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Perlecan

Perlecano [ 5 ] (PLC), también conocido como proteína central del proteoglicano de sulfato de heparano específico de la membrana basal (HSPG) o proteoglicano de sulfato de hepar...

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Perlecano [ 5 ] (PLC), también conocido como proteína central del proteoglicano de sulfato de heparano específico de la membrana basal (HSPG) o proteoglicano de sulfato de heparano 2 ( HSPG2 ), es una proteína que en humanos está codificada por el gen HSPG2 . [ 6 ] [ 7 ] [ 8 ] [ 9 ] El gen HSPG2 codifica una proteína de 4391 aminoácidos con un peso molecular de 468 829. Es una de las proteínas más grandes conocidas. El nombre perlecano proviene de su apariencia como un "collar de perlas" en imágenes sombreadas rotatoriamente.

El perlecano se aisló originalmente de una línea celular tumoral y se demostró su presencia en todas las membranas basales nativas. [ 10 ] El perlecano es un proteoglicano grande multidominio (cinco dominios, etiquetados como IV) [ 5 ] que se une y entrecruza muchos componentes de la matriz extracelular (MEC) y moléculas de la superficie celular . [ 11 ] El perlecano es sintetizado tanto por células endoteliales vasculares como por células musculares lisas y se deposita en la matriz extracelular de los parahoxozoos . [ 12 ] El perlecano está altamente conservado entre especies y los datos disponibles indican que ha evolucionado a partir de ancestros antiguos mediante duplicación génica y recombinación de exones . [ 11 ]

Estructura

El perlecano consta de una proteína central de peso molecular 469 kDa a la que se unen tres cadenas largas (cada una de aproximadamente 70-100 kDa) de glicosaminoglicanos (a menudo heparán sulfato , HS, pero puede ser condroitín sulfato , CS). La proteína central consta de cinco dominios estructurales distintos . El dominio N-terminal I ( aa ~1-195) contiene sitios de unión para cadenas de HS. [ 13 ] Aunque las cadenas de HS no son necesarias para el correcto plegamiento y secreción de la proteína, la falta de HS o la disminución de la sulfatación pueden disminuir la capacidad del perlecano para interactuar con las proteínas de la matriz . La eliminación de las cadenas de HS puede afectar la organización de la matriz y la función de la barrera endotelial . El dominio II comprende cuatro repeticiones homólogas a la porción de unión al ligando del receptor de LDL con seis residuos de cisteína conservados y un pentapéptido, DGSDE, que media la unión del ligando por el receptor de LDL. El dominio III tiene homología con el dominio IVa y IVb de la laminina . El dominio IV consta de una serie de módulos IG . La estructura de solo la tercera repetición similar a inmunoglobulina (IG) en el dominio IV se muestra en la figura etiquetada como "HSPG2". El dominio V C-terminal , que tiene homología con el dominio G del brazo largo de la laminina , es responsable del autoensamblaje y puede ser importante para la formación de la membrana basal in vivo . El dominio V también tiene sitios de unión para cadenas HS/CS. [ 14 ] Por lo tanto, la proteína central de perlecano y las cadenas HS podrían modular el ensamblaje de la matriz, la proliferación celular , la unión de lipoproteínas y la adhesión celular .

Función

El perlecano es un componente clave de la matriz extracelular del cartílago [ 15 ] donde es esencial para el desarrollo normal de la placa de crecimiento y el crecimiento de los huesos largos . [ 16 ] [ 17 ] El enanismo exhibido por el ratón nulo de perlecano se asemeja al fenotipo producido por mutaciones activadoras en el gen para FGFR3 , [ 18 ] un receptor para factores de crecimiento de fibroblastos . El perlecano se une a factores de crecimiento involucrados en el desarrollo de la placa de crecimiento. Se ha demostrado que el perlecano aislado de placas de crecimiento en desarrollo se une a FGF-2 a través de sus cadenas laterales de heparán sulfato, [ 19 ] y a FGF-18 a través del dominio III de su proteína central [ 20 ] y media su acción en los receptores de FGF. Es probable que el perlecano juegue un papel crítico en el secuestro y/o suministro de FGF-2 y FGF-18 durante la osificación endocondral .  

El perlecano es un componente clave de la matriz extracelular vascular, donde interactúa con diversos componentes y contribuye a mantener la función de barrera endotelial. Es un potente inhibidor de la proliferación de células musculares lisas, por lo que se cree que ayuda a mantener la homeostasis vascular . Además, el perlecano puede promover la actividad de factores de crecimiento (p. ej., FGF-2 ) y, por consiguiente, estimular el crecimiento y la regeneración endotelial.   

Modificación de las cadenas de glicosaminoglicanos

Las modificaciones de las cadenas de heparán sulfato en los dominios C- y N-terminales constituyen las diferencias mejor estudiadas en la vía secretora del perlecano. El heparán sulfato puede sustituirse por condroitín sulfato, y la incorporación de sulfato o la composición de azúcares de las cadenas pueden variar. La pérdida de enzimas implicadas en la vía sintética del heparán sulfato da lugar a diversas afecciones.

La modificación diferencial de la cadena de heparán sulfato puede ocurrir a través de varias señales reguladoras. El perlecano en la placa de crecimiento de los huesos largos del ratón muestra cambios de glicosilación en la progresión del condrocito desde la zona de reposo a la zona de proliferación. [ 21 ] Aunque inicialmente se pensó que las cadenas de glicosaminoglicanos (GAG) del perlecano eran exclusivamente de heparán sulfato, [ 10 ] las cadenas de condroitín sulfato pueden ser sustituidas [ 13 ] y esto puede depender del tipo de célula. Al expresar una forma recombinante del dominio N-terminal I de la proteína y demostrar que la digestión del péptido con heparanasa o condroitinasa no condujo a la pérdida completa de la actividad del péptido, se demostró que se pueden agregar cadenas de condroitín sulfato al perlecano humano. [ 22 ] Esto coincidió con datos previos que mostraban cadenas de GAG ​​de sulfato de condroitina unidas al perlecano bovino producido por condrocitos [ 15 ] y que la proteína recombinante del dominio I humano estaba glicosilada con cadenas de sulfato de heparano y de condroitina cuando se expresaba en células de ovario de hámster chino. [ 23 ] La adición preferencial de cadenas de sulfato de heparano o de sulfato de condroitina a los dominios I y V podría tener un efecto en la diferenciación de los tejidos mesenquimales en cartílago, hueso o cualquier número de tejidos, pero el mecanismo regulador del cambio de la adición de sulfato de heparano a sulfato de condroitina no se comprende bien.

Mientras se estudiaba el efecto de la composición de proteoglicanos en la permselectividad nefrítica , se observó que el tratamiento con puromicina de células endoteliales glomerulares humanas (HGEC) alteraba el nivel de sulfatación de las cadenas de GAG ​​en proteoglicanos como el perlecano, lo que a su vez causaba una disminución en la estabilidad de las cadenas de GAG. Los niveles de ARNm de la proteína central de los proteoglicanos no se vieron afectados, por lo que la disminución de las cadenas de GAG ​​fue resultado de algún otro factor, que en este caso resultó ser una disminución en la expresión de las enzimas sulfato transferasa , que desempeñan un papel clave en la biosíntesis de GAG. [ 24 ] Parece que puede haber cierta superposición en las enfermedades derivadas de la pérdida de la expresión de proteoglicanos de heparán sulfato y la pérdida de enzimas involucradas en la biosíntesis de heparán sulfato.

Degradación

Las células pueden modificar su matriz extracelular y membranas basales en respuesta a señales o estrés. Proteasas específicas actúan sobre las proteínas del entorno extracelular cuando las células necesitan moverse o cambiar su entorno. La catepsina S es una proteasa de cisteína que atenúa moderadamente la unión de células FGF-positivas a un sustrato perlecano-positivo. La catepsina S es una proteasa potencial que actúa sobre la proteína central del perlecano en la membrana basal o el estroma. [ 25 ]

Las cadenas de heparán sulfato del perlecano se unen a factores de crecimiento en la MEC y actúan como coligandos o potenciadores de ligandos cuando se unen a receptores. Otro estudio demostró que la liberación de FGF básico unido a HS en cultivo se podía lograr mediante el tratamiento con estromelisina, heparitinasa I, colagenasa de rata y plasmina , [ 26 ] y estos sitios de proteólisis se ilustran en la figura 1. Esta se propuso como una lista no exhaustiva de las proteasas que podrían mediar la liberación de factores de crecimiento de las cadenas de heparán sulfato del perlecano. Aunque Whitelock et al. sugirieron que existen secuencias consenso de escisión de trombina en la proteína central del perlecano, también postulan que cualquier activación de perlecano por trombina proviene en realidad de la escisión de otros constituyentes de la MEC. Este artículo afirma que la heparanasa es responsable de la escisión de las cadenas de heparán sulfato del perlecano en la matriz. Esto libera factores de crecimiento unidos al heparán sulfato, específicamente FGF-10 . La adición de heparanasa al cultivo celular de epitelios en membrana basal provocó un aumento en la proliferación de células epiteliales debido a la liberación de FGF-10. [ 27 ]

En un modelo de crecimiento de explantes in vitro utilizando epitelio corneal , la expresión de la metaloproteinasa de matriz (MMP) 2 se correlaciona con una degradación inicial de la membrana basal original. La reformación de la membrana basal en cultivo dependió de una regulación positiva inicial seguida de una regulación negativa de MMP-9, en contraste con la expresión constante de MMP-2. Esto no es evidencia de que MMP-2 y MMP-9 escindan directamente la proteína perlecano in vivo, pero muestra que las proteínas modulan claramente algún factor en la maduración de la membrana basal. [ 28 ] Otra familia de metaloproteasas, la familia de la proteína morfogenética ósea 1/similar a Tolloid, libera el dominio endorepelina C-terminal de la proteína central perlecano. El dominio globular similar a la laminina contiene el motivo activo de la endorepelina y no puede ser escindido por células que expresan formas mutantes e inactivas de las proteínas BMP-1. Además, el residuo crítico necesario para que se produzca esta escisión se localizó en Asp4197. [ 29 ] Este proceso proteolítico puede tener importancia en enfermedades, ya que se encontró un fragmento correspondiente en la orina de pacientes con insuficiencia renal terminal [ 30 ] y en el líquido amniótico de mujeres embarazadas que sufrieron rotura prematura de membranas. [ 31 ]

Expresión

Expresión durante el desarrollo

La cronología de la expresión génica durante el desarrollo varía según el tejido. Las membranas basales suelen ser el factor determinante en la separación de los epitelios del estroma y el tejido conectivo. El perlecano es de particular importancia en el desarrollo cardiovascular, neural y cartilaginoso.

El desarrollo del blastocisto preimplantacional es una cascada controlada de regulación genética y señalización intercelular. Se ha observado perlecano extracelular en la etapa de blastocisto del desarrollo embrionario del ratón, específicamente regulado positivamente en el punto en que el embrión alcanza la "competencia de adhesión". [ 32 ] Este hallazgo se confirmó tanto a nivel de ARNm como de proteína, demostrado por RT-PCR e inmunotinción. El desarrollo embrionario posterior está regulado con la misma precisión que el desarrollo preimplantacional, y es más complejo debido a la diferenciación de todos los tejidos. El primer estudio de la expresión de perlecano durante el desarrollo embrionario encontró que la proteína se expresaba por primera vez durante el desarrollo del sistema cardiovascular, y posteriormente se correlaciona con la maduración de la mayoría de los tejidos del cuerpo, es decir, la separación de las capas epiteliales del endotelio y el estroma por las membranas basales. [ 33 ] Nuevamente, esta regulación positiva durante el desarrollo cardiovascular es concomitante con el papel del extremo C-terminal del perlecano como endorepelina.

La especificidad espaciotemporal en la transactivación del gen perlecano durante el desarrollo es clave para la maduración de las membranas basales y, por lo tanto, para la separación completa de epitelios de endotelios y estroma. Un estudio exhaustivo de la expresión de perlecano durante el desarrollo del embrión de pollo ha demostrado que el perlecano está presente en la etapa de mórula y durante el resto del desarrollo, aunque la expresión puede ser transitoria y estar programada con precisión en ciertos precursores tisulares. [ 34 ] En el embrión de rata, se ha demostrado que la expresión de perlecano aumenta en las células musculares lisas vasculares (CMLV) después del día embrionario 19 (e19) en el desarrollo fetal. Esto se correlaciona perfectamente con el cese de la proliferación de las CMLV en el día embrionario 18 (e18) y un cambio en su fenotipo. La teoría planteada en este estudio es que el perlecano desempeña un papel antiproliferativo para las CMLV una vez que se alcanza un cierto punto del desarrollo, de manera similar a la expresión de perlecano dependiente de la confluencia en cultivo. [ 35 ] Estos hallazgos fueron corroborados por resultados similares de estudios de epitelio de arteria pulmonar y pulmón de rata. También se encontró que estos tejidos comenzaban la producción de perlecano una vez que la división celular había cesado, alrededor del día fetal 19. [ 36 ]

El desarrollo del sistema nervioso y la extensión de los axones están dirigidos con precisión por señales de las moléculas de la matriz extracelular. El crecimiento de las neuritas olfativas en el desarrollo del ratón está guiado, al menos en parte, por una matriz extracelular depositada por las células epiteliales olfativas (CEO). El perlecano y la laminina-1 parecen ser importantes en esta vía de guía, aunque la inducción del perlecano ocurre ligeramente más tarde que la de la laminina-1. [ 37 ] Estos datos están respaldados por datos anteriores que muestran que las CEO expresan FGF-1 durante el desarrollo olfativo, y que el perlecano puede estimular el crecimiento de las neuritas sensoriales olfativas en cultivo en presencia de FGF-1. [ 38 ] El perlecano también mostró propiedades adhesivas nerviosas en un estudio previo, lo que sugiere además que puede actuar en un papel atractivo en combinación con la laminina en lugar de uno repulsivo. [ 39 ]

El desarrollo del cartílago y el hueso ha demostrado depender de la expresión de perlecano. [ 16 ] La proteína se vuelve visible por inmunotinción en el día 15 durante el desarrollo del ratón, independientemente de otras proteínas de la membrana basal, lo que sugiere que es simplemente una parte de la ECM de los condrocitos en desarrollo, además del colágeno II y otros marcadores de cartílago que se expresan a partir del día 12. [ 40 ] Tomando en cuenta los datos, [ 41 ] que los ratones que carecen del gen pln no pueden mantener un cartílago estable, es evidente que el perlecano es esencial para la maduración y estabilidad de la estructura cartilaginosa. Esto está respaldado por un estudio que muestra que la reducción de la producción de perlecano inhibe las etapas finales de la diferenciación condrogénica en fibroblastos C3H10T1/2 en cultivo. [ 42 ] El desarrollo óseo, es decir, la mineralización del tejido cartilaginoso, se correlaciona con la pérdida de perlecano y heparán sulfato en la unión condroósea (UCO). [ 43 ] [ 44 ] En un esfuerzo por comprender cómo el heparán sulfato y el perlecano dirigen las células madre mesenquimales hacia la vía osteogénica, se trataron células madre mesenquimales humanas con heparanasa y condroitinasa en cultivo. Esto condujo a un aumento de la mineralización y la expresión de marcadores de osteocitos, lo que respalda los datos que muestran que la pérdida de heparán sulfato en la unión osteocondral es un factor clave en la osteogénesis. [ 45 ] Se cree que la fuerza impulsora detrás de la activación de la osteogénesis por heparanasa y condroitinasa es la liberación de la proteína morfogenética ósea unida a las cadenas de heparán sulfato.

modelos animales

La supresión de la perlecana en embriones de pez cebra se logró mediante el uso de morfolinos dirigidos al transcrito de perlecana. Los morfolinos se utilizaron para bloquear la traducción del ARNm de perlecana en embriones de pez cebra, como parte de una investigación sobre la función de la perlecana en el desarrollo esquelético y vascular. El morfolino se dirige a la región no traducida 5' del ARNm de perlecana, bloqueando así la traducción del mensaje. [ 46 ] La pérdida de la proteína perlecana en estos peces provocó miopatías graves y problemas circulatorios. Como se demostró en un estudio posterior del mismo laboratorio, este fenotipo pudo revertirse mediante la adición de VEGF-A exógeno. [ 47 ]

La importancia de la perlecana para el desarrollo de los mamíferos se demuestra mediante experimentos de eliminación del gen de la perlecana. [ 16 ] [ 41 ] Casi la mitad de todos los ratones en los que se ha eliminado el gen de la perlecana (ratones nulos para la perlecana) mueren en el día embrionario 10.5, cuando el gen de la perlecana normalmente comienza a expresarse. [ 48 ] Otros mueren justo después del nacimiento con defectos graves como la formación anormal de la membrana basal , el desarrollo defectuoso de la cefalia y los huesos largos y la acondroplasia . [ 41 ] [ 16 ] La estrategia de eliminación empleada para una de las eliminaciones de la perlecana [ 41 ] [ 40 ] fue una floxación del exón 6 por inserción de un casete de neomicina y la posterior expresión de CRE para la eliminación del exón 6 del genoma. Esto resultó en el fenotipo comprometido del cartílago previamente discutido y la pérdida de la integridad de la membrana basal en una variedad de tejidos. La tasa de mortalidad fetal es alta y los ratones que sobreviven mueren poco después del nacimiento. Se creó un modelo de ratón knockout de perlecano desarrollado por separado mediante la inserción de un casete de neomicina en el exón 7 del gen de perlecano. [ 16 ] Estos ratones knockout también fueron 40% letales embrionariamente, y el resto de los ratones murieron poco después del nacimiento debido a graves anomalías esqueléticas. El fenotipo knockout de perlecano en ambos estudios fue idéntico y similar al fenotipo producido por mutaciones activadoras en el gen para FGFR3, [ 18 ] un receptor para factores de crecimiento de fibroblastos.

En otro modelo de ratón knockout , el gen de perlecano fue mutado por recombinación homóloga del gen endógeno de perlecano con un constructo que contenía brazos de homología de 2 y 5 kb que rodeaban un exón 3 eliminado, [ 49 ] que codifica para 2 de los 3 sitios de unión de heparán sulfato en el dominio I [ 13 ] de perlecano. Sin embargo, el perlecano producido por fibroblastos cultivados de ratones knockout del exón 3 contenía 40% de heparán sulfato y 60% de condroitín sulfato [ 50 ] porque, además del sitio de unión de heparán sulfato que permanece en el dominio I, el sitio de unión en el dominio V [ 14 ] también seguiría presente. El estudio mostró que los ratones knockout del exón 3 tenían colapso de la integridad de la cápsula del cristalino en la semana postnatal 3, lo que indica un papel para los aminoácidos eliminados del dominio I de perlecano en el mantenimiento de la integridad de la membrana basal de la cápsula del cristalino. [ 49 ] Sin embargo, a diferencia de los ratones knock-in de perlecano, la viabilidad y el crecimiento de los huesos largos en los ratones knock-in del exón 3 fueron normales. Esto sugiere que, en el knock-in del exón 3, los sitios de unión restantes para el heparán sulfato en los dominios I y V disponibles para la unión de FGF-2 [ 19 ] o el sitio en el dominio 3 disponible para la unión de FGF-18 [ 20 ] pueden ser suficientes para un crecimiento normal de los huesos largos.

Los cambios en el cristalino en los ratones knock-out del exón 3 son algo similares al modelo de ratón knock-out de TGF-β. [ 51 ] [ 52 ] Los ratones knock-out del exón 3 también mostraron capacidades reducidas de cicatrización de heridas y angiogénesis cuando se les desafió con una lesión epidérmica o la adición de FGF-2 a la córnea. [ 53 ] En el estudio de lesión epidérmica, se creó una herida que abarcaba la profundidad de la epidermis en ratones negativos del exón 3 y ratones de control, y en los ratones knock-out la angiogénesis y los signos distintivos de la cicatrización de heridas se desarrollaron lentamente posiblemente debido a la disminución del secuestro del factor de crecimiento por el perlecano negativo al sulfato de heparano. Se produjo un resultado similar en el ensayo de micropocket corneal, donde se implanta FGF-2 en la córnea de ratones y en ratones normales se induce la angiogénesis. En los ratones knock-out este efecto angiogénico se vio afectado, aunque no completamente.

Se utilizó un constructo de perlecano de longitud completa, bajo el control del promotor de colágeno tipo II, para crear un ratón transgénico de perlecano. [ 54 ] El promotor de colágeno tipo II permitió la expresión de perlecano únicamente en la matriz extracelular producida por condrocitos, pero no en las membranas basales producidas por células endoteliales, epiteliales o musculares. El transgén de perlecano en el ratón nulo para perlecano eliminó la letalidad y restauró el crecimiento de los huesos largos a la normalidad. Esto sugiere que el perlecano desempeña un papel fundamental en el desarrollo del cartílago. Sin embargo, los ratones transgénicos de perlecano mostraron hipertrofia muscular, [ 55 ] lo que indica un papel del perlecano tanto en el desarrollo muscular como en el crecimiento de los huesos largos mediado por la placa de crecimiento del cartílago.

Estudios realizados en ratones con genes inactivados y en enfermedades humanas también han revelado funciones in vivo críticas del perlecano en el desarrollo del cartílago [ 56 ] y en la actividad de la unión neuromuscular. [ 17 ]

Vías de señalización y su efecto en la expresión

Las vías de señalización regulan la transcripción génica, lo que a su vez provoca cambios en el perfil de expresión génica de las células. El efecto final de estas vías se ejerce sobre el promotor de los genes, que puede incluir elementos situados antes o después del sitio de inicio de la transcripción, algunos de los cuales pueden encontrarse dentro del propio gen transcrito. Diversas moléculas de señalización pueden influir en la expresión de perlecano, como el factor de crecimiento transformante beta (TGF-β), la interleucina (IL) y el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF).

Activación transcripcional

Se estudiaron los 2,5 kilobases río arriba de la región promotora de perlecano mediante la activación de CAT en líneas celulares de diversos orígenes histológicos. [ 57 ] Este estudio concluyó que existía un elemento de respuesta a TGF-β en el promotor, a solo 285 pares de bases río arriba del sitio de inicio de la transcripción. Este resultado se ha corroborado en tejidos como células de carcinoma de colon humano. [ 58 ] y epitelio uterino murino [ 59 ] mediante la adición in vitro de la citocina al medio de cultivo celular. Los estudios in vitro de la señalización de TGF-β1 y sus efectos sobre la expresión de perlecano pueden tener resultados variables en diferentes tipos de células. En células de músculo liso coronario humano en cultivo, la señalización de TGF-β1 no mostró ningún efecto sobre la expresión de perlecano, aunque sí reguló positivamente otros constituyentes de la matriz. [ 60 ] La demostración in vivo de la regulación dinámica del perlecano y su control por vías de señalización extracelular es fundamental para nuestra comprensión del papel de la proteína en el desarrollo. Para este fin, se creó una línea de ratones transgénicos que expresaban TGF-β1 porcino bajo el promotor de αA-cristalina específico del cristalino [ 51 ] y luego se creó otra línea similar pero con el gen impulsado por el promotor de βb-cristalina, correspondiente a otro gen específico del cristalino. [ 52 ] Este tejido dinámico del desarrollo mostró una grave desregulación de los componentes de la matriz extracelular, incluido el perlecano, con sobreexpresión de TGF-β1. La opacificación corneal ocurrió en ambas líneas transgénicas al inicio del desarrollo debido a un aumento considerable en la expresión de perlecano, fibronectina y trombospondina-1 en el mesénquima corneal. El efecto fue más pronunciado en la línea impulsada por el promotor de βB-1 Cristalina.

La familia de citocinas inflamatorias IL también regula positivamente el transcrito pln. En un modelo murino de formación de placas de Alzheimer, la IL-1 alfa produce un aumento en la expresión de perlecano en respuesta a una lesión cerebral. [ 61 ] El tratamiento de fibroblastos gingivales humanos en cultivo con IL-4 condujo a una mayor producción de varios proteoglicanos de heparán sulfato, incluido el perlecano. [ 62 ] El tratamiento de fibroblastos pulmonares humanos in vitro con IL-1 beta no produjo ningún aumento significativo en la producción de perlecano. [ 63 ]

Otra vía de señalización que aumenta la transcripción de pln es la vía del VEGF. El tratamiento con VEGF165 de células endoteliales microvasculares cerebrales humanas en cultivo estimula un aumento de la transcripción de pln. Esta molécula es un ligando del receptor 2 del VEGF (VGFR2), y parece que esta respuesta al VEGF165 es específica para la regulación positiva del perlecano, lo que conduce a un bucle de retroalimentación positiva que involucra al factor de crecimiento fibroblástico (FGF), al receptor del FGF (FGFR) y al VEGFR2 en respuesta al daño endotelial. Esta regulación microvascular específica por VEGF165 plantea la posibilidad de que la función anticoagulante del perlecano forme parte del proceso de control del daño en el endotelio cerebral. [ 64 ]

Se presume que la señalización de la proteína quinasa C es responsable de la regulación positiva de la transcripción y traducción de ciertos proteoglicanos, incluido el perlecano. Cuando la vía endocítica de las células HeLa se inhibe por la sobreexpresión de una dinamina mutante, la proteína quinasa C se activa y, posteriormente, aumentan el ARNm y la proteína del perlecano. [ 65 ] Por el contrario, la regulación negativa habitual del perlecano en respuesta a la hiperglucemia se pierde en ratones negativos para PKC-α. [ 66 ]

Regulación negativa transcripcional

La señalización del interferón-γ media la represión transcripcional del gen de la perlecana. [ 67 ] Esto se demostró por primera vez en líneas celulares de cáncer de colon y, posteriormente, en líneas celulares de otros orígenes tisulares, pero en cada caso se requirió el factor de transcripción STAT1 intacto para que la señal tuviera efecto. Esto llevó a los investigadores a creer que el factor de transcripción STAT1 estaba interactuando con el promotor de Pln en la región distal, localizada a 660 pares de bases corriente arriba del sitio de inicio de la transcripción. [ 67 ] El tratamiento con interferón-γ de embriones murinos en etapa de blastocisto conduce a una pérdida de la expresión de perlecana en el trofectodermo y, por lo tanto, a una morfología y fenotipo embrionarios en el cultivo celular, lo que sugiere que estos blastocistos tratados con interferón-γ serían defectuosos en la implantación. [ 68 ] Presumiblemente, la pérdida de la expresión de perlecana proviene de la regulación negativa de la transcripción a través de la actividad del factor de transcripción STAT1 como se mostró anteriormente. Estos resultados in vitro no representan necesariamente las concentraciones fisiológicas normales de interferón-γ, ni tampoco la expresión de esta citocina es generalizada, sino que se produce en momentos muy específicos del desarrollo. Es importante destacar que la expresión de perlecano puede disminuir con el tratamiento con una citocina exógena como el interferón-γ, y un aumento fisiológicamente anormal en la expresión de esta citocina podría interferir con la implantación.

Factores de estrés celular y su efecto en la expresión

El estrés mecánico y químico puede dañar las membranas basales o las células que estas sostienen. Esto podría influir en el perfil de expresión génica de las células, especialmente en su matriz extracelular, que suele proporcionar soporte físico y una barrera química. Se ha estudiado la relación entre la hipoxia, la inflamación y el estrés mecánico y químico con la expresión de perlecano.

La hipoxia es una condición que se encuentra en estados patológicos y durante lesiones, y a menudo resulta en una falta de proliferación de células endoteliales. Esto, junto con el papel del perlecano como endorepelina, impulsó un estudio sobre la naturaleza de la regulación de la expresión del perlecano por las células endoteliales durante condiciones hipóxicas. [ 69 ] En condiciones hipóxicas, este estudio encontró que la expresión de perlecano por las células endoteliales microvasculares cardíacas de rata disminuyó un sesenta y uno por ciento en comparación con los controles normales. La afirmación de este artículo es que la regulación negativa del perlecano conduce a una pérdida de la activación de FAK y, por lo tanto, a una menor señalización de ERK, lo que lleva a una disminución de la proliferación celular. Parece contraintuitivo que las células endoteliales proliferen más rápidamente debido a la pérdida de perlecano y su subunidad endorepelina. Podría ser que estas células endoteliales simplemente regularan negativamente la transcripción de muchos genes en respuesta a las condiciones hipóxicas. En otro estudio, la hipoxia condujo a la inducción de genes asociados con la apoptosis y la muerte celular, pero la represión de genes no se limitó a proteínas asociadas con una vía específica. [ 70 ] Cuando las células epiteliales intestinales T84 se exponen a condiciones hipóxicas durante 24 horas, se produce un aumento significativo en la producción de ARNm y proteína de perlecano. [ 71 ] Relacionan esto con el hecho de que muchos genes elevados en respuesta a la hipoxia contienen un elemento de respuesta a cAMP (CRE) en su promotor, como pln. Esta diferencia entre las células endoteliales del estudio de 2007 y la célula epitelial estudiada en estos experimentos es indicativa de cuán variados pueden ser los mecanismos reguladores del perlecano en diferentes tipos de células.

El desarrollo de placas beta-amiloides en el cerebro se asocia con el inicio de la enfermedad de Alzheimer. Estas placas inducen un estado constante de inflamación en las áreas de acumulación, lo que lleva a la expresión de ciertos productos genéticos relacionados con la inflamación, algunos de los cuales perpetúan la inflamación en el contexto cerebral. Como se mencionó anteriormente, para investigar el efecto de la inflamación cerebral en los niveles de expresión de perlecano, se crearon heridas punzantes con agujas en cerebros de ratones y, después de la inflamación y períodos variables de recuperación, se evaluaron los niveles de ARNm y proteína mediante hibridación in situ e inmunotinción. Los niveles de perlecano aumentaron en el hipocampo pero no en el cuerpo estriado durante el período de curación, junto con la expresión de IL 1-alfa. [ 61 ] La expresión de perlecano se rastreó a las células microgliales en el hipocampo y a los astrocitos. Este papel del perlecano en la generación de placas beta-amiloides está respaldado por un estudio anterior que mostró que el tratamiento de cerebros de ratas con perlecano y beta-amiloide condujo a la formación de placas seniles, mientras que el tratamiento con beta-amiloide solo no tuvo el mismo efecto. [ 72 ]

A nivel orgánico, el estrés mecánico tiene un profundo impacto en la integridad de la matriz extracelular y probablemente causa la inducción de varios genes de la MCE para la reparación y remodelación de la MCE en el estroma tisular y las membranas basales. Un estudio examinó los efectos in vitro de la presión sobre la transcripción génica global utilizando un enfoque de microarrays y un sistema de estiramiento celular diseñado para simular la presión intraocular en la lámina cribosa (tejido conectivo) de la cabeza del nervio óptico. Sus hallazgos fueron que el perlecano y varios otros proteoglicanos se regularon positivamente en respuesta al estímulo de estiramiento. TGF-β2 y VEGF también se indujeron, posiblemente contribuyendo a la regulación positiva del transcrito y la proteína perlecano. [ 73 ] Se ha demostrado que la señalización autocrina de TGF-β es un resultado compensatorio del estrés mecánico in vitro en células endoteliales. Utilizando un mecanismo de estiramiento celular similar para imitar la presión arterial, esta investigación mostró que la producción de perlecano aumentó en respuesta a la tensión mecánica. Esto depende de la señalización autocrina de TGF-β en un bucle de retroalimentación positiva con p38 y ERK. [ 74 ] Este aumento de la producción de inhibidores del crecimiento de VSMC (es decir, heparina) en las células endoteliales se revierte en VSMC, donde el estrés mecánico induce proliferación. [ 75 ] La deformación de las células VSMC en cultivo conduce a la regulación positiva de perlecano, con un aumento significativo en la sulfatación de las cadenas de heparán sulfato. [ 76 ] Esto no está en contraste con los datos mostrados donde la expresión de perlecano es constante más allá de e19 en VSMC de rata, lo que sugirió que el perlecano juega un papel antiproliferativo para VSMC. En este caso, parece que la función de señalización de la molécula es el factor operativo regulado positivamente, especialmente debido al aumento en la sulfatación de las cadenas de heparán sulfato.

El daño químico a los órganos puede afectar no solo la integridad genética y mecánica de la célula, sino también la matriz extracelular del tejido. Para estudiar el efecto del daño químico en las células hepáticas, se trató a ratas Wistar con tetracloruro de carbono durante 48 horas antes del sacrificio. Antes del tratamiento con CCl₄ , la tinción de perlecano se limitaba al conducto biliar y a los vasos sanguíneos sinusoidales del hígado. Después del tratamiento, la tinción de perlecano fue intensa en las áreas de necrosis. Esto podría deberse al aumento de la capilarización del hígado como intento de regenerar el tejido dañado. [ 77 ] Se observó un hallazgo similar en el tratamiento con acetamenofina de ratones, donde el perlecano y otros componentes de la matriz se expresaron intensamente en las lesiones necróticas del hígado. [ 78 ]

Expresión en cultivos celulares

Uno de los argumentos más contundentes contra la validez de los resultados in vitro de cultivos celulares en placas de plástico 2D es que el entorno no refleja con precisión el de las células en el organismo. Este problema se está abordando mediante el desarrollo de cultivos celulares 3D que utilizan una amplia variedad de sustratos como andamios o entornos para las células. En este tipo de entorno, la expresión de los genes de la matriz extracelular (MEC) tiene el potencial de asemejarse más al perfil de expresión nativo. Los andamios 3D, las estructuras sobre las que crecen las células cultivadas, pueden estar compuestos de otras células (es decir, cocultivos), polímeros sintéticos que imitan el entorno natural de las células o MEC purificada como Matrigel, o cualquier mezcla de estos tres componentes.

Se ha desarrollado un sistema para estudiar el desarrollo de la piel y la formación de la membrana basal entre los queratinocitos y el estroma. [ 79 ] Este sistema se utiliza para delimitar el desarrollo de la membrana basal entre los fibroblastos del estroma (en este caso, fibroblastos en un gel de colágeno tipo I) y los queratinocitos cultivados sobre el gel. La expresión de perlecano y, por lo tanto, la maduración de la membrana basal, dependen de la reticulación de nidógeno del colágeno IV y la cadena γ1 de la laminina en este sistema. [ 80 ] Este efecto también provocó la ausencia de hemidesmosomas en el tejido en desarrollo. Otro sistema, que utiliza un gel de colágeno I hidratado y desorganizado, se ha empleado para demostrar que los fibroblastos corneales humanos primarios invaden el gel y crean una matriz compuesta de colágeno tipo I y perlecano, así como de otras glicoproteínas de la matriz sulfatadas. Esto imita el programa de desarrollo del fibroblasto corneal in vivo y su respuesta a las lesiones. [ 81 ]

Uno de los objetivos a largo plazo de la creación de sistemas de cultivo celular 3D es diseñar tejidos que puedan utilizarse como reemplazos para pacientes con diversos tipos de enfermedades. En válvulas cardíacas diseñadas mediante ingeniería de tejidos, creadas al sembrar miofibroblastos sobre colágeno tipo I seguido de células endoteliales, se ha verificado la expresión de proteoglicanos de heparán sulfato, aunque no se ha establecido distinción entre sindecano y perlecano en estos tejidos. [ 82 ] Otro procedimiento que podría hacerse posible mediante la ingeniería de tejidos es la queratoepitelioplastia. El tejido trasplantado debe permanecer intacto, lo que requiere una membrana basal preformada. Los geles de colágeno han promovido la formación de una membrana basal completa por células epiteliales corneales en cultivo. [ 83 ]

El perlecano también se perfila como un andamio prometedor para el cultivo celular. Se ha logrado cultivar células ductales y acinares de glándulas salivales humanas sobre un péptido bioactivo que contiene una secuencia repetida en el dominio IV de la proteína perlecano. Estas células reproducen estructuras similares a los acinos, parecidas a las que se encuentran en la glándula nativa, y uniones estrechas, además de membranas basales completas en cultivo. [ 84 ]

Asociación de enfermedades

Cáncer

Mientras que la supresión de perlecano causa una inhibición sustancial del crecimiento tumoral y la neovascularización en ratones nulos, en contraste, cuando se inyectan células nulas de perlecano en ratones desnudos se observa un mayor crecimiento tumoral en comparación con los controles. La progresión y la patogénesis del cáncer están íntimamente ligadas a la composición de la matriz extracelular y el papel del perlecano y otras moléculas de la MEC en el cáncer está siendo estudiado por un gran número de laboratorios. Dado que la membrana basal es el primer obstáculo en el camino de las células de carcinoma extravasadas, las funciones del perlecano en este proceso son múltiples. Un sistema modelo utilizado para estudiar la expresión de perlecano en líneas celulares de carcinoma es el de las líneas celulares de progresión metastásica de melanoma MeWo/70W. Las células MeWo son característicamente menos invasivas que su variante clonal, la línea celular 70W. Un laboratorio estudió la expresión de perlecano en 27 melanomas invasivos y 26 de las 27 muestras mostraron un aumento significativo en el ARNm de perlecano en comparación con el tejido normal de los mismos pacientes. Luego, utilizaron las líneas celulares MeWo y 70W para estudiar si la expresión de perlecano cambiaba durante el tratamiento con neurotrofinas, que pueden estimular la invasión celular a través de Matrigel in vitro. Las células 70W, más invasivas, comenzaron a expresar el ARNm de perlecano diez minutos después de la estimulación con las neurotrofinas, y las células MeWo no produjeron ningún ARNm de pln independientemente del tratamiento. Este estudio destacó especialmente que la sobreexpresión de perlecano se produjo incluso antes que la de heparanasa, una proteína esencial implicada en el proceso de extravasación. [ 85 ] [ 86 ]

En el cáncer de ovario, como en otros cánceres, la expresión de perlecano ocurre de manera diferente a lo largo de la progresión de la enfermedad. La tinción de perlecano se pierde en la membrana basal ovárica que ha sido rota por un adenocarcinoma invasivo, lo que contrasta con la tinción de perlecano en las membranas basales de ovarios normales y aquellos con tumores benignos, donde la membrana basal es homogénea y muy similar en composición a la de otros tejidos normales. [ 87 ] Esto es consistente con otros resultados que muestran la pérdida de perlecano en membranas basales afectadas por cáncer de cuello uterino invasivo que se disemina a los ganglios linfáticos pélvicos, lo cual no es sorprendente debido a la correlación de niveles elevados de expresión de ARNm de heparanasa con la invasión de carcinoma cervical similar. [ 88 ] Por el contrario, la formación de tumores de la línea celular epitelial de ratón inmortalizada RT101 inyectada en ratas dependía de la expresión de perlecano por las células de ratón y no de la presencia de perlecano endógeno de rata. Las células RT101 con perlecano silenciado mediante antisentido no mostraron formación de tumores en este sistema; sin embargo, las células que expresaban el perlecano antisentido y un constructo recombinante que codificaba los dominios I, II y III del perlecano de ratón sí mostraron formación de tumores. Por lo tanto, en este sistema parece que la expresión de perlecano en las células tumorales es necesaria para la agregación tumoral. [ 89 ] Sería útil realizar más investigaciones sobre la modificación de la cadena de GAG ​​o de la proteína central por parte de las células tumorales invasivas en comparación con las células tumorales benignas y el tejido normal para comprender mejor el papel del perlecano en la migración del cáncer.

Varios laboratorios han estudiado la angiogénesis de células tumorales in vitro utilizando construcciones antisentido del mensaje de perlecano. El cDNA de complemento inverso de longitud completa, impulsado por un promotor fuerte, se transfecta en varios tipos de células para eliminar la expresión de perlecano. El antisentido en células de carcinoma de colon bloquea la traducción de perlecano, lo que conduce a una disminución del crecimiento tumoral y la angiogénesis. [ 90 ] Una disminución similar de la proliferación in vitro ocurrió en células NIH 3T3 y una línea celular de melanoma humano que expresaba ARNm de perlecano antisentido. [ 91 ] Los hallazgos in vitro con líneas celulares de sarcoma de Kaposi mostraron que la pérdida de perlecano mediante transfección con una construcción antisentido condujo a una disminución de la proliferación y migración de este tipo de célula altamente metastásica. [ 92 ] Estos resultados son en contraste con los resultados in vivo con las mismas líneas de sarcoma de Kaposi, que muestran que la disminución de perlecano conduce a una mayor angiogénesis, lo que facilita la migración y, por lo tanto, se asocia con un aumento en el grado tumoral. [ 92 ] La inhibición antisentido de la perlecana en líneas celulares de fibrosarcoma provocó un aumento del crecimiento y la migración tanto in vitro como in vivo. [ 93 ] Estos hallazgos de mayor tumorigénesis in vivo están respaldados por datos que muestran que el extremo C-terminal de la proteína perlecana actúa como un módulo endostático ahora conocido como endorepelina. [ 46 ] [ 47 ] [ 94 ]

Se creó una construcción de ribozima para su uso en la supresión de los niveles de traducción de perlecano. Esta ribozima se dirigió a una secuencia que codifica el dominio I de la proteína perlecano. Redujo la expresión de perlecano hasta en un 80% en la línea celular de cáncer de próstata C42B. [ 95 ] A diferencia de estudios previamente discutidos, estas células produjeron tumores más pequeños que sus células parentales cuando se inyectaron en ratones atímicos. Se desconoce qué significa esta disparidad en los resultados para la invasión, aunque es cierto que el perlecano es parte de la matriz extracelular en el tejido mesenquimal, y las células que experimentan la transición epitelio-mesenquimal (EMT) pueden regular positivamente la expresión de perlecano como parte de su programación de EMT.

Diabetes y enfermedad cardiovascular

Los niveles de perlecano disminuyen en muchas enfermedades, como la diabetes , la aterosclerosis y la artritis . El perlecano desempeña un papel importante en el mantenimiento de la barrera de filtración glomerular. [ 96 ] La disminución del perlecano en la membrana basal glomerular tiene un papel central en el desarrollo de la albuminuria diabética . La expresión del perlecano se regula negativamente por muchos estímulos aterogénicos, por lo que se cree que el perlecano desempeña un papel protector en la aterosclerosis. [ 97 ] [ 98 ] La diabetes y la aterosclerosis son síndromes frecuentemente asociados. El 80 % de las muertes asociadas a la diabetes implican algún tipo de complicación aterosclerótica, y la membrana basal del endotelio se ha visto implicada en el proceso aterogénico. Se ha demostrado que la síntesis de heparán sulfato disminuye en las arterias de los diabéticos y en las arterias que desarrollan lesiones ateroscleróticas. [ 99 ]

El mecanismo por el cual el heparán sulfato se regulaba negativamente en estas lesiones permaneció desconocido durante algún tiempo. Una teoría afirma que la alta concentración de glucosa en circulación podría conducir a una disminución en la unión de la cadena de GAG ​​al perlecano, pero no necesariamente a un cambio en la vía sintética de las cadenas de GAG ​​o de la proteína central. Después del tratamiento de células endoteliales aórticas humanas con un medio con alta concentración de glucosa, el perlecano secretado contenía menos incorporación de sulfato acompañada de una menor incorporación general de cadenas de GAG. [ 100 ] Aunque no se ha identificado ninguna vía de señalización que conduzca a esta disminución en la incorporación de cadenas de GAG, se sugiere que la pérdida del 30% en la glicosilación general de la proteína podría significar la pérdida de una de las tres cadenas de HS en el perlecano en este modelo de hiperglucemia asociada a la diabetes. También se observa que disminuciones similares en HS extracelular sin un cambio en la tinción de las cadenas de la proteína central ocurren en riñones diabéticos y en células renales en cultivo tratadas con alta concentración de glucosa. [ 101 ] [ 102 ]

La aterosclerosis es la causa más frecuente de la enfermedad coronaria y otras afecciones cardiovasculares, y una gran agregación de proteína perlecano es sintomática de placas ateroscleróticas avanzadas. Las VSMC son las productoras de perlecano en esta condición, lo que significa que gran parte de la investigación se ha centrado en comprender los mecanismos de regulación positiva del perlecano en esta condición. En una prueba del efecto de los ácidos grasos no esterificados circulantes (síntomas de diabetes y aterogénesis) sobre la expresión de perlecano por las VSMC, la expresión no cambió en comparación con las células de control. Esto contrastó con un aumento de 2 a 10 veces en la expresión de otros proteoglicanos de la membrana basal. [ 103 ] La trombina es otro marcador asociado con la aterogénesis y la procoagulación, y regula positivamente de forma selectiva la producción de perlecano, pero no de otros proteoglicanos, en VSMC humanas en cultivo. [ 104 ] Se sugiere que este efecto solo se observa cuando las VSMC alcanzan la confluencia, pero no antes de la confluencia. Este concepto es similar a estudios mencionados anteriormente que muestran que la perlecana solo es producida por las VSMC una vez que han cesado la proliferación durante el desarrollo. [ 35 ] [ 36 ] Otro marcador en la vía aterosclerótica es la angiotensina II, que también regula positivamente la expresión de perlecana en las VSMC en cultivo. [ 105 ] Dada la prominencia de la expresión de perlecana en la aterosclerosis, existe potencial para una terapia basada en la expresión de perlecana y la investigación eventualmente podría avanzar en esa dirección.

Enfermedad genética

Las mutaciones en el gen HSPG2 , que codifica el perlecano, causan displasia dissegmentaria, [ 6 ] tipo Silverman-Handmaker y síndrome de Schwartz-Jampel . [ 9 ]

Interacciones

Se ha demostrado que el perlecano interactúa con

Referencias

  1. 1 2 3 GRCh38: Versión 89 de Ensembl: ENSG00000142798 – Ensembl , mayo de 2017
  2. 1 2 3 GRCm38: Versión 89 de Ensembl: ENSMUSG00000028763 – Ensembl , mayo de 2017
  3. ↑ "Referencia humana de PubMed:" . Centro Nacional de Información Biotecnológica, Biblioteca Nacional de Medicina de EE. UU .
  4. ↑ "Referencia de PubMed sobre el ratón:" . Centro Nacional de Información Biotecnológica, Biblioteca Nacional de Medicina de EE . UU .
  5. 1 2 Noonan DM, Fulle A, Valente P, Cai S, Horigan E, Sasaki M, et al. (diciembre de 1991). "La secuencia completa del perlecano, un proteoglicano de heparán sulfato de la membrana basal, revela una amplia similitud con la cadena A de la laminina, el receptor de lipoproteínas de baja densidad y la molécula de adhesión celular neural" . The Journal of Biological Chemistry . 266 (34): 22939– 22947. doi : 10.1016/S0021-9258(18)54445-8 . PMID 1744087 .  
  6. ^ Arikawa -Hirasawa E, Wilcox WR, Le AH, Silverman N, Govindraj P, Hassell JR, et al. (Abril de 2001). "La displasia disegmentaria, tipo Silverman-Handmaker, está causada por mutaciones nulas funcionales del gen perlecano". Genética de la Naturaleza . 27 (4): 431– 434. doi : 10.1038/86941 . PMID 11279527 . S2CID 22934192 .   
  7. ↑ "Entrez Gene: HSPG2 heparan sulfate proteoglycan 2" .
  8. ↑ Kallunki P, Eddy RL, Byers MG, Kestilä M, Shows TB, Tryggvason K (octubre de 1991). "Clonación de la proteína central del proteoglicano de heparán sulfato humano, asignación del gen (HSPG2) a 1p36.1----p35 e identificación de un polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción BamHI". Genomics . 11 (2): 389– 396. doi : 10.1016/0888-7543(91)90147-7 . PMID 1685141 . 
  9. ^ Arikawa -Hirasawa E, Le AH, Nishino I, Nonaka I, Ho NC, Francomano CA, et al. (mayo de 2002). «Mutaciones estructurales y funcionales del gen perlecano provocan el síndrome de Schwartz-Jampel, con miopatía miotónica y condrodisplasia» . Revista Estadounidense de Genética Humana . 70 (5): 1368–1375.doi : 10.1086 / 340390 . PMC 447613 . PMID 11941538 .   
  10. 1 2 Hassell JR, Robey PG, Barrach HJ, Wilczek J, Rennard SI, Martin GR (agosto de 1980). "Aislamiento de un proteoglicano que contiene heparán sulfato de la membrana basal" . Actas de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos de América . 77 (8): 4494– 4498. Bibcode : 1980PNAS...77.4494H . doi : 10.1073 / pnas.77.8.4494 . PMC 349870. PMID 6449008 .  
  11. 1 2 Iozzo RV (abril de 1994). "Perlecano: una joya de proteoglicano". Matrix Biology . 14 (3): 203– 208. doi : 10.1016/0945-053X(94)90183-X . PMID 7921536 . 
  12. ↑ Aaron L Fidler, Carl E Darris, Sergei V Chetyrkin, Vadim K Pedchenko, Sergei P Boudko, Kyle L Brown, W Gray Jerome, Julie K Hudson, Antonis Rokas, Billy G Hudson (2017) Colágeno IV y membrana basal en los albores evolutivos de los tejidos metazoos eLife 6:e24176 https://doi.org/10.7554/eLife.24176
  13. 1 2 3 Dolan M, Horchar T, Rigatti B, Hassell JR (febrero de 1997). "Identificación de sitios en el dominio I del perlecano que regulan la síntesis de heparán sulfato" . The Journal of Biological Chemistry . 272 ​​(7): 4316– 4322. doi : 10.1074/jbc.272.7.4316 . PMID 9020150 . 
  14. 1 2 Tapanadechopone P, Hassell JR, Rigatti B, Couchman JR (noviembre de 1999). "Localización de sitios de sustitución de glicosaminoglicanos en el dominio V del perlecano de ratón". Biochemical and Biophysical Research Communications . 265 (3): 680– 690. doi : 10.1006/bbrc.1999.1714 . PMID 10600481 . 
  15. 1 2 SundarRaj N, Fite D, Ledbetter S, Chakravarti S, Hassell JR (julio de 1995). "El perlecano es un componente de la matriz del cartílago y promueve la adhesión de los condrocitos" . Journal of Cell Science . 108 (7): 2663– 2672. doi : 10.1242/jcs.108.7.2663 . PMID 7593307 . 
  16. ^ Arikawa -Hirasawa E, Watanabe H, Takami H, Hassell JR, Yamada Y (noviembre de 1999 ) . "El perlecano es fundamental para el cartílago y el desarrollo cefálico". Genética de la Naturaleza . 23 (3): 354– 358. doi : 10.1038/15537 . PMID 10545953 . S2CID 20871336 .  
  17. 1 2 Hassell J, Yamada Y, Arikawa-Hirasawa E (2002). "Papel del perlecano en el desarrollo esquelético y las enfermedades". Glycoconjugate Journal . 19 ( 4– 5): 263– 267. doi : 10.1023/A:1025340215261 . PMID 12975604 . S2CID 6832133 .  
  18. 1 2 Tavormina PL, Shiang R, Thompson LM, Zhu YZ, Wilkin DJ, Lachman RS, et al. (marzo de 1995). "Displasia tanatofórica (tipos I y II) causada por mutaciones distintas en el receptor 3 del factor de crecimiento de fibroblastos". Nature Genetics . 9 (3): 321– 328. doi : 10.1038/ng0395-321 . PMID 7773297 . S2CID 10050610 .   
  19. 1 2 3 Smith SM, West LA, Govindraj P, Zhang X, Ornitz DM, Hassell JR (abril de 2007). "El heparán y el sulfato de condroitina en el perlecano de la placa de crecimiento median la unión y entrega de FGF-2 a los receptores de FGF". Matrix Biology . 26 (3): 175– 184. doi : 10.1016/j.matbio.2006.10.012 . PMID 17169545 . 
  20. 1 2 3 Smith SM, West LA, Hassell JR (diciembre de 2007). "La proteína central del perlecano de la placa de crecimiento se une a FGF-18 y altera su efecto mitogénico en los condrocitos" . Archives of Biochemistry and Biophysics . 468 (2): 244– 251. doi : 10.1016/j.abb.2007.10.006 . PMC 2696159. PMID 17971291 .  
  21. ↑ West L, Govindraj P, Koob TJ, Hassell JR (junio de 2006). "Cambios en el perlecano durante la diferenciación de condrocitos en la placa de crecimiento de la costilla bovina fetal" . Journal of Orthopaedic Research . 24 (6): 1317– 1326. doi : 10.1002/jor.20160 . PMID 16705694. S2CID 2487979 .  
  22. ↑ French MM, Gomes RR, Timpl R, Höök M, Czymmek K, Farach-Carson MC , et al. (enero de 2002). "La actividad condrogénica del proteoglicano de heparán sulfato perlecano se localiza en el dominio N-terminal I" . Journal of Bone and Mineral Research . 17 (1): 48–55 . doi : 10.1359/jbmr.2002.17.1.48 . PMC 1774590. PMID 11771669 .   
  23. ↑ Kokenyesi R, Silbert JE (junio de 1995). "Formación de heparán sulfato o condroitín/dermatán sulfato en el dominio I recombinante de perlecano de ratón expresado en células de ovario de hámster chino". Biochemical and Biophysical Research Communications . 211 (1): 262–267 . doi : 10.1006/bbrc.1995.1805 . PMID 7779094 . 
  24. ↑ Björnson A, Moses J, Ingemansson A, Haraldsson B, Sörensson J (abril de 2005). "Las células endoteliales glomerulares humanas primarias producen proteoglicanos, y la puromicina afecta su modificación postraduccional". American Journal of Physiology. Renal Physiology . 288 (4): F748– F756. doi : 10.1152/ajprenal.00202.2004 . PMID 15585670. S2CID 13731498 .  
  25. ↑ Liuzzo JP, Petanceska SS, Moscatelli D, Devi LA (mayo de 1999). "Los mediadores inflamatorios regulan la catepsina S en macrófagos y microglía: un papel en la atenuación de las interacciones del heparán sulfato" . Molecular Medicine . 5 (5): 320– 333. doi : 10.1007/BF03402068 . PMC 2230418. PMID 10390548 .  
  26. ↑ Whitelock JM, Murdoch AD, Iozzo RV, Underwood PA (abril de 1996). "La degradación del perlecano derivado de células endoteliales humanas y la liberación del factor de crecimiento de fibroblastos básico unido por estromelisina, colagenasa, plasmina y heparanasas" . The Journal of Biological Chemistry . 271 (17): 10079–10086 . doi : 10.1074/jbc.271.17.10079 . PMID 8626565. S2CID 8872716 .  
  27. ↑ Patel VN, Knox SM, Likar KM, Lathrop CA, Hossain R, Eftekhari S, et al. (diciembre de 2007). " La escisión de heparanasa del heparán sulfato de perlecano modula la actividad de FGF10 durante la morfogénesis de ramificación de la glándula submandibular ex vivo" . Development . 134 (23): 4177–4186 . doi : 10.1242/dev.011171 . PMID 17959718. S2CID 25819221 .   
  28. ↑ Li W, He H, Kuo CL, Gao Y, Kawakita T, Tseng SC (junio de 2006). "Disolución y reensamblaje de la membrana basal por células epiteliales corneales limbares expandidas en membrana amniótica" . Investigative Ophthalmology & Visual Science . 47 (6): 2381– 2389. doi : 10.1167/iovs.05-1491 . PMC 1569675. PMID 16723447 .  
  29. ↑ Gonzalez EM, Reed CC, Bix G, Fu J, Zhang Y, Gopalakrishnan B, et al. (febrero de 2005). " Las metaloproteasas tipo BMP-1/Tolloid procesan la endorepelina, el fragmento C-terminal angiostático del perlecano" . The Journal of Biological Chemistry . 280 (8): 7080– 7087. doi : 10.1074/jbc.M409841200 . PMID 15591058. S2CID 35841044 .   
  30. ↑ Oda O, Shinzato T, Ohbayashi K, Takai I, Kunimatsu M, Maeda K, et al. (noviembre de 1996). "Purificación y caracterización del fragmento de perlecano en la orina de pacientes con insuficiencia renal terminal". Clinica Chimica Acta; Revista Internacional de Química Clínica . 255 (2): 119– 132. doi : 10.1016/0009-8981(96)06395-4 . PMID 8937755 .  
  31. ↑ Vuadens F, Benay C, Crettaz D, Gallot D, Sapin V, Schneider P, et al. (agosto de 2003). "Identificación de marcadores biológicos de la rotura prematura de membranas fetales: enfoque proteómico". Proteomics . 3 (8): 1521– 1525. doi : 10.1002/pmic.200300455 . PMID 12923777 . S2CID 5868882 .   
  32. ↑ Smith SE, French MM, Julian J, Paria BC, Dey SK, Carson DD (abril de 1997). "La expresión del proteoglicano de heparán sulfato (perlecano) en el blastocisto de ratón está regulada durante la implantación normal y tardía" . Developmental Biology . 184 (1): 38–47 . doi : 10.1006/dbio.1997.8521 . PMID 9142982 . 
  33. ↑ Handler M, Yurchenco PD, Iozzo RV (octubre de 1997). "Expresión del perlecano durante el desarrollo embriogénico murino" . Developmental Dynamics . 210 (2): 130– 145. doi : 10.1002/(SICI)1097-0177(199710)210:2 < 130::AID-AJA6 > 3.0.CO ; 2-H . PMID 9337134 . 
  34. ↑ Soulintzi N, Zagris N (2007). "Expresión espacial y temporal de perlecano en el embrión de pollo temprano". Cells Tissues Organs . 186 (4): 243– 256. doi : 10.1159/000107948 . PMID 17785960 . S2CID 41008675 .  
  35. 1 2 Weiser MC, Belknap JK, Grieshaber SS, Kinsella MG, Majack RA (noviembre de 1996). "Regulación del desarrollo de la expresión del gen perlecano en células musculares lisas aórticas". Matrix Biology . 15 (5): 331– 340. doi : 10.1016/S0945-053X(96)90136-5 . PMID 8981329 . 
  36. 1 2 Belknap JK, Weiser-Evans MC, Grieshaber SS, Majack RA, Stenmark KR (enero de 1999). "Relación entre la expresión génica de perlecano y tropoelastina y la replicación celular en la vasculatura pulmonar de rata en desarrollo". American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology . 20 (1): 24– 34. CiteSeerX 10.1.1.327.6391 . doi : 10.1165/ajrcmb.20.1.3321 . PMID 9870914 .  
  37. ↑ Shay EL, Greer CA, Treloar HB (julio de 2008). "Patrones de expresión dinámica de moléculas de ECM en la vía olfativa del ratón en desarrollo" . Developmental Dynamics . 237 (7): 1837–1850 . doi : 10.1002/dvdy.21595 . PMC 2787191. PMID 18570250 .  
  38. ↑ Key B, Treloar HB, Wangerek L, Ford MD, Nurcombe V (marzo de 1996). "Expresión y localización de FGF-1 en el sistema olfativo de la rata en desarrollo". The Journal of Comparative Neurology . 366 (2): 197– 206. doi : 10.1002/(SICI)1096-9861(19960304)366:2 < 197::AID - CNE1 > 3.0.CO ; 2-0 . PMID 8698881. S2CID 38919059 .  
  39. ↑ Braunewell KH, Pesheva P, McCarthy JB, Furcht LT, Schmitz B, Schachner M (abril de 1995). "Participación funcional de moléculas similares a versicano y decorina derivadas del nervio ciático y otros proteoglicanos de sulfato de condroitina en la adhesión celular mediada por la matriz extracelular y el crecimiento de neuritas". The European Journal of Neuroscience . 7 (4): 805– 814. doi : 10.1111/j.1460-9568.1995.tb00683.x . PMID 7620627. S2CID 21088798 .  
  40. 1 2 French MM, Smith SE, Akanbi K, Sanford T, Hecht J, Farach-Carson MC , et al. (mayo de 1999). "Expresión del proteoglicano de heparán sulfato, perlecano, durante la embriogénesis del ratón y actividad condrogénica del perlecano in vitro" . The Journal of Cell Biology . 145 (5): 1103– 1115. doi : 10.1083/jcb.145.5.1103 . PMC 2133131 . PMID 10352025 .   
  41. 1 2 3 4 Costell M, Gustafsson E, Aszódi A, Mörgelin M, Bloch W, Hunziker E, et al. (noviembre de 1999). "El perlecano mantiene la integridad del cartílago y algunas membranas basales" . The Journal of Cell Biology . 147 (5): 1109– 1122. doi : 10.1083 / jcb.147.5.1109 . PMC 2169352. PMID 10579729 .   
  42. ↑ Gomes RR, Joshi SS, Farach-Carson MC, Carson DD (febrero de 2006). "La reducción de la expresión de perlecano mediada por ribozimas afecta la diferenciación condrogénica de fibroblastos C3H10T1/2" . Differentiation ; Research in Biological Diversity . 74 (1): 53– 63. doi : 10.1111/j.1432-0436.2005.00055.x . PMC 1403289. PMID 16466400 .  
  43. ↑ Brown AJ, Alicknavitch M, D'Souza SS, Daikoku T, Kirn-Safran CB, Marchetti D, et al. (octubre de 2008). "La expresión y actividad de la heparanasa influyen en los procesos condrogénicos y osteogénicos durante la formación ósea endocondral" . Bone . 43 (4): 689– 699. doi : 10.1016/j.bone.2008.05.022 . PMC 2621444. PMID 18589009 .   
  44. ↑ Gomes RR, Van Kuppevelt TH, Farach-Carson MC, Carson DD (diciembre de 2006). "Distribución espaciotemporal de epítopos de heparán sulfato durante el desarrollo de la placa de crecimiento del cartílago murino". Histochemistry and Cell Biology . 126 (6): 713– 722. doi : 10.1007/s00418-006-0203-4 . PMID 16835755. S2CID 13223192 .  
  45. ↑ Manton KJ, Leong DF, Cool SM, Nurcombe V (noviembre de 2007). "La interrupción de la señalización de heparán y sulfato de condroitina mejora la diferenciación osteogénica derivada de células madre mesenquimales a través de las vías de señalización de la proteína morfogenética ósea" . Stem Cells . 25 (11): 2845–2854 . doi : 10.1634/stemcells.2007-0065 . PMID 17702986. S2CID 24843235 .  
  46. 1 2 Zoeller JJ, McQuillan A, Whitelock J, Ho SY, Iozzo RV (abril de 2008). "Una función central para el perlecano en el desarrollo del músculo esquelético y cardiovascular" . The Journal of Cell Biology . 181 (2): 381– 394. doi : 10.1083/jcb.200708022 . PMC 2315682. PMID 18426981 .  
  47. 1 2 Zoeller JJ, Whitelock JM, Iozzo RV (junio de 2009). "El perlecano regula la angiogénesis del desarrollo modulando el eje VEGF-VEGFR2" . Matrix Biology . 28 (5): 284–291 . doi : 10.1016/j.matbio.2009.04.010 . PMC 2705690. PMID 19422911 .  
  48. ↑ Girós A, Morante J, Gil-Sanz C, Fairén A, Costell M (abril de 2007). "El perlecano controla la neurogénesis en el telencéfalo en desarrollo" . BMC Developmental Biology . 7 29. doi : 10.1186/1471-213X-7-29 . PMC 1852307. PMID 17411441 .  
  49. 1 2 Rossi M, Morita H, Sormunen R, Airenne S, Kreivi M, Wang L, et al. (enero de 2003). "Las cadenas de heparán sulfato del perlecano son indispensables en la cápsula del cristalino , pero no en el riñón" . The EMBO Journal . 22 (2): 236– 245. doi : 10.1093/emboj/cdg019 . PMC 140094. PMID 12514129 .   
  50. ↑ Morita H, Yoshimura A, Inui K, Ideura T, Watanabe H, Wang L, et al. (junio de 2005). " El heparán sulfato de perlecano participa en la filtración glomerular" . Journal of the American Society of Nephrology . 16 (6): 1703– 1710. doi : 10.1681/ASN.2004050387 . PMID 15872080. S2CID 29638221 .   
  51. 1 2 Srinivasan Y, Lovicu FJ, Overbeek PA (febrero de 1998). "La expresión específica del factor de crecimiento transformante beta1 en el cristalino de ratones transgénicos causa cataratas subcapsulares anteriores" . The Journal of Clinical Investigation . 101 (3): 625– 634. doi : 10.1172/JCI1360 . PMC 508606. PMID 9449696 .  
  52. 1 2 Flügel-Koch C, Ohlmann A, Piatigorsky J, Tamm ER (octubre de 2002). "Interrupción del desarrollo del segmento anterior por sobreexpresión de TGF-beta1 en los ojos de ratones transgénicos" . Developmental Dynamics . 225 (2): 111– 125. doi : 10.1002/dvdy.10144 . PMID 12242711. S2CID 8607827 .  
  53. ↑ Zhou Z, Wang J, Cao R, Morita H, Soininen R, Chan KM, et al. (julio de 2004). "Angiogénesis alterada, cicatrización de heridas retardada y crecimiento tumoral retardado en ratones deficientes en heparán sulfato de perlecano" . Cancer Research . 64 (14): 4699– 4702. doi : 10.1158/0008-5472.CAN-04-0810 . PMID 15256433. S2CID 2295597 .   
  54. ↑ Ishijima M, Suzuki N, Hozumi K, Matsunobu T, Kosaki K, Kaneko H, et al. (mayo de 2012). " El perlecano modula la señalización del VEGF y es esencial para la vascularización en la formación ósea endocondral" . Matrix Biology . 31 (4): 234– 245. doi : 10.1016/j.matbio.2012.02.006 . PMC 3340529. PMID 22421594 .   
  55. ↑ Xu Z, Ichikawa N, Kosaki K, Yamada Y, Sasaki T, Sakai LY, et al. (julio de 2010). " La deficiencia de perlecano causa hipertrofia muscular, una disminución en la expresión de miostatina y cambios en la composición de las fibras musculares" . Matrix Biology . 29 (6): 461– 470. doi : 10.1016/j.matbio.2010.06.001 . PMC 2939214. PMID 20541011 .   
  56. ↑ Gomes RR, Farach-Carson MC, Carson DD (2004). "Funciones del perlecano en la condrogénesis: perspectivas a partir de modelos in vitro e in vivo". Cells Tissues Organs . 176 ( 1–3 ): 79–86 . doi : 10.1159/000075029 . PMID 14745237. S2CID 35356003 .  
  57. ↑ Iozzo RV, Pillarisetti J, Sharma B, Murdoch AD, Danielson KG, Uitto J, et al. (febrero de 1997). "Caracterización estructural y funcional del promotor del gen de la perlecana humana. Activación transcripcional por el factor de crecimiento transformante beta a través de un elemento de unión al factor nuclear 1" . The Journal of Biological Chemistry . 272 ​​(8): 5219– 5228. doi : 10.1074/jbc.272.8.5219 . PMID 9030592. S2CID 23851324 .   
  58. ↑ Dodge GR, Kovalszky I, Hassell JR, Iozzo RV (octubre de 1990). "El factor de crecimiento transformante beta altera la expresión del proteoglicano de heparán sulfato en células de carcinoma de colon humano" . The Journal of Biological Chemistry . 265 (29): 18023– 18029. doi : 10.1016/S0021-9258(18)38265-6 . PMID 1698783 . 
  59. ↑ Morris JE, Gaza G, Potter SW (febrero de 1994). "Estimulación específica del proteoglicano de heparán sulfato de la lámina basal en el epitelio uterino de ratón por Matrigel y por el factor de crecimiento transformante beta 1". In Vitro Cellular & Developmental Biology. Animal . 30A (2): 120– 128. doi : 10.1007/BF02631404 . PMID 8012654. S2CID 6254328 .  
  60. ↑ Schmidt A, Lorkowski S, Seidler D, Breithardt G, Buddecke E (julio de 2006). "TGF-beta1 genera una matriz extracelular multicomponente específica en células musculares lisas coronarias humanas". European Journal of Clinical Investigation . 36 (7): 473– 482. doi : 10.1111/j.1365-2362.2006.01658.x . PMID 16796604. S2CID 8803052 .  
  61. 1 2 García de Yébenes E, Ho A, Damani T, Fillit H, Blum M (agosto de 1999). "Regulación del proteoglicano de heparán sulfato, perlecano, por lesión e interleucina-1 alfa" . Journal of Neurochemistry . 73 (2): 812– 820. doi : 10.1046/j.1471-4159.1999.0730812.x . PMID 10428080. S2CID 14191496 .  
  62. ↑ Hashimoto-Uoshima M, Noguchi K, Suzuki M, Murata A, Yanagishita M, Ishikawa I (febrero de 2002). "Efectos de la interleucina-4 sobre la acumulación de proteoglicanos en fibroblastos gingivales humanos". Journal of Periodontal Research . 37 (1): 42– 49. doi : 10.1034/j.1600-0765.2002.00642.x . PMID 11842937 . 
  63. ↑ Tufvesson E, Westergren-Thorsson G (marzo de 2000). "Alteración de la síntesis de proteoglicanos en fibroblastos pulmonares humanos inducida por interleucina-1beta y factor de necrosis tumoral alfa". Journal of Cellular Biochemistry . 77 (2): 298– 309. doi : 10.1002/(SICI)1097-4644(20000501)77:2 < 298::AID - JCB12 > 3.0.CO ; 2-D . PMID 10723095. S2CID 40207474 .  
  64. ↑ Kaji T, Yamamoto C, Oh-i M, Fujiwara Y, Yamazaki Y, Morita T, et al. (septiembre de 2006). "El factor de crecimiento endotelial vascular VEGF165 induce la síntesis de perlecano a través del receptor VEGF-2 en células endoteliales microvasculares cerebrales humanas cultivadas". Biochimica et Biophysica Acta . 1760 (9): 1465– 1474. doi : 10.1016/j.bbagen.2006.06.010 . PMID 16914267 .  
  65. ↑ Llorente A, Prydz K, Sprangers M, Skretting G, Kolset SO, Sandvig K (enero de 2001). "La síntesis de proteoglicanos aumenta en células con endocitosis dependiente de clatrina alterada". Journal of Cell Science . 114 (Pt 2): 335–343 . doi : 10.1242/jcs.114.2.335 . PMID 11148135 . 
  66. ↑ Menne J, Park JK, Boehne M, Elger M, Lindschau C, Kirsch T, et al. (agosto de 2004). "Disminución de la pérdida de proteoglicanos y ausencia de albuminuria en ratones diabéticos con deficiencia de proteína quinasa C alfa" . Diabetes . 53 (8): 2101– 2109. doi : 10.2337/diabetes.53.8.2101 . PMID 15277392 .  
  67. 1 2 Sharma B, Iozzo RV (febrero de 1998). "Silenciamiento transcripcional de la expresión del gen perlecano por interferón gamma" . The Journal of Biological Chemistry . 273 (8): 4642– 4646. doi : 10.1074/jbc.273.8.4642 . PMID 9468523. S2CID 24591048 .  
  68. ↑ Fontana V, Choren V, Vauthay L, Calvo JC, Calvo L, Cameo M (diciembre de 2004). "El interferón gamma exógeno altera la masa celular interna murina y el desarrollo del trofoblasto. Efecto sobre la expresión de ErbB1, ErbB4 y el proteoglicano de heparán sulfato (perlecano)" . Reproduction . 128 (6): 717–725 . doi : 10.1530/rep.1.00335 . PMID 15579589 . 
  69. ↑ Li YZ, Liu XH, Cai LR (abril de 2007). "La regulación negativa de la expresión de perlecano contribuye a la inhibición de la proliferación de células endoteliales microvasculares cardíacas de rata inducida por hipoxia". Sheng Li Xue Bao . 59 (2): 221– 226. PMID 17437047 . 
  70. ^ Jin K, Mao XO, Eshoo MW, del Rio G, Rao R, Chen D, et al. (octubre de 2002). "Análisis de microarrays de ADNc de cambios en la expresión génica inducida por hipoxia neuronal in vitro". Investigación neuroquímica . 27 (10): 1105– 1112. doi : 10.1023/A:1020913123054 . PMID 12462408 . S2CID 7688503 .   
  71. ↑ Furuta GT, Dzus AL, Taylor CT, Colgan SP (agosto de 2000). "Inducción paralela de quimiocina y proteoglicano asociados a la superficie epitelial por hipoxia celular: implicaciones para la activación de neutrófilos" . Journal of Leukocyte Biology . 68 (2): 251– 259. doi : 10.1189/jlb.68.2.251 . PMID 10947070. S2CID 17526437 .  
  72. ↑ Snow AD, Sekiguchi R, Nochlin D, Fraser P, Kimata K, Mizutani A, et al. (enero de 1994). "Un papel importante del proteoglicano de sulfato de heparano (Perlecan) en un sistema modelo para la deposición y persistencia de beta-amiloide A fibrilar en el cerebro de rata". Neuron . 12 (1): 219– 234. doi : 10.1016 / 0896-6273(94)90165-1 . PMID 8292358. S2CID 39006966 .   
  73. ↑ Kirwan RP, Fenerty CH, Crean J, Wordinger RJ, Clark AF, O'Brien CJ (septiembre de 2005). "Influencia de la tensión mecánica cíclica en la expresión génica de la matriz extracelular en células de la lámina cribosa humana in vitro". Molecular Vision . 11 : 798–810 . PMID 16205625 . 
  74. ↑ Baker AB, Ettenson DS, Jonas M, Nugent MA, Iozzo RV, Edelman ER (agosto de 2008). "Las células endoteliales proporcionan control de retroalimentación para la remodelación vascular a través de una vía de señalización autocrina mecanosensible de TGF-beta" . Circulation Research . 103 (3): 289– 297. doi : 10.1161/CIRCRESAHA.108.179465 . PMC 2766078. PMID 18583708 .  
  75. ↑ Morita N, Iizuka K, Murakami T, Kawaguchi H (julio de 2004). "La cinasa N-terminal y c-Src se activan en las células musculares lisas aórticas humanas por estrés de presión". Bioquímica molecular y celular . 262 ( 1–2 ): 71–78 . doi : 10.1023/B:MCBI.0000038218.09259.1c . PMID 15532711. S2CID 23799480 .  
  76. ↑ Lee RT, Yamamoto C, Feng Y, Potter-Perigo S, Briggs WH, Landschulz KT, et al. (abril de 2001). " La tensión mecánica induce cambios específicos en la síntesis y organización de proteoglicanos por células musculares lisas vasculares" . The Journal of Biological Chemistry . 276 (17): 13847– 13851. doi : 10.1074/jbc.M010556200 . PMID 11278699. S2CID 46310253 .   
  77. ↑ Gallai M, Kovalszky I, Knittel T, Neubauer K, Armbrust T, Ramadori G (mayo de 1996). "Expresión de los proteoglicanos de la matriz extracelular perlecano y decorina en hígado de rata lesionado con tetracloruro de carbono y en células hepáticas aisladas" . The American Journal of Pathology . 148 (5): 1463– 1471. PMC 1861584. PMID 8623917 .  
  78. ^ Cozma LG, ID de Alexa, Dobrescu G (2004). "[Análisis transcripcional y de microscopía electrónica de proteoglicanos de la matriz extracelular en intoxicación aguda por paracetamol]". Revista Medico-Chirurgicala a Societatii De Medici Si Naturalisti Din Iasi (en rumano). 108 (2): 452– 457. PMID 15688831 . 
  79. ↑ Stark HJ, Baur M, Breitkreutz D, Mirancea N, Fusenig NE (mayo de 1999). "Cocultivos de queratinocitos organotípicos en medio definido con morfogénesis y diferenciación epidérmica regulares" . The Journal of Investigative Dermatology . 112 (5): 681– 691. doi : 10.1046/j.1523-1747.1999.00573.x . PMID 10233757 . 
  80. ↑ Breitkreutz D, Mirancea N, Schmidt C, Beck R, Werner U, Stark HJ, et al. (mayo de 2004). "Inhibición de la formación de la membrana basal por un fragmento de la cadena gamma1 de laminina que se une al nidógeno en cocultivos organotípicos de piel humana" . Journal of Cell Science . 117 (Pt 12): 2611–2622 . doi : 10.1242/jcs.01127 . PMID 15159456. S2CID 1421123 .   
  81. ↑ Ren R, Hutcheon AE, Guo XQ, Saeidi N, Melotti SA, Ruberti JW, et al. (octubre de 2008). " Los fibroblastos corneales primarios humanos sintetizan y depositan proteoglicanos en cultivos 3D a largo plazo" . Developmental Dynamics . 237 (10): 2705–2715 . doi : 10.1002/dvdy.21606 . PMC 3760227. PMID 18624285 .   
  82. ↑ Rothenburger M, Völker W, Vischer P, Glasmacher B, Scheld HH, Deiwick M (diciembre de 2002). "Ultraestructura de proteoglicanos en estructuras cardiovasculares de ingeniería tisular". Ingeniería de tejidos . 8 (6): 1049– 1056. doi : 10.1089/107632702320934146 . PMID 12542950 . 
  83. ↑ Ohji M, SundarRaj N, Hassell JR, Thoft RA (febrero de 1994). "Síntesis de la membrana basal por células epiteliales corneales humanas in vitro". Investigative Ophthalmology & Visual Science . 35 (2): 479– 485. PMID 8112997 . 
  84. ↑ Pradhan S, Zhang C, Jia X, Carson DD, Witt R, Farach-Carson MC (noviembre de 2009). "El péptido del dominio IV de Perlecan estimula el ensamblaje de células de glándulas salivales in vitro" . Ingeniería de tejidos. Parte A. 15 ( 11): 3309–3320 . doi : 10.1089/ten.TEA.2008.0669 . PMC 2792055. PMID 19382872 .  
  85. ↑ Cohen IR, Murdoch AD, Naso MF, Marchetti D, Berd D, Iozzo RV (noviembre de 1994). "Expresión anormal del proteoglicano perlecano en melanomas metastásicos". Cancer Research . 54 (22): 5771– 5774. PMID 7954396 . 
  86. ↑ Marchetti D, Menter D, Jin L, Nakajima M, Nicolson GL (octubre de 1993). "Efectos del factor de crecimiento nervioso sobre la invasión de células de melanoma humano y de ratón y la producción de heparanasa". International Journal of Cancer . 55 (4): 692– 699. doi : 10.1002/ijc.2910550430 . PMID 8407001. S2CID 25459596 .  
  87. ↑ Davies EJ, Blackhall FH, Shanks JH, David G, McGown AT, Swindell R, et al. (agosto de 2004). " Distribución y significado clínico de los proteoglicanos de heparán sulfato en el cáncer de ovario" . Clinical Cancer Research . 10 (15): 5178– 5186. doi : 10.1158/1078-0432.CCR-03-0103 . PMID 15297422. S2CID 396257 .   
  88. ↑ Kodama J, Shinyo Y, Kusumoto T, Seki N, Nakamura K, Hongo A, et al. (julio de 2005). "La pérdida de la expresión de heparán sulfato de la membrana basal se asocia con metástasis en los ganglios linfáticos pélvicos en el cáncer de cuello uterino invasivo". Oncology Reports . 14 (1): 89– 92. doi : 10.3892/or.14.1.89 (inactivo el 12 de julio de 2025). PMID 15944773 .  {{cite journal}}: CS1 maint: DOI inactivo desde julio de 2025 ( enlace )
  89. ↑ Jiang X, Multhaupt H, Chan E, Schaefer L, Schaefer RM, Couchman JR (diciembre de 2004). "Contribución esencial del perlecano derivado del tumor al crecimiento tumoral epidérmico y la angiogénesis" . The Journal of Histochemistry and Cytochemistry . 52 (12): 1575– 1590. doi : 10.1369/jhc.4A6353.2004 . PMID 15557212. S2CID 30223615 .  
  90. ↑ Sharma B, Handler M, Eichstetter I, Whitelock JM, Nugent MA, Iozzo RV (octubre de 1998). "La inhibición antisentido de la perlecana bloquea el crecimiento tumoral y la angiogénesis in vivo" . The Journal of Clinical Investigation . 102 (8): 1599– 1608. doi : 10.1172/JCI3793 . PMC 509011. PMID 9788974 .  
  91. ↑ Aviezer D, Iozzo RV, Noonan DM, Yayon A (abril de 1997). "Supresión de las funciones autocrinas y paracrinas del factor de crecimiento de fibroblastos básico mediante la expresión estable de ADNc antisentido de perlecano" . Biología molecular y celular . 17 (4): 1938–1946 . doi : 10.1128/MCB.17.4.1938 . PMC 232040. PMID 9121441 .  
  92. 1 2 Marchisone C, Del Grosso F, Masiello L, Prat M, Santi L, Noonan DM (2000). "Alteraciones fenotípicas en células de sarcoma de Kaposi por reducción antisentido de perlecano". Pathology & Oncology Research . 6 (1): 10– 17. doi : 10.1007/BF03032652 . PMID 10749582 . S2CID 10863998 .  
  93. ↑ Mathiak M, Yenisey C, Grant DS, Sharma B, Iozzo RV (junio de 1997). "Un papel para el perlecano en la supresión del crecimiento y la invasión en células de fibrosarcoma". Cancer Research . 57 (11): 2130– 2136. PMID 9187109 . 
  94. ↑ Mongiat M, Sweeney SM, San Antonio JD, Fu J, Iozzo RV (febrero de 2003). "Endorepelina, un nuevo inhibidor de la angiogénesis derivado del extremo C del perlecano" . The Journal of Biological Chemistry . 278 (6): 4238– 4249. doi : 10.1074/jbc.M210445200 . PMID 12435733. S2CID 21890366 .  
  95. ↑ Savorè C, Zhang C, Muir C, Liu R, Wyrwa J, Shu J, et al. (2005). "La reducción de la expresión de perlecano en células de cáncer de próstata metastásico disminuye las respuestas del factor de crecimiento que se une a la heparina in vitro y el crecimiento tumoral in vivo". Clinical & Experimental Metastasis . 22 (5): 377– 390. doi : 10.1007/s10585-005-2339-3 . PMID 16283481. S2CID 25142396 .   
  96. ↑ Conde-Knape K (2001). "Proteoglicanos de sulfato de heparano en modelos experimentales de diabetes: un papel para el perlecano en las complicaciones de la diabetes". Diabetes /Metabolism Research and Reviews . 17 (6): 412– 421. doi : 10.1002/dmrr.236 . PMID 11757076. S2CID 24443158 .  
  97. ↑ Pillarisetti S (febrero de 2000). "Modulación de lipoproteínas de proteoglicanos de heparán sulfato subendoteliales (perlecano) y aterogenicidad". Trends in Cardiovascular Medicine . 10 (2): 60– 65. doi : 10.1016/S1050-1738(00)00048-7 . PMID 11150731 . 
  98. ↑ Segev A, Nili N, Strauss BH (septiembre de 2004). "El papel del perlecano en la lesión arterial y la angiogénesis" . Cardiovascular Research . 63 (4): 603– 610. doi : 10.1016/j.cardiores.2004.03.028 . PMID 15306215 . 
  99. ↑ Wasty F, Alavi MZ, Moore S (abril de 1993). "Distribución de glicosaminoglicanos en la íntima de aortas humanas: cambios en la aterosclerosis y la diabetes mellitus". Diabetologia . 36 ( 4): 316– 322. doi : 10.1007/BF00400234 . PMID 8477876. S2CID 22550300 .  
  100. ↑ Vogl-Willis CA, Edwards IJ (abril de 2004). "Cambios estructurales inducidos por alta glucosa en el proteoglicano de heparán sulfato, perlecano, de células endoteliales aórticas humanas cultivadas". Biochimica et Biophysica Acta . 1672 (1): 36– 45. doi : 10.1016/j.bbagen.2004.02.005 . PMID 15056491 . 
  101. ↑ Tamsma JT, van den Born J, Bruijn JA, Assmann KJ, Weening JJ, Berden JH, et al. (marzo de 1994). " Expresión de componentes de la matriz extracelular glomerular en la nefropatía diabética humana: disminución del heparán sulfato en la membrana basal glomerular" . Diabetologia . 37 (3): 313– 320. doi : 10.1007/BF00398060 . PMID 8174847. S2CID 21069219 .   
  102. ↑ van Det NF, van den Born J, Tamsma JT, Verhagen NA, Berden JH, Bruijn JA, et al. (abril de 1996). "Efectos de la glucosa alta en la producción de proteoglicano de heparán sulfato por células mesangiales y epiteliales" . Kidney International . 49 (4): 1079–1089 . doi : 10.1038/ki.1996.157 . PMID 8691728 .  
  103. ↑ Olsson U, Bondjers G, Camejo G (marzo de 1999). "Los ácidos grasos modulan la composición de la matriz extracelular en células musculares lisas arteriales humanas cultivadas al alterar la expresión de genes para proteínas centrales de proteoglicanos". Diabetes . 48 (3): 616– 622. doi : 10.2337/diabetes.48.3.616 . PMID 10078565 . 
  104. ^ Yamamoto C, Wakata T, Fujiwara Y, Kaji T (febrero de 2005). "Inducción de la síntesis de un gran proteoglicano de heparán sulfato, perlecano, por trombina en cultivos de células de músculo liso coronario humano". Biochimica et Biophysica Acta . 1722 (1): 92– 102. doi : 10.1016/j.bbagen.2004.11.017 . PMID 15716125 . 
  105. ↑ Shimizu-Hirota R, Sasamura H, Mifune M, Nakaya H, Kuroda M, Hayashi M, et al. (diciembre de 2001). "Regulación de la síntesis de proteoglicanos vasculares por los receptores de angiotensina II tipo 1 y tipo 2" . Journal of the American Society of Nephrology . 12 (12): 2609– 2615. doi : 10.1681/ASN.V12122609 . PMID 11729229 .  
  106. ↑ Hopf M, Göhring W, Mann K, Timpl R (agosto de 2001). "Mapeo de sitios de unión para nidógenos, fibulina-2, fibronectina y heparina a diferentes módulos IG de perlecano". Journal of Molecular Biology . 311 (3): 529– 541. doi : 10.1006/jmbi.2001.4878 . PMID 11493006 . 
  107. ↑ Sasaki T, Göhring W, Pan TC, Chu ML, Timpl R (diciembre de 1995). "Unión de fibulina-2 de ratón y humana a ligandos de la matriz extracelular". Journal of Molecular Biology . 254 (5): 892– 899. doi : 10.1006/jmbi.1995.0664 . PMID 7500359 . 
  108. ↑ Mongiat M, Taylor K, Otto J, Aho S, Uitto J, Whitelock JM, et al. (marzo de 2000). "El núcleo proteico del proteoglicano perlecano se une específicamente al factor de crecimiento de fibroblastos-7" . The Journal of Biological Chemistry . 275 (10): 7095– 7100. doi : 10.1074/jbc.275.10.7095 . PMID 10702276. S2CID 9078105 .   
  109. ↑ Mongiat M, Otto J, Oldershaw R, Ferrer F, Sato JD, Iozzo RV (marzo de 2001). "La proteína de unión al factor de crecimiento de fibroblastos es un nuevo socio para el núcleo de la proteína perlecano" . The Journal of Biological Chemistry . 276 (13): 10263– 10271. doi : 10.1074/jbc.M011493200 . PMID 11148217. S2CID 22631858 .  
  110. ↑ Smeland S, Kolset SO, Lyon M, Norum KR, Blomhoff R (septiembre de 1997). "Unión de perlecano a transtiretina in vitro" . The Biochemical Journal . 326 (Pt 3): 829–836 . doi : 10.1042/bj3260829 . PMC 1218739. PMID 9307034 .