080. PMID 20694797 .   
  77. ↑ Pachmann K, Camara O, Kroll T, Gajda M, Gellner AK, Wotschadlo J, et al. (septiembre de 2011). "Control de la eficacia de la terapia utilizando células tumorales epiteliales circulantes (CETC) como "biopsia líquida": trastuzumab en carcinoma de mama HER2/neu positivo" . Journal of Cancer Research and Clinical Oncology . 137 (9): 1317– 1327. doi : 10.1007/s00432-011-1000-6 . PMC 3155034. PMID 21739182 .   
  78. ↑ Hekimian K, Meisezahl S, Trompelt K, Rabenstein C, Pachmann K (2012). "Diseminación y readhesión de células epiteliales: análisis de factores que contribuyen a la formación de metástasis en el cáncer de mama" . ISRN Oncology . 2012 601810. doi : 10.5402/2012/601810 . PMC 3317055. PMID 22530147 .  
  79. ↑ Rolle A, Günzel R, Pachmann U, Willen B, Höffken K, Pachmann K (marzo de 2005). "El aumento en el número de células epiteliales diseminadas circulantes después de la cirugía para el cáncer de pulmón de células no pequeñas monitorizado por MAINTRAC(R) es un predictor de recaída: un informe preliminar" . World Journal of Surgical Oncology . 3 (1) 18. doi : 10.1186/1477-7819-3-18 . PMC 1087511. PMID 15801980 .  
  80. ↑ Camara O, Kavallaris A, Nöschel H, Rengsberger M, Jörke C, Pachmann K (septiembre de 2006). "Siembra de células epiteliales en la circulación durante la cirugía para el cáncer de mama: el destino de las células movilizadas malignas y benignas" . World Journal of Surgical Oncology . 4 67. doi : 10.1186/1477-7819-4-67 . PMC 1599731. PMID 17002789 .  
  81. ↑ Desitter I, Guerrouahen BS, Benali-Furet N, Wechsler J, Jänne PA, Kuang Y, et al. (febrero de 2011). "Un nuevo dispositivo para el aislamiento rápido por tamaño y la caracterización de células tumorales circulantes raras". Anticancer Research . 31 (2): 427– 441. PMID 21378321 .  
  82. ↑ Miller MC, Robinson PS, Wagner C, O'Shannessy DJ (diciembre de 2018). "El sistema de separación celular Parsortix™: una plataforma versátil para biopsias líquidas" . Cytometry . Part A. 93 ( 12): 1234–1239 . doi : 10.1002/cyto.a.23571 . PMC 6586069. PMID 30107082 .  
  83. ↑ Tkaczuk KH, Goloubeva O, Tait NS, Feldman F, Tan M, Lum ZP, et al. (septiembre de 2008). "La importancia de las células epiteliales circulantes en pacientes con cáncer de mama mediante un nuevo método de selección negativa". Breast Cancer Research and Treatment . 111 (2): 355– 364. doi : 10.1007/s10549-007-9771-9 . PMID 18064568. S2CID 25370612 .   
  84. ↑ Wang ZP, Eisenberger MA, Carducci MA, Partin AW, Scher HI, Ts'o PO (junio de 2000). "Identificación y caracterización de células circulantes de carcinoma de próstata" . Cancer . 88 (12): 2787– 2795. doi : 10.1002/1097-0142(20000615)88:12 < 2787::aid-cncr18 > 3.0.co ; 2-2 . PMID 10870062 . 
  85. ↑ Polascik TJ, Wang ZP, Shue M, Di S, Gurganus RT, Hortopan SC, et al. (septiembre de 1999). "Influencia de la biopsia prostática sextante con aguja o la cirugía en la detección y obtención de células cancerosas de próstata circulantes intactas". The Journal of Urology . 162 (3 Pt 1): 749– 752. doi : 10.1097/00005392-199909010-00034 . PMID 10458358 .  
  86. ↑ Ali A, Furusato B, Ts'o PO, Lum ZP, Elsamanoudi S, Mohamed A, et al. (octubre de 2010). "Evaluación de células tumorales circulantes (CTC) en pacientes con cáncer de próstata con tumores de bajo volumen". Pathology International . 60 (10): 667– 672. doi : 10.1111/j.1440-1827.2010.02584.x . PMID 20846264. S2CID 205478411 .   
  87. ↑ Hodgkinson CL, Morrow CJ, Li Y, Metcalf RL, Rothwell DG, Trapani F, et al. (agosto de 2014). "Tumorigenicidad y perfil genético de células tumorales circulantes en cáncer de pulmón de células pequeñas". Nature Medicine . 20 (8): 897– 903. doi : 10.1038/nm.3600 . PMID 24880617. S2CID 205393324 .   
  88. ↑ Ozkumur E, Shah AM, Ciciliano JC, Emmink BL, Miyamoto DT, Brachtel E, et al. (abril de 2013). "Enfoque inercial para la clasificación dependiente e independiente de antígenos tumorales de células tumorales circulantes raras" . Science Translational Medicine . 5 (179): 179ra47. doi : 10.1126/scitranslmed.3005616 . PMC 3760275. PMID 23552373 .   
  89. ↑ Meng S, Tripathy D, Shete S, Ashfaq R, Haley B, Perkins S, et al. (junio de 2004). "La amplificación del gen HER-2 puede adquirirse a medida que progresa el cáncer de mama" . Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América . 101 (25): 9393– 9398. Bibcode : 2004PNAS..101.9393M . doi : 10.1073/pnas.0402993101 . PMC 438987. PMID 15194824 .   
  90. ↑ Hayes DF, Walker TM, Singh B, Vitetta ES, Uhr JW, Gross S, et al. (noviembre de 2002). "Monitorización de la expresión de HER-2 en células epiteliales circulantes en pacientes con cáncer de mama avanzado". International Journal of Oncology . 21 (5): 1111– 1117. doi : 10.3892/ijo.21.5.1111 . PMID 12370762 .  
  91. ↑ O'Hara SM, Moreno JG, Zweitzig DR, Gross S, Gomella LG, Terstappen LW (mayo de 2004). "Perfilado de células tumorales circulantes mediante PCR de transcripción inversa multigénica en cáncer de próstata resistente a hormonas" . Clinical Chemistry . 50 (5): 826– 835. doi : 10.1373/clinchem.2003.028563 . PMID 14988224 . 
  92. ↑ de Bono JS, Attard G, Adjei A, Pollak MN, Fong PC, Haluska P, et al. (junio de 2007). "Aplicaciones potenciales para células tumorales circulantes que expresan el receptor del factor de crecimiento similar a la insulina I" . Clinical Cancer Research . 13 (12): 3611– 3616. doi : 10.1158/1078-0432.CCR-07-0268 . PMID 17575225 .  
  93. ↑ Karp DD, Pollak MN, Cohen RB, Eisenberg PD, Haluska P, Yin D, et al. (noviembre de 2009). "Seguridad, farmacocinética y farmacodinámica del inhibidor del receptor del factor de crecimiento similar a la insulina tipo 1 figitumumab (CP-751,871) en combinación con paclitaxel y carboplatino" . Journal of Thoracic Oncology . 4 (11): 1397– 1403. doi : 10.1097/JTO.0b013e3181ba2f1d . PMC 2941876. PMID 19745765 .   
  94. ↑ Klotz R, Thomas A, Teng T, Han SM, Iriondo O, Li L, et al. (enero de 2020). " Las células tumorales circulantes exhiben tropismo metastásico y revelan impulsores de metástasis cerebrales" . Cancer Discovery . 10 (1): 86– 103. doi : 10.1158/2159-8290.CD-19-0384 . PMC 6954305. PMID 31601552 .   
  95. ↑ Tibbe AG, Miller MC, Terstappen LW (marzo de 2007). " Consideraciones estadísticas para la enumeración de células tumorales circulantes" . Cytometry. Part A. 71 ( 3): 154– 162. doi : 10.1002/cyto.a.20369 . PMID 17200956. S2CID 6648226 .  
  96. ↑ Coumans FA, Doggen CJ, Attard G, de Bono JS, Terstappen LW (septiembre de 2010). "Todos los objetos EpCAM+CK+CD45- circulantes predicen la supervivencia global en el cáncer de próstata resistente a la castración" . Annals of Oncology . 21 (9): 1851– 1857. doi : 10.1093/annonc/mdq030 . PMID 20147742 . 
  97. ↑ Ashworth TR (1869). "Un caso de cáncer en el que se observaron en la sangre, después de la muerte, células similares a las de los tumores". Australian Medical Journal . 14 : 146–7 .
  98. ↑ Liberti P (22 de noviembre de 2013). "Las herramientas que impulsaron el nuevo mundo de las células tumorales circulantes por Paul A. Liberti – BioMagnetic Solutions" . biomagneticsolutions.com . Archivado del original el 26 de septiembre de 2017. Consultado el 25 de septiembre de 2017 .
  99. ↑ Fehm T, Sagalowsky A, Clifford E, Beitsch P, Saboorian H, Euhus D, et al. (julio de 2002). "Evidencia citogenética de que las células epiteliales circulantes en pacientes con carcinoma son malignas". Clinical Cancer Research . 8 (7): 2073– 2084. PMID 12114406 .  
  100. ↑ Fidler IJ (junio de 2003). "La patogénesis de la metástasis del cáncer: la hipótesis de la 'semilla y el suelo' revisitada". Nature Reviews. Cancer . 3 (6): 453– 458. Bibcode : 2003NatRC...3..453F . doi : 10.1038/nrc1098 . PMID 12778135. S2CID 9195161 .  
  101. ↑ Dittamore R, Louw J, Krupa R, Anand A, Costin Danila D, Arslan Z, et al. (2014). Caracterización molecular de células tumorales circulantes (CTC) y subpoblaciones de CTC en cáncer de próstata metastásico resistente a la castración progresivo (mCRPC) . Simposio de cánceres genitourinarios de 2014. J Clin Oncol . Vol. 32, art. 132. Archivado del original el 23 de enero de 2016.   
  102. ↑ Punnoose E, Tucker E, Szafer-Glusman E, Zhu J, Marrinucci D, Louw J, et al. (2014). "Evaluación del estado de PTEN en células tumorales circulantes (CTC) y tejido tumoral correspondiente de pacientes con cáncer de próstata resistente a la castración (CRPC)" . Actas de la 105.ª Reunión Anual de la Asociación Estadounidense para la Investigación del Cáncer . Art. 4819. Filadelfia: AACR – vía abstractsonline.com.