Tinción de ácido peryódico-Schiff

El ácido peryódico de Schiff ( PAS ) es un método de tinción utilizado para detectar polisacáridos como el glucógeno y mucosustancias como las glicoproteínas , los glicolípidos y las mucinas en los tejidos. La reacción del ácido peryódico oxida los dioles vecinales en estos azúcares , generalmente rompiendo el enlace entre dos carbonos adyacentes no involucrados en el enlace glucosídico o el cierre del anillo en el anillo de las unidades de monosacáridos que son partes de los polisacáridos largos, y creando un par de aldehídos en las dos puntas libres de cada anillo de monosacárido roto . La condición de oxidación tiene que estar suficientemente regulada para no oxidar más los aldehídos. Estos aldehídos luego reaccionan con el reactivo de Schiff para dar un color púrpura-magenta. A menudo se utiliza una tinción básica adecuada como contratinción .

• La tinción de PAS diastasa (PAS-D) es una tinción de PAS que se utiliza en combinación con la diastasa , una enzima que descompone el glucógeno.

• Azul alcián/ácido peryódico–Schiff (AB/PAS o AB-PAS) utiliza azul alcián antes del paso PAS.

La tinción PAS se utiliza principalmente para teñir estructuras que contienen una alta proporción de macromoléculas de carbohidratos ( glucógeno , glicoproteína , proteoglicanos ), que normalmente se encuentran, por ejemplo, en los tejidos conectivos , el moco , el glicocáliz y las láminas basales .

La tinción de PAS se puede utilizar para ayudar en el diagnóstico de varias afecciones médicas:

• Enfermedad de almacenamiento de glucógeno (versus otros trastornos de almacenamiento).
• Adenocarcinomas , que a menudo secretan mucinas neutras.
• Enfermedad de Paget de la mama . ^[1]
• Sarcoma de partes blandas alveolares . ^[2]
• Tinción de macrófagos en la enfermedad de Whipple . ^[3]
• Se puede utilizar para diagnosticar la deficiencia de α1-antitripsina si los hepatocitos hepáticos periportales se tiñen de forma positiva.
• En la micosis fungoide y el síndrome de Sézary se encuentran agregados de linfocitos PAS positivos en la epidermis , llamados microabscesos de Pautrier.
• Sarcoma de Ewing
• Eritroleucemia , una leucemia de glóbulos rojos inmaduros. Estas células se tiñen de un color fucsia brillante.
• Proteinosis alveolar pulmonar .
• Infección por hongos : las paredes celulares de los hongos se tiñen de color magenta; esto solo funciona en hongos vivos. ^{[ cita requerida ]} Por el contrario, la tinción de plata con metenamina de Grocott (GMS) tiñe tanto organismos fúngicos vivos como muertos.
• Se utiliza para identificar glucógeno en muestras de biopsia pulmonar de bebés con glucogenosis intersticial pulmonar (GPI).
• Se puede utilizar para resaltar inclusiones de lípidos súper reticulados en la lipofuscinosis ceroidea (NCL).

La presencia de glucógeno se puede confirmar en una sección de tejido mediante la digestión con diastasa del glucógeno de una sección y luego comparar una sección de PAS digerida con diastasa con una sección de PAS normal. El portaobjetos negativo a la diastasa mostrará una tinción magenta donde haya glucógeno dentro de una sección de tejido. El portaobjetos que haya sido tratado con diastasa no tendrá tinción positiva a PAS en esas ubicaciones del portaobjetos.

La tinción PAS también se utiliza para teñir celulosa . Un ejemplo sería la búsqueda de dispositivos médicos implantados compuestos de celulosa no oxidada.

Si la tinción PAS se realizará en tejido, el fijador recomendado es formalina tamponada neutra al 10 % o solución de Bouin . Para frotis de sangre , el fijador recomendado es metanol . No se recomienda el glutaraldehído porque puede haber grupos aldehído libres disponibles para reaccionar con el reactivo de Schiff , lo que puede dar lugar a una tinción con falsos positivos . ^[4]

• Reacción PAS