Hispanopedia WikiEn micología, se dice que un tejido o estructura es amiloide si presenta una reacción amiloide positiva al someterse a una prueba química simple con yodo como componente del reactivo de Melzer o de la solución de Lugol , produciendo una tinción de azul a azul negruzco. El término "amiloide" deriva del latín amyloideus ("similar al almidón"). [ 1 ] Se refiere al hecho de que el almidón produce una reacción similar, también llamada reacción amiloide. La prueba puede realizarse en estructuras microscópicas, como paredes de esporas o hifas , o el aparato apical o la pared completa del asco , o ser una reacción macroscópica en tejido donde se aplica una gota del reactivo. Las reacciones negativas, llamadas inamiloides o no amiloides , corresponden a estructuras que permanecen de color amarillo parduzco pálido o transparentes. Una reacción que produce una tinción de color rojo intenso a marrón rojizo se denomina reacción dextrinoide ( pseudoamiloide es un sinónimo) o reacción hemiamiloides .
Reacciones con reactivos de Melzer
La prueba de Melzer se utiliza exponiendo tejido o células fúngicas al reactivo, generalmente en una preparación para microscopio , y buscando cualquiera de las tres reacciones de color:
- Reacción amiloide o de Melzer positiva, en la que el material reacciona cambiando de azul a negro.
- Reacción pseudoamiloide o dextrinoide , en la que el material reacciona adquiriendo un color marrón o marrón rojizo.
- Inamiloide o Melzer negativo, en el que los tejidos no cambian de color o reaccionan ligeramente de color amarillo-marrón. [ 2 ]
Dentro de la reacción amiloide, se pueden distinguir dos tipos:
- Reacción euamiloide, en la que el material se torna azul sin pretratamiento con hidróxido de potasio (KOH).
- Reacción hemiamiloides, en la que el material se torna rojo en solución de Lugol , pero no muestra reacción en reactivo de Melzer; cuando se trata previamente con KOH, se torna azul en ambos reactivos ( hemiamiloidía ). [ 3 ]
Las reacciones de Melzer suelen ser casi inmediatas, aunque en algunos casos la reacción puede tardar hasta 20 minutos en desarrollarse. [ 2 ]
Las funciones de los componentes químicos del reactivo de Melzer son diversas. El hidrato de cloral es un agente aclarante que blanquea y mejora la transparencia de diversos materiales microscópicos de color oscuro. El yoduro de potasio se utiliza para mejorar la solubilidad del yodo, que de otro modo es solo semisoluble en agua. Se cree que el yodo es el principal agente colorante activo en el reactivo de Melzer; se piensa que reacciona con polisacáridos similares al almidón en las paredes celulares del material amiloide; sin embargo, su mecanismo de acción no se comprende completamente. Se ha observado que el material hemiamiloides reacciona de manera diferente cuando se expone al reactivo de Melzer que cuando se expone a otras soluciones de yoduro de potasio, como la de Lugol, y que en algunos casos se muestra una reacción amiloide en material que ha tenido una exposición previa a KOH, pero una reacción no amiloide sin dicho pretratamiento. [ 3 ] [ 4 ] [ 5 ]
Un experimento en el que se analizaron las reacciones de esporas de 35 especies de basidiomicetos a las soluciones de Melzer y Lugol demostró que las esporas de un gran porcentaje de las especies analizadas presentan reacciones muy diferentes entre ambos reactivos. Estas reacciones variaron desde ser débiles o no reactivas a la solución de Lugol, hasta dar reacciones positivas al yodo en la solución de Lugol pero no en la de Melzer, e incluso dar reacciones dextrinoides en la solución de Lugol y reacciones amiloides en la de Melzer. [ 6 ]
El reactivo de Melzer se degrada formando un precipitado turbio al combinarse con soluciones alcalinas, [ 2 ] por lo que no puede utilizarse en combinación ni en serie directa con reactivos micológicos comunes como las soluciones de hidróxido de potasio o hidróxido de amonio . Cuando se utiliza hidróxido de potasio como pretratamiento, primero debe neutralizarse la alcalinidad antes de añadir el reactivo de Melzer.
Hemiamiloidosis
La hemiamiloidía en micología se refiere a un caso especial de amiloidía de la pared celular donde la tinción azul por yodo solo ocurre cuando el tejido fue pretratado con solución de hidróxido de potasio (KOH) u otras bases fuertes, mientras que la aplicación directa de yodo causa una reacción roja cuando se usa la solución de Lugol , pero ninguna reacción cuando se usa el reactivo de Melzer . [ 7 ] [ 2 ] La hemiamiloidía hasta ahora solo se conoce en Ascomycota , pero aquí está muy extendida y es un importante criterio de distinción taxonómica. [ 7 ] [ 8 ] Si las paredes celulares se tiñen de azul con reactivos de yodo sin pretratamiento con KOH, esto se llama euamiloide. El término amiloide comprende ambas variantes. [ 2 ]
Propiedades
Un elemento hemiamiloides de la pared celular no se tiñe directamente de azul con reactivos de yodo añadidos a una preparación acuosa, sino solo cuando se ha pretratado con una solución de hidróxido de potasio (KOH). Sin el pretratamiento con KOH, el resultado depende en gran medida del tipo de reactivo de yodo: con la solución de Lugol (IKI), las estructuras hemiamiloides reaccionan de rojo a marrón rojizo, mientras que cualquier reacción se suprime al usar el reactivo de Melzer (MLZ). Este efecto de enmascaramiento (falsa inamiloideidad) se debe a la alta concentración de hidrato de cloral en el MLZ. La alternativa al hemiamiloides se denomina euamiloide. Las estructuras euamiloides y hemiamiloides pretratadas con KOH reaccionan de azul independientemente del tipo de reactivo de yodo. Las reacciones hemiamiloides y euamiloides pueden ocurrir simultáneamente, ya sea en sitios espacialmente separados de la pared celular (por ejemplo, euamiloide del anillo apical del asco, hemiamiloides de la pared lateral), o como un tipo intermedio de la misma región de la pared. En este último caso, se puede observar una superposición de azul y rojo en la solución de Lugol sin pretratamiento con KOH: se produce un cambio de color de azul a marrón rojizo sucio cuando el reactivo de yodo se difunde lentamente en la preparación acuosa, porque la reacción euamiloide aparece a concentraciones de yodo más bajas que la reacción hemiamiloidal. Los ascos con paredes totalmente reactivas de este tipo de hemiamiloidía muestran colores similares al arco iris cuando se aplica IKI a baja concentración. [ 2 ]
Reacción hemiamiloidal (roja) en IKI antes del tratamiento con KOH, en comparación con la euamiloide (azul) y la inamiloide (negativa). Solo la reacción hemiamiloidal depende en gran medida del reactivo de yodo aplicado (IKI, MLZ) y del pretratamiento con KOH, siendo negativa en MLZ y azul cuando se realiza el pretratamiento con KOH (en IKI o MLZ). La aplicación directa de IKI a una muestra de agua (sin KOH, resaltada) es la forma más sencilla de reconocer la hemiamiloidía. [ 2 ]
Reacción al yodo de los anillos apicales del asco hemiamiloides de Hysteropezizella (Helotiales) en función del reactivo de yodo (IKI, MLZ) y del pretratamiento con KOH. [ 2 ]
Ocurrencia, significado
La hemiamiloidía se presenta en muchos grupos de ascomicetos . En la mayoría de los miembros de Lecanorales y Ostropales, sean liquenizados o no, toda la capa externa de la pared del asco reacciona hemiamiloidamente. Aproximadamente el 20% de los Helotiales tienen anillos apicales del asco hemiamiloideos, en comparación con un 50% estimado con anillos apicales euamiloideos. En Pezizomycetes y diferentes clases de pyrenomycetes, las reacciones hemiamiloideas son raras. Si bien la hemiamiloidía es un marcador taxonómico muy valioso que permite diferenciar entre especies o géneros, este tipo de reacción, en particular la reacción roja en IKI, a menudo se pasa por alto. Este descuido se produjo desde que los micólogos cambiaron al reactivo de Melzer, introducido en 1924, que desplazó casi por completo la solución de Lugol utilizada anteriormente. La hemiamiloidía se informó por primera vez al aplicar el reactivo de Melzer, que dio un resultado negativo sin KOH, pero una reacción azul cuando se trató previamente con KOH. [ 9 ] Debido a la frecuencia de hemiamiloidía en los líquenes, los liquenólogos generalmente no se sumaron a este cambio, sino que continuaron utilizando la solución de Lugol. El uso generalizado de hongos herborizados hinchados en KOH antes del estudio contribuye aún más a que la hemiamiloidía se pase por alto con frecuencia. [ 10 ]
Química
El fundamento químico de la hemiamiloidía no está claro. Una hipótesis postula que secciones helicoidales cortas de una cadena de carbohidratos se alternan con secciones lineales más cortas o más largas. Las secciones helicoidales cortas, similares a la dextrinoidía del glucógeno , causarían la reacción roja por la inclusión de átomos de yodo en la espiral, y las secciones lineales podrían curvarse bajo la influencia del KOH, dando lugar a largas cadenas helicoidales que producen una tinción azul al incorporar yodo. La hipotética estructura espiral de estas macromoléculas parece estar relacionada con la extensibilidad de la pared del asco, requisito indispensable para la eyección activa y explosiva de ascosporas cuando se libera su alta turgencia celular. Una alta extensibilidad de la pared celular es particularmente necesaria en la zona de la abertura apical en forma de poro (anillo apical), a través de la cual se presionan las ascosporas cuando el asco estalla. [ 2 ]
Véase también
Referencias
- ↑ Ulloa, Miguel; Halin, Richard T. (2012). Diccionario ilustrado de micología (2.ª ed.). St. Paul, Minnesota: The American Phytopathological Society . pág. 22. ISBN 978-0-89054-400-6.
- 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Baral, H.-O. (2009): Reacción del yodo en ascomicetos: ¿por qué la solución de Lugol es superior al reactivo de Melzer?
- 1 2 Baral, HO (1987). "Solución de Lugol/IKI versus reactivo de Melzer: hemiamiloidía, una característica universal de la pared del asco" . Mycotaxon . 29 : 399–450 .
- ↑ Kohn, Linda M; Korf, Richard Paul (1975). "Variación en las reacciones de yodo de ascomicetos: exploración del pretratamiento con KOH" . Mycotaxon . 3 (1): 165– 172. doi : 10.5962/p.413972 .
- ↑ Nannfeldt, John Axel (1976). "Reacciones del yodo en tapones de asco y su significado taxonómico". Transactions of the British Mycological Society . 67 (2): 283– 287. doi : 10.1016/S0007-1536(76)80135-0 .
- ↑ Leonard, Lawrence M (2006). "¿Melzer, Lugol o yodo para la identificación de Agaricales de esporas blancas?" (PDF) . McIlvainea . 16 (1): 43– 51 – vía FUNGI Magazine.
- 1 2 Baral, H.-O. (1987): Solución de Lugol / IKI versus reactivo de Melzer: hemiamiloidía, una característica universal de la pared del asco. Mycotaxon 29: 399-450
- ↑ Rossman, AY 1980. La reacción del yodo: Melzer vs. IKI. Boletín de la MSA 31:22.
- ↑ Kohn, LM y RP Korf. 1975. Variación en las reacciones de yodo de ascomicetos: exploración del pretratamiento con KOH. Mycotaxon 3: 165-172
- ↑ Baral, HO (1992). "Taxonomía vital versus taxonomía de herbario: diferencias morfológicas entre células vivas y muertas de ascomicetos y sus implicaciones taxonómicas" . Mycotaxon . 44 (2): 333–390 . doi : 10.5962/p.416290 . ISSN 2154-8889 .
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