Tinción con ácido peryódico de Schiff

La tinción con ácido peryódico-Schiff ( PAS ) es un método de tinción utilizado para detectar polisacáridos (como el glucógeno ) y mucosustancias (como glicoproteínas , glicolípidos y mucinas) en los tejidos. La reacción del ácido peryódico oxida los dioles vecinales en estos azúcares , generalmente rompiendo el enlace entre dos carbonos adyacentes que no participan en el enlace glucosídico o el cierre del anillo en el anillo de unidades de monosacáridos que forman parte de los polisacáridos largos y creando un par de aldehídos en los dos extremos libres de cada anillo de monosacárido roto . Las condiciones de oxidación deben estar suficientemente reguladas para no oxidar aún más los aldehídos. Estos aldehídos reaccionan luego con el reactivo de Schiff para dar un color púrpura-magenta. A menudo se utiliza una tinción básica adecuada como contratinción .

• La tinción PAS con diastasa (PAS-D) es una tinción PAS que se utiliza en combinación con diastasa , una enzima que descompone el glucógeno.

• El método azul alciano/ácido periódico-Schiff (AB/PAS o AB-PAS) utiliza azul alciano antes del paso de PAS.

La tinción PAS se utiliza principalmente para teñir estructuras que contienen una alta proporción de macromoléculas de carbohidratos ( glucógeno , glicoproteínas , proteoglicanos ), que se encuentran típicamente en, por ejemplo, tejidos conectivos , moco , el glicocálix y láminas basales .

La tinción PAS puede utilizarse para ayudar en el diagnóstico de diversas afecciones médicas:

• Enfermedad por almacenamiento de glucógeno (frente a otros trastornos de almacenamiento).
• Adenocarcinomas , que a menudo secretan mucinas neutras.
• Enfermedad de Paget de la mama . ^{[ 1 ]}
• Sarcoma de partes blandas alveolar . ^{[ 2 ]}
• Tinción de macrófagos en la enfermedad de Whipple . ^{[ 3 ]}
• Puede utilizarse para diagnosticar la deficiencia de α1-antitripsina si los hepatocitos periportales del hígado presentan tinción positiva.
• En la micosis fungoide y el síndrome de Sézary , se observan agregados de linfocitos PAS-positivos en la epidermis , denominados microabscesos de Pautrier.
• sarcoma de Ewing
• La eritroleucemia es una leucemia de glóbulos rojos inmaduros. Estas células se tiñen de un color fucsia brillante.
• Proteinosis alveolar pulmonar .
• En las infecciones por hongos , las paredes celulares se tiñen de magenta; sin embargo, este método solo funciona con hongos vivos. En cambio, la tinción de plata metenamina de Grocott (GMS) tiñe tanto los hongos vivos como los muertos.
• Se utiliza para identificar el glucógeno en muestras de biopsia pulmonar de lactantes con glucogenosis intersticial pulmonar (GIP).
• Puede utilizarse para resaltar las inclusiones de lípidos superreticulados en la lipofuscinosis ceroidea (NCL).

La presencia de glucógeno se puede confirmar en una sección de tejido utilizando diastasa para digerir el glucógeno de la sección y luego comparando una sección PAS digerida con diastasa con una sección PAS normal. La lámina negativa para diastasa mostrará una tinción magenta donde haya glucógeno dentro de la sección de tejido. La lámina tratada con diastasa no mostrará tinción PAS positiva en esas ubicaciones.

La tinción PAS también se utiliza para teñir la celulosa . Un ejemplo sería la búsqueda de dispositivos médicos implantados compuestos de celulosa no oxidada.

Si la tinción PAS se realiza en tejido, el fijador recomendado es formalina neutra tamponada al 10 % o solución de Bouin . Para frotis de sangre , el fijador recomendado es metanol . No se recomienda el glutaraldehído porque los grupos aldehído libres pueden reaccionar con el reactivo de Schiff , lo que puede dar lugar a una tinción falsamente positiva . ^{[ 4 ]}

• Reacción PAS